■龔俊勇 吳偉堅 左建軍

（1.深圳綠微康動物營養(yǎng)有限公司，廣東深圳518055；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州，510642）

目前家禽養(yǎng)殖大多采取規(guī)?；?、集約化飼養(yǎng)，為提高生長速度、縮短家禽上市時間及增加出欄重，需額外添加高油脂滿足其生長需求。家禽對油脂的消化吸收與眾多因素有關(guān)，包括家禽的種類、遺傳性狀、家禽的日齡以及油脂的類型等。在動物的幼齡階段，各消化器官發(fā)育并不完全，消化酶分泌過低，對營養(yǎng)物質(zhì)包括油脂的消化并不充分[1-2]；家禽成年階段對高能物質(zhì)消化率有限，體內(nèi)分泌的脂肪酶可能仍無法滿足對高能油脂的分解。因此現(xiàn)代生產(chǎn)中，家禽日糧中需額外添加脂肪酶，作為解決機體內(nèi)源消化酶分泌不足及高能油脂無法充分消化吸收的重要途徑。

脂肪酶是脂肪消化利用最基本的酶，能將脂肪水解為游離脂肪酸、甘油及甘油單酯供動物吸收利用。家禽的脂肪酶主要是通過胰腺分泌，而家禽的肌胃和十二指腸間的食糜會以2～4 次/h 的頻率進行往返流動，因而家禽從肌胃開始即含有少量脂肪酶[3]。另外，膽汁的分泌也是脂肪消化所必不可少的，膽汁中包含膽汁酸、甘油膽酸、牛磺膽酸等，能對脂肪起到乳化作用，促進脂肪酶對脂肪的消化。試驗Ⅰ通過在AA 肉雞日糧中添加不同劑量脂肪酶，研究其對AA 肉雞生長性能、表觀消化率及腹脂率的影響，探討在AA 肉雞日糧中添加何種劑量的脂肪酶更利于改善生產(chǎn)性能，提高養(yǎng)殖效益；試驗Ⅱ通過在AA 肉雞日糧中配合添加脂肪酶和乳化劑，探討二者之間的互作效應(yīng)，為實際生產(chǎn)中脂肪酶和乳化劑在AA 肉雞中的合理應(yīng)用提供實踐參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

脂肪酶酶活定義：在一定條件下（溫度36 ℃和pH 值9.4），水解甘油三酯每分鐘生成1 μmol 脂肪酸的酶量，即為一個活力單位，以U/g或U/ml表示。

脂肪酶和乳化劑由某公司提供，脂肪酶酶活為113 400 U/g。

1.2 試驗地點

華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物實驗室養(yǎng)殖基地。

1.3 飼養(yǎng)試驗

1.3.1 試驗設(shè)計

試驗Ⅰ：

選取600 只1 日齡健康、體重相近的愛拔益加（AA）母雞，隨機分成A、B、C、D、E共5個處理組，每個處理6 個重復(fù)，每重復(fù)20 只雞。A 為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，B、C、D、E組在基礎(chǔ)日糧中分別添加不同劑量脂肪酶，具體試驗分組見表1。

表1 飼養(yǎng)試驗設(shè)計

試驗Ⅱ：

選取480 只1 日齡健康、體重相近的愛拔益加（AA）母雞，隨機分成F、G、H、I 共4 個處理組，每個處理6 個重復(fù)，每重復(fù)20 只雞。F 為對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，G、H、I 組在基礎(chǔ)日糧中分別添加脂肪酶、乳化劑及脂肪酶與乳化劑組合，具體試驗分組見表2。

表2 飼養(yǎng)試驗設(shè)計

1.3.2 日糧配方和營養(yǎng)水平試驗Ⅰ：

試驗日糧參照NRC（1994）家禽營養(yǎng)需要配制，并結(jié)合中國AA肉仔雞飼養(yǎng)標準，試驗日糧采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，分為兩個階段?；A(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)水平見表3。

