馮艷蕓，梁寧利，趙海燕，李海亮，康馨元

（中華人民共和國寶雞海關(guān)，陜西寶雞 721006）

農(nóng)藥在蔬菜生長過程中防止病蟲害、保護(hù)蔬菜生長等發(fā)揮著重要作用，但在農(nóng)藥使用的過程中，蔬菜本身會殘留使用過的農(nóng)藥，通過食物鏈進(jìn)入人體危害健康[1-5]。成熟的蔬菜進(jìn)入售賣市場前，進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測也是必要的環(huán)節(jié)，采樣、樣品的運(yùn)輸和保存是進(jìn)行準(zhǔn)確殘留分析的前提[6-7]。采取的樣品還需經(jīng)過不同方法的提取、凈化，常用的提取方法有浸漬、漂洗法、振蕩法、索氏提取法、超聲提取法、勻漿法等[8-10]。溶劑提取仍然是最主要的提取手段，國內(nèi)外的法定標(biāo)準(zhǔn)一般多采用丙酮、乙腈等極性溶劑，提取效率較高。樣品的含水量對提取效率可能產(chǎn)生較大的影響，對于含水量較高的蔬菜、水果等樣品，采用高速勻漿的方法簡便可行；中藥材含水量較低，一般可加入適量水浸潤，再加有機(jī)溶媒超聲提取，或采用加速溶劑萃取等方式，可獲得較高的提取率[11-15]。微波輔助萃取與超臨界流體萃取也是非常有前途的方法。然后運(yùn)用相關(guān)儀器檢測，在農(nóng)藥殘留分析中，可用于確證的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、質(zhì)譜法、薄層色譜法、紅外光譜法、核磁共振法和化學(xué)處理法[16-17]。

對陜西省商洛市蔬菜市場進(jìn)行了調(diào)查分析后，樣品采集分3個區(qū)域進(jìn)行，即大型批發(fā)市場、小型農(nóng)貿(mào)市場、大型超市；采用丙酮、乙腈、二氯化烷作為提取溶劑進(jìn)行考查，對小白菜中五氯硝基苯、敵敵畏、α-六六六、β-六六六、多菌靈、三唑酮6種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測。

1 試驗(yàn)方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 試劑

乙腈、丙酮、二氯化烷、氯化鈉、硫酸鎂，均為分析純。

1.1.2 儀器

KQ-250DB型超聲波儀，上海市超聲儀器有限公司產(chǎn)品；R-205型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，日本島津公司產(chǎn)品。

1.1.3 農(nóng)藥標(biāo)品

五氯硝基苯、敵敵畏、α-六六六、β-六六六、多菌靈、三唑酮，含量＞99%，購買于國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，配制不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。

1.2 樣品的采樣

對小白菜市場進(jìn)行了調(diào)查分析后，樣品采集分3個區(qū)域進(jìn)行采樣，即大型批發(fā)市場、大型超市、小型農(nóng)貿(mào)市場，在3個區(qū)域分別采收樣本。

1.3 樣品的制備

稱取新鮮的小白菜500 g，初步切碎混勻取可食部分，無需洗滌，不要切得太碎，以免組織汁液流失，所取樣品平均分成2份，一份供測定，另一份放置于-20℃冰箱中待用。

1.4 不同提取溶劑的研究

稱取小白菜樣品10 g，添加2 mL農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別以丙酮50 mL+二氯化烷（3∶7） 和乙腈50 mL+水（4∶1） 為提取溶劑，分別加入NaCl 1 g和MgSO44 g勻漿后超聲波提取30 min，2種提取方法分別重復(fù)3次。

1.5 不同提取方法的研究

選擇超聲波提取法、浸漬振蕩提取法、索氏提取法3種方法對樣品進(jìn)行提取，比較3種方法的添加回收率。超聲波提取法功率90 W，提取時間30 min，浸漬振蕩提取法提取10 h，索氏提取法提取5 h，每種方法重復(fù)3次，以50 mL乙腈+水（4∶1） 為提取溶劑，分別加入1 g Nacl和4 g MgSO4。

1.6 不同采樣地點(diǎn)小白菜農(nóng)殘的測定

根據(jù)優(yōu)化的提取溶劑、提取方法，對小白菜中的農(nóng)藥進(jìn)行測定。氣相色譜-質(zhì)譜法測定：色譜柱：DB-17MS型毛細(xì)管色譜柱（60m×0.25mm，0.25μm）；采用自動進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度230℃，載氣為He（純度99.99%），不分流進(jìn)樣，流量1 mL/min，進(jìn)樣體積1μL。程序升溫：起始溫度60℃，保持1.5 min，以30℃/min的速度升溫至120℃，再以10℃/min的速度升溫至200℃，保持10 min，以 30℃/min的速度升溫至300℃，保持10 min。質(zhì)譜條件：電子轟擊電離（EI），電子能量為70 eV，離子源溫度為230℃，接口溫度為250℃，質(zhì)量掃描范圍為40～ 450 m/z。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同提取溶劑的選擇

6種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和檢出限見表1。

以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，繪制6種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線。將一種質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液平行上樣6次，得到檢測方法的精密度。由表1可以看出，農(nóng)藥的相關(guān)系數(shù)為＞0.992 2；最低檢測限在0.50～9.50μg/kg；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤4.5，試驗(yàn)檢測條件可以用于樣品的檢測。

表1 6種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和檢出限

6種農(nóng)藥不同提取試劑的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差見表2。

表2 6種農(nóng)藥不同提取試劑的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差

除五氯硝基苯和敵敵畏外，其余農(nóng)藥品種的添加回收率均是乙腈+水提取法＞丙酮+二氯化烷提取法。乙腈是中等極性的溶劑，對蔬菜中的油脂、色素的溶解性小，而對大多數(shù)農(nóng)藥的溶解性都較好，在多種農(nóng)藥的殘留量提取中效果很好。

2.2 不同提取方法研究的結(jié)果

浸漬提取法、超聲波提取法與索氏提取法的回收率基本相當(dāng)，但超聲波提取法節(jié)省了大量的時間，操作方法也較為簡單，適合大批量的樣品檢測。

6種農(nóng)藥不同提取方法的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差見表3。

表3 6種農(nóng)藥不同提取方法的平均回收率和標(biāo)準(zhǔn)偏差

2.3 不同地區(qū)樣品中農(nóng)藥檢出結(jié)果

不同來源小白菜農(nóng)藥質(zhì)量濃度檢測見表4。

由表4可以看出，大型超市中樣品合格率高于小型農(nóng)貿(mào)市場和大型批發(fā)市場。大型超市樣品中除了三唑酮有2個樣品超過國標(biāo)規(guī)定，影響總體合格率，其余合格率基本在95%以上。小型農(nóng)貿(mào)市場和大型批發(fā)市場由于蔬菜直接來源于田地，沒有經(jīng)過任何諸如洗滌等的處理，更能接近原始數(shù)據(jù)，而在這2個區(qū)域中多菌靈和三唑酮兩種農(nóng)藥有5個樣品超出國標(biāo)規(guī)定。對于不同農(nóng)藥在蔬菜中的殘留情況，大型超市中小白菜農(nóng)藥殘留量普遍偏低，符合國標(biāo)規(guī)定，小型農(nóng)貿(mào)市場和批發(fā)市場小白菜農(nóng)藥殘留量基本符合國家規(guī)定。

表4 不同來源小白菜農(nóng)藥質(zhì)量濃度檢測