宋 揚(yáng)，李 贄，藏玉婷，劉鑫瑩，李應(yīng)鶴，武 嘯

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司研發(fā)中心，哈爾濱 150069）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒（Ⅰ群，4型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+TJ株+HY株）：批號(hào)：201501、201502、201503，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備。

雞新城疫病毒血凝抑制試驗(yàn)抗原：抗原批號(hào)：NDV-La Sota-K-06，HA效價(jià)1:1024，規(guī)格：2.0 mL·瓶-1，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備。

H9亞型禽流感病毒血凝抑制試驗(yàn)抗原：抗原批號(hào)：AIV（H9）-TJ-K-01，HA效價(jià)1:512，規(guī)格：2.0 mL·瓶-1，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備。

Ⅰ群4型禽腺病毒瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)抗原：抗原批號(hào)：FAV-HY-K-01，瓊擴(kuò)效價(jià)1:2，規(guī)格：2.0 mL·瓶-1，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備。

SPF雞：由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司五常SPF雞場(chǎng)提供。

注射器：購(gòu)自上海達(dá)美醫(yī)用塑料廠(chǎng)。

1.2 試驗(yàn)方法

每批制品各經(jīng)頸部皮下接種7和21日齡SPF雞30只，7日齡SPF雞0.2 mL·只-1，21日齡SPF雞0.5 mL·只-1。7日齡雞于免疫后7、11、14、21、28 d及1、2和3個(gè)月；21日齡雞于免疫后7、11、14、21、28 d及1、2、3、4和5個(gè)月采血，分離血清，分別測(cè)定免疫雞血清中雞新城疫病毒、禽流感（H9亞型）病毒和禽腺病毒抗體效價(jià)[1]。同時(shí)設(shè)同批次同日SPF雞5只，注射相應(yīng)劑量的生理鹽水作為對(duì)照，每組分別隔離飼養(yǎng)。

2 結(jié)果分析

2.1 7日齡SPF雞免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

7日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

由表1可知，3批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后14日抗體效價(jià)達(dá)到1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；28日達(dá)到高峰，并持續(xù)至免疫后1個(gè)月，免疫后3個(gè)月部分批抗體效價(jià)＜4log2。

7日齡SPF雞禽流感（H9）亞型免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，2批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后21日抗體效價(jià)達(dá)到高峰，可產(chǎn)生有效保護(hù)；并持續(xù)至免疫后1個(gè)月，免疫后2個(gè)月抗體開(kāi)始下降，免疫后3個(gè)月抗體效價(jià)約為4log2。

表1 7日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

表2 7日齡SPF雞禽流感（H9）亞型免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

7日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，3批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后14日抗體效價(jià)達(dá)到1∶1，可產(chǎn)生有效保護(hù)；免疫后21日達(dá)高峰并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體開(kāi)始下降，且降至保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)以下。

表3 7日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

2.2 21日齡SPF雞免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

21日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞，免疫后14日抗體效價(jià)達(dá)到1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；28日達(dá)到高峰，并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體下降，5個(gè)月部分批次抗體效價(jià)低于1∶16。

21日齡SPF雞禽流感（H9亞型）免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞，免疫后14日抗體效價(jià)達(dá)到1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；21日達(dá)到高峰，并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體下降，5個(gè)月部分批次疫苗抗體效價(jià)＜4log2。

21日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。

由表6可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞，免疫后14日抗體效價(jià)達(dá)到1∶1，可產(chǎn)生有效保護(hù)；免疫后21日達(dá)高峰并持續(xù)至免疫后4個(gè)月，免疫后5個(gè)月抗體開(kāi)始下降，且降至保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)以下。

表4 21日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

表5 21日齡SPF雞禽流感（H9亞型）免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

表6 21日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒（Ⅰ群，4型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+TJ株+HY株）免疫2周齡以下的雞免疫持續(xù)期為2個(gè)月；免疫＞2周齡的雞免疫持續(xù)期為4個(gè)月。