試驗Ⅱ的基礎(chǔ)試驗日糧同試驗Ⅰ。

1.3.3 飼養(yǎng)管理

試驗Ⅰ和試驗Ⅱ的試驗期均為42 d，分兩個階段飼養(yǎng)：1～21 d、22～42 d。全期自由采食、飲水，采用24 h光照制，免疫及飼養(yǎng)管理均按照華南農(nóng)業(yè)大學(xué)種雞場管理程序進行操作。

1.3.4 測定指標及方法

分別在第1、21日齡和第42日齡時以重復(fù)為單位對全群試驗雞進行空腹稱重（空腹期8 h，斷料不斷水），并統(tǒng)計試驗期間用料量。統(tǒng)計各處理組1～21、22～42 d 及1～42 d 期間的平均日采食量、平均日增重和料重比。

采用常規(guī)方法進行屠宰，分別測定腹脂重、全凈膛重，腹脂率(%)=腹脂重/全凈膛重×100。

1.4 代謝試驗

選取60只14日齡健康、體重相近的AA肉母雞隨機分組，每個處理組6 個重復(fù)，每個重復(fù)2 只雞，每個重復(fù)一個代謝籠。試驗設(shè)計分組如表1、表2。

試驗方法參考趙養(yǎng)濤等（2008）[4]。整個試驗期分為適應(yīng)期、預(yù)飼期和正飼期，共10 d。適應(yīng)期4 d，預(yù)飼期3 d，在21 日齡時開始預(yù)飼添加有0.5% TiO2飼糧（同飼養(yǎng)試驗）；正試期3 d，于24 日齡時開始收糞，連續(xù)收集3 d，每天上午10:00 點和下午4:00 點收糞，清除羽毛及皮屑，按收糞重量每100 g噴灑10%的鹽酸溶液5 ml。以重復(fù)為單位將3 d所收集的糞樣置于65 ℃烘箱烘至恒重，室溫下回潮24 h，粉碎過40目篩，制成風(fēng)干樣于-20 ℃冰箱保存待測干物質(zhì)、粗脂肪和能量。

表3 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

飼料和糞中干物質(zhì)參照GB/T 6435—2006 的方法測定；粗脂肪含量采用上海纖檢SZC-C型脂肪測定儀測定；能量使用IKAC2000熱量儀測定。

飼料和糞中TiO2參照Myers 等（2004）[5]方法進行測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2003 軟件進行整理，SPSS18.0 軟件進行One-Way ANOVA 方差分析，用鄧肯式新復(fù)極差法進行多重比較，試驗數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標準誤（M±S.E.）”表示，置信區(qū)間95%。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗Ⅰ：不同添加劑量脂肪酶對AA肉雞生長性能的影響（見表4）

表4 不同添加劑量脂肪酶對AA肉雞生長性能的影響

由表4可知，21日齡時，各組間體重差異不顯著，但C組（P=0.057）和D組（P=0.099）有提高體重的趨勢；42日齡時，與對照組比較，D組有提高體重的趨勢（0.05＜P＜0.10）。22～42日齡時，料重比方面，與對照組A比較，D、E組分別降低4.48%、3.98%，均差異顯著（P＜0.05）。1～42日齡，平均日增重方面，各試驗組均有提高但差異不顯著（P＞0.05）；料重比方面，與對照組A相比，D、E組分別降低4.12%、3.61%，均差異顯著（P＜0.05）。

2.2 試驗Ⅱ：脂肪酶和乳化劑對AA肉雞生長性能的影響（見表5）

表5 脂肪酶和乳化劑對AA肉雞生長性能的影響

由表5可知，21日齡時，與F對照組比較，G、H組體重分別增加1.60%、2.09%，I 組體重增加2.54%，有提高體重的趨勢（P=0.097）；42日齡時，G、H組體重有提高，但I 組體重顯著提高（P=0.049）。1～21 日齡，與對照組相比，試驗肉雞平均日采食量沒有顯著差異，I 組料重比降低5.36%（P=0.088）。1～42 日齡，平均日采食量方面，與F 對照組比較，G、H、I 組均降低差異不顯著（P＞0.05）；平均日增重方面，I 組提高2.13%，差異顯著（P=0.048）；料重比方面，I 組降低5.61%（P=0.062）。

