李文淼
本試驗選用未免疫過雞新城疫疫苗的7日齡蛋雛雞,分為A、B組,每組500只。A組免疫雞新城疫活疫苗(Clone30株);B組免疫雞新城疫活疫苗(VG/GA株);免疫后每隔半個月采集血樣一次,用HI的方法進行樣品抗體的實驗室檢測。結論如下:A廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗(Clone30株)與B廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗(VG/GA株)相比,能產(chǎn)生更高的免疫抗體滴度且免疫抗體產(chǎn)生更快、持續(xù)時間更長。
雞新城疫是一種具有高度傳染性的病毒性疾病,發(fā)病率和死亡率在90%以上。合理的選擇ND疫苗將有利于減少和防止免疫失敗的發(fā)生,進而提高ND疫苗免疫效果。
1材料與方法
1.1試驗材料
1.1.1.試驗地點及試驗動物篩選
大興區(qū)某雞場試驗雞舍。
大興區(qū)某雞場孵化的一周齡海蘭蛋雞1000只。雞只臨床檢查健康,均未免疫過雞新城疫疫苗。
1.1.2試驗疫苗
試驗用兩種疫苗均由大興區(qū)某雞場提供。
雞新城疫活疫苗(Clone30株),生產(chǎn)廠家:A廠家;規(guī)格:500羽份/瓶。
雞新城疫活疫苗(VG/GA株),生產(chǎn)廠家:B廠家;規(guī)格:1000羽份/瓶。
1.1.3試驗材料及試劑配制
儀器:高壓滅菌器、離心機、96孔V型微量凝集試驗板、微量吸液器等。
試劑:
(1)標準抗原;
(2)稀釋液:高壓滅菌生理鹽水;
(3)1%紅細胞液;
(4)紅細胞保存液;
(5)待檢血清:將被檢雞群編號登記,用消毒過的干燥注射器采血,注入潔凈干燥試管內(nèi),在室溫中靜置或離心,待血清析出后使用。
1.2試驗方法
1.2.1試驗分組
試驗雞隨機分為A、B組,每組500只;分別在相對隔離、條件相同的環(huán)境下飼養(yǎng),直到試驗結束。
A組:免疫A廠家雞新城疫活疫苗(Clone30株),首次免疫日期為4月7日(試驗雞根據(jù)免疫程序免疫,7日齡時首免,21日齡進行第二次免疫,免疫方式為滴鼻點眼)。
B組:免疫B廠家雞新城疫活疫苗(VG/GA株),首次免疫日期為4月7日(試驗雞免疫程序同A組)。
1.2.2試驗采血稱重計劃
采血計劃:每組在免疫后0、14、28、42、56、70、84、98天隨機采集20只雞血清。
稱重計劃:每組在7日齡和105日齡分別計算平均體重。稱重的同時檢查雞群的均勻度。
1.2.3雞新城疫抗體檢測
本試驗的實驗室檢測采用雞新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗體水平測定法
2結果與分析
2.1新城疫抗體檢測結果
根據(jù)試驗采樣計劃,用HI進行雞新城疫抗體監(jiān)測,記錄每次監(jiān)測的結果。
2.1.1試驗雞免疫后抗體滴度動態(tài)變化
結果表明:
A組抗體檢測均值在免疫后14天最低為4.15,之后逐漸升高,在免疫后28天上升到6.25,免疫后42天上升到8.35,而在免疫后56天達到峰值9.95,之后出現(xiàn)下降趨勢,免疫后70天下降到9.25,免疫后84天下降到8.65,免疫后98天下降到6.85。
B組抗體檢測均值在免疫后14天最低為3.75,之后逐漸升高,在免疫后28天上升到5.75,免疫后42天上升到7.95,而在免疫后56天達到峰值9.35,之后出現(xiàn)下降趨勢,免疫后70天下降到8.65,免疫后84天下降到8.05,免疫后98天下降到6.05。
A組疫苗免疫后抗體檢測均值在各個時期均高于B組。通過t檢驗分析,結果A組與B組在每個階段都有極顯著的差異(p<0.01)。
2.1.2免疫后的增重情況
(1)兩組在7日齡、105日齡時分別空腹稱重。即7日齡時平均體重作為基礎體重,結果為A組:54.7g;B組:54.3g;在105日齡時稱重得出的平均體重為免疫后體重,結果為A組:875.5g;B組:869.7g。
結果表明:在7日齡和105日齡,A組平均體重均高于B組。A組的增重值也高于B組。通過t檢驗分析,A組在105日齡的體重和增重值都顯著高于B組(P<0.05)。經(jīng)卡方檢驗A組與B組的差異不顯著(P>0.05)。
3討論
本試驗選擇在雛雞7日齡和21日齡分別免疫一次是因為雛雞的母源抗體水平顯著地影響著新城疫疫苗的免疫效果。我們把母源抗體效價平均值降至log2為4時稱為免疫臨界線,如果雛雞HI抗體水平在4以上,免疫新城疫疫苗后7到10天,其HI抗體水平都會出現(xiàn)下降。母源抗體水平越高,免疫的新城疫抗體效價下降幅度越大,直至20日齡時才會有所好轉,但都不會高于原抗體水平。所以母源抗體水平低的雛雞,免疫接種新城疫疫苗10天后,其抗體均值會出現(xiàn)明顯上升,3周后稍有下降,但仍高于原水平。因此要適時接種疫苗。
4小結
(1)在整個試驗過程中,分別對兩組雞的體重進行監(jiān)測,得出結果即:試驗A組的增重值明顯高于試驗B組。
(2)在整個試驗過程中,對兩組雞的抗體檢測結果顯示:試驗A組在免疫后各階段的抗體滴度都高于試驗B組。
(3)在本試驗條件下,A廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗(Clone30株)與B廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗(VG/GA株)相比,能產(chǎn)生更高的免疫抗體滴度,且免疫抗體產(chǎn)生更快、持續(xù)時間更長。
(作者單位:102600北京市大興區(qū)動物疾病控制中心)