2.3 試驗Ⅰ：不同添加水平脂肪酶對AA肉雞日糧中表觀消化率的影響（見表6）

表6 不同添加水平脂肪酶對AA肉雞日糧表觀消化率的影響（%）

由表6 可知，與A 對照組比較，B、C、D、E 組干物質(zhì)和能量表觀消化率均無顯著影響，D組（添加100 g/t脂肪酶）有提高粗脂肪利用率趨勢(P=0.097)，E 組（添加200 g/t 脂肪酶）可提高粗脂肪利用率4.29%，差異顯著（P＜0.05）。

2.4 試驗Ⅱ：脂肪酶和乳化劑對AA肉雞日糧中表觀消化率的影響（見表7）

由表7可知，與F對照組比較，G、H、I組對干物質(zhì)和能量表觀消化率均無顯著影響，I組（脂肪酶和乳化劑配合使用）可提高粗脂肪利用率3.11%(P=0.086)。

2.5 試驗Ⅰ：不同添加水平脂肪酶對AA 肉雞前、中后期腹脂率的影響（見表8）

表7 脂肪酶和乳化劑對AA肉雞日糧表觀消化率的影響（%）

表8 不同添加水平脂肪酶對AA肉雞前、中后期腹脂率的影響（%）

由表8可知，21日齡，與A對照組比較，C、D、E組分別降低8.16%、10.20%、12.24%，均差異顯著（P＜0.05）；42 日齡，C、D、E 組腹脂率降低7.25%、9.42%、8.70%，均差異顯著（P＜0.05）。

2.6 試驗Ⅱ：脂肪酶和乳化劑對AA 肉雞前、中后期腹脂率的影響（見表9）

表9 脂肪酶和乳化劑對AA肉雞前、中后期腹脂率的影響（%）

由表9 可知，21 日齡，與F 對照組比較，G、H、I 組腹脂率降低10.53%、8.42%、13.68%，均差異顯著（P＜0.05）；42 日齡，G、H、I 組腹脂率分別降低7.69%（P＞0.05）、6.15%（P＞0.05）、10.77%（P＜0.05）。

3 討論

3.1 不同添加水平脂肪酶和乳化劑對AA 肉雞生長性能的影響

脂肪是動物機體重要的供能、儲能物質(zhì)，其能量為碳水化合物的2.25 倍，是動物必需的營養(yǎng)物質(zhì)之一。同時，脂肪可提供必需脂肪酸，具有調(diào)節(jié)機體代謝等營養(yǎng)生理作用。為此，人們在設(shè)計日糧配方時，往往通過添加油脂或脂肪粉的形式來滿足動物對高能量的需求。然而生產(chǎn)實踐證明，幼齡畜禽對脂肪的消化利用率并不高，特別是當(dāng)體內(nèi)內(nèi)源脂肪酶分泌不足時，便不能有效分解日糧中過量添加的脂肪，可能導(dǎo)致營養(yǎng)性腹瀉和脂肪肝的發(fā)生。相關(guān)研究報道指出，22～25 日齡乳仔豬對脂肪的消化率僅為50%～60%，斷奶后3～4 周，隨著膽汁的分泌增多，對脂肪的消化率也只有70%～80%。李德發(fā)等（1993）[6]對生長豬對不同油脂的消化率的研究結(jié)果顯示，生長豬對豆油、棕櫚油、豬油的消化利用率分別為80.48%、75.03%、63.51%，這說明乳仔豬對粗脂肪的利用率并不高，有很大的提升空間。

脂肪酶是脂肪消化利用最基本的酶，能將脂肪水解為游離脂肪酸、甘油和甘油單酯以供動物吸收利用。飼料中添加脂肪酶可促使脂肪釋放出脂肪酸，其中的一些中鏈脂肪酸能顯著抑制有害微生物的生長，起到類似抗生素的作用；增加飼料的香味、改進飼料風(fēng)味。Tan 等（1994）[7]研究指出，在含高玉米、全脂米糠、干苜蓿粉、餅粕等飼糧中添加脂肪酶，可提高豬、禽表觀消化能5%～11%，提高日增重4%～10%，提高飼料轉(zhuǎn)化率2%～7%。于旭華等（2001）[1]和安永義等（1999）[2]研究表明，家禽胰腺中的脂肪酶活性及膽汁分泌量隨日齡的增加而升高，在3周末逐漸達到最高值，1～8 周齡時消化脂肪的能力逐漸提高。蘇繼影（2006）[8]在脂肪源為豆油、棕櫚油、椰子油的斷奶仔豬基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.02%脂肪酶和0.4%卵磷脂，結(jié)果表明，與對照組相比，脂肪酶組的日增重、日采食量分別提高47.27%、36.35%，而卵磷脂組則分別只提高12.73%、9.96%，且飼料消化率沒有得到改善。葉慧等（2013）[9]試驗發(fā)現(xiàn)，添加脂肪酶能夠顯著增加平均日增重和平均日采食量，降低后期和全期料肉比（P＜0.05）。馬卿山等（2013）[10]的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，添加脂肪酶可顯著降低1～21 日齡和21～42 日齡肉雞料肉比（P＜0.05），對平均日增重和平均日采食量有提高趨勢（0.05＜P＜0.10）。試驗Ⅰ結(jié)果顯示，在AA 肉雞日糧中添加不同劑量脂肪酶，均可改善動物生長性能，提高日增重，降低料重比，其中最適添加量為75～100 g/t，此研究結(jié)果和前人許多學(xué)者研究結(jié)果相似。秦鵬等（2003）[11]在肉雞日糧中添加乳化劑，試驗表明，使用乳化劑后可顯著提高粗脂肪利用率（P＜0.05)，但對生長性能能無顯著影響（P＞0.05)，但和脂肪酶配合使用下則可以顯著提高肉雞的日增重（P＞0.05)，顯然，要想提高脂肪的消化率，脂肪酶和乳化劑協(xié)同作用比單獨使用效果明顯。

3.2 不同添加水平脂肪酶和乳化劑對AA 肉雞表觀消化率的影響

油脂是畜禽動物生長過程中重要的能量來源之一，但生產(chǎn)實踐中，幼齡畜禽對脂肪的利用率不高，效果不明顯，成年畜禽飼糧中額外添加脂肪也達不到預(yù)期效果，造成資源浪費。飼料中添加脂肪酶，可提高動物對飼料的利用率，特別是油脂類高能物質(zhì)，降低營養(yǎng)性腹瀉。Brenes等（2008）[12]在玉米型日糧基礎(chǔ)營養(yǎng)水平上外源添加葵花籽油和脂肪酶飼喂科寶肉公雞，發(fā)現(xiàn)顯著提高公雞21 d 粗脂肪消化率；何前等（2010）[13]研究表明，飼糧中添加脂肪酶，能顯著提高粗脂肪的表觀利用率，有提高粗蛋白質(zhì)表觀利用率的趨勢，顯著降低能量表觀利用率；杜妮妮（2012）[14]試驗結(jié)果表明，油脂日糧中添加外源脂肪酶，顯著地提高了1～3周齡肉仔雞飼糧AME濃度，并顯著地提高了肉仔雞3 周齡粗蛋白、粗脂肪的表觀消化率；翁曉輝等（2013）[15]研究表明，添加350 g/t脂肪酶能顯著提高脂肪、干物質(zhì)及蛋白質(zhì)表觀利用率。但同時也有不一致的報道，Kermanshahi等（1998）[16]在肉雞飼糧中分別添加0、5、100、200、400 U/g的液體Pseudomouas sp.脂肪酶，顯著降低了EE利用率；Meng等（2004）[17]在肉雞菜籽油及牛脂的小麥型飼糧（菜籽油及牛脂添加量均為5%）中添加100 U/kg 的脂肪酶，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對EE 表觀利用率影響不顯著；Slominski 等（2006）[18]在肉仔雞的小麥型飼糧中添加100 U/kg飼糧的脂肪酶，結(jié)果發(fā)現(xiàn)脂肪酶的添加對EE表觀利用率無顯著影響。

有研究表明，幼禽體內(nèi)消化酶大多數(shù)在2周齡左右才到逐漸分泌到達高峰，但個別酶類如脂肪酶要到3周齡左右[1-2]；同時，即使處于中后期的畜禽動物，特別是生長快大型肉雞，日糧中會額外添加高油脂滿足其對高能的需求，但成年畜禽飼糧中添加油脂也達不到預(yù)期效果。因此，在畜禽日糧中添加外源脂肪酶來彌補內(nèi)源脂肪酶分泌不足以達到提高脂肪利用率的目的。本試驗結(jié)果顯示，添加不同劑量脂肪酶對干物質(zhì)利用率均無顯著影響，但對粗脂肪利用率有提高趨勢，當(dāng)添加量增加到200 g/t時，對提高粗脂肪利用率效果顯著；乳化劑和脂肪酶配合使用，也可達到提高粗脂肪利用率的效果。這與許多學(xué)者試驗結(jié)果一致[10，19]。李芳林等(2012)[19]研究結(jié)果表明，日糧中添加脂肪酶能提高表觀代謝能；馬卿山等(2013)[10]的研究指出，添加脂肪酶可顯著提高肉雞對粗脂肪的表觀利用率。

3.3 不同添加水平脂肪酶和乳化劑對AA 肉雞腹脂率的影響

禽類脂肪細胞生成脂肪的能力是有限的，對于家禽來說，肝臟是脂肪酸和甘油三酯的主要合成場所。葡萄糖、降解的脂肪以及氨基酸等的代謝產(chǎn)物均可以作為脂肪酸合成的原料。有關(guān)日糧中不同能量水平對肉雞腹脂沉積的影響的關(guān)系方面，研究結(jié)論總體呈一致性。Crespo（2002）[20]研究結(jié)果指出，隨著能量水平的不斷增加，肉雞脂肪沉積增加。Leeson 等（1996）[21]研究認為，能量水平的差異對家禽酮體脂肪沉積和腹脂率影響較大，能量高低和脂肪沉積水平呈線性關(guān)系，研究了肉雞不同能量水平對脂肪沉積的影響，結(jié)果顯示，能量水平越低，可顯著降低體脂沉積，腹脂率降低。侯水生等（1997）[22]研究結(jié)果表明，當(dāng)肉仔雞日糧中代謝能濃度不斷升高時，肉雞腹脂率也隨著提高明顯。有關(guān)肉雞日糧中添加脂肪酶對肉雞腹脂率的影響研究方面，結(jié)論說法基本一致。李芳林等（2012）[19]試驗結(jié)果表明，日糧中添加脂肪酶能降低肉雞腹脂率（P＜0.05），添加脂肪酶還能降低血液中甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白（P＜0.05），提高高密度脂蛋白含量（P＜0.05）。馬卿山等（2013）[10]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)日糧能量降低0.42 MJ/kg 基礎(chǔ)上添加脂肪酶能顯著提高肉雞腿肌率（P＜0.05），在基礎(chǔ)日糧能量降低0.63 MJ/kg 基礎(chǔ)上添加脂肪酶則顯著降低了屠宰率（P＜0.05）。Meng 等（2004）[17]對脂質(zhì)蓄積原因的研究發(fā)現(xiàn)，食物中添加1,3-二酰甘油可防止高脂肪誘導(dǎo)的脂質(zhì)在肝臟和腹部脂肪的蓄積。

本試驗結(jié)果表明，肉雞日糧中添加不同水平脂肪酶，可顯著降低腹脂率，當(dāng)乳化劑和脂肪酶配合使用，腹脂率降低更加顯著。分析可能的原因是添加脂肪酶可提高油脂利用率，減少脂肪沉積，從而降低腹脂率；乳化劑和脂肪酶配合使用，二者可協(xié)同作用，提高能量和粗脂肪利用率，顯著降低腹脂率。

4 結(jié)論

試驗Ⅰ肉雞日糧中添加不同劑量脂肪酶，可補充幼齡動物內(nèi)源脂肪酶的分泌不足，一定程度改善肉雞生長性能，有提高能量和粗脂肪利用率的趨勢，同時可顯著降低腹脂率，其中以75～100 g/t 為最適宜添加量。

試驗Ⅱ肉雞日糧中配合添加脂肪酶與乳化劑，二者可協(xié)同互作，更有效提高肉雞生長性能及粗脂肪利用率，顯著降低腹脂率。