黃 勇 賀勝利 郭良鑫 畢冠蘭 盧 靜

1.河南省信陽(yáng)市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，河南信陽(yáng) 464031；2.河南省信陽(yáng)市水產(chǎn)科學(xué)研究所，河南信陽(yáng) 464031

黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata），別名黃緣盒龜，俗稱(chēng)夾板龜、斷板龜、金頭龜、黃板龜?shù)龋饕植加谖覈?guó)的大別山山區(qū)、皖南山區(qū)、臺(tái)灣島及日本琉球群島等地，為珍稀瀕危動(dòng)物。由于生態(tài)環(huán)境的破壞和人類(lèi)的大量捕捉，其野生資源非常貧乏，因此開(kāi)展人工孵化是解決黃緣閉殼龜群體恢復(fù)和數(shù)量增加的有效措施。

1 材料與方法

1.1 人工孵化設(shè)備設(shè)施和準(zhǔn)備

孵化房間面積為28 m2，具有良好的保濕保溫效果，內(nèi)裝有空調(diào)、排氣扇、自動(dòng)檢測(cè)溫濕度的設(shè)備。孵化箱為規(guī)格50 cm×50 cm×40 cm的底部及箱壁有通氣孔的泡沫箱若干個(gè)，孵化基質(zhì)為直徑0.4～0.6 cm的膨化蛭石。房間內(nèi)另配有溫度計(jì)、濕度計(jì)、淋水器、水桶等生產(chǎn)工具。

在產(chǎn)卵期開(kāi)始前半個(gè)月，將孵化房間徹底清掃并采取全室噴灑二氧化氯的方式進(jìn)行殺菌消毒，孵化箱用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡后曝曬，將孵化基質(zhì)進(jìn)行曝曬消毒，最大限度營(yíng)造無(wú)菌環(huán)境。

1.2 人工孵化龜卵的來(lái)源

親龜來(lái)自2006年信陽(yáng)本地山區(qū)的野生個(gè)體，人工飼養(yǎng)至今。龜體質(zhì)健壯、體型飽滿(mǎn)、無(wú)病無(wú)傷、活潑好動(dòng)，全部達(dá)到性成熟。龜齡為20～30齡，產(chǎn)卵12年以上，其中雌龜68只，平均重量為925 g/只；雄龜26只，平均重量為650 g/只。雄龜與雌龜在每年4月下旬至7月中旬分開(kāi)飼養(yǎng)，待雌龜結(jié)束產(chǎn)卵后合并在一起飼養(yǎng)，雌雄親龜均自然交配，自然產(chǎn)卵。雌龜從2018年5月14日至7月19日所產(chǎn)龜卵為本次試驗(yàn)材料。

1.3 黃緣閉殼龜親龜?shù)娘曫B(yǎng)與管理

于2018年4月28日的晴天上午，將親龜從越冬池內(nèi)移到消過(guò)毒的飼養(yǎng)池內(nèi)，雌雄親龜分開(kāi)飼養(yǎng)。龜池均建在環(huán)境安靜、背風(fēng)向陽(yáng)的地方，池長(zhǎng)12 m，池寬5 m，池高0.6 m，池壁光滑，由水泥和磚塊建成，并附有防逃沿。池底平整，由泥土建成，呈緩坡?tīng)睿露?0°左右。池內(nèi)植有喬木和灌木，有常青落葉植被，占池內(nèi)總面積的2/3。龜池建有龜休息區(qū)、產(chǎn)卵場(chǎng)、飲水洗澡區(qū)、活動(dòng)區(qū)等不同的功能區(qū)，整個(gè)養(yǎng)殖區(qū)域模擬仿生態(tài)的自然環(huán)境建設(shè)。投喂嚴(yán)格按照“四定”的要求，用浙江產(chǎn)的“海昌”牌金龜料、鮮蝦、西紅柿、胡蘿卜、南瓜和珠?！翱狄孢_(dá)”牌龜鱉多蛋素等原料按照一定比例配比而成的餌料（1%～3%的日餌率），于每天15:00～17:00放入投飼盤(pán)內(nèi)投喂，1 h左右吃完為宜。每天對(duì)飲水洗澡區(qū)進(jìn)行清理，并及時(shí)注入新水，保證水質(zhì)符合漁業(yè)養(yǎng)殖用水標(biāo)準(zhǔn)。每天早、中、晚對(duì)龜池巡視，觀察龜?shù)臄z食、交配、產(chǎn)卵等活動(dòng)，保持良好的生態(tài)環(huán)境，防止敵害生物的入侵、龜?shù)奶右荩瑱z查龜體有無(wú)病傷，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疾病并準(zhǔn)確診斷對(duì)癥下藥，認(rèn)真做好生產(chǎn)日志記錄。親龜從2018年4月28日移出室外飼養(yǎng)至2018年11月15日進(jìn)入越冬房冬眠，全年室外生產(chǎn)管理共計(jì)185 d。

1.4 龜卵的收集及人工孵化

黃緣閉殼龜?shù)淖钸m產(chǎn)卵氣溫是25～33℃，信陽(yáng)地區(qū)為5月中旬至7月中旬，其中6月為產(chǎn)卵高峰期。在產(chǎn)卵開(kāi)始前，先將產(chǎn)卵場(chǎng)中25 cm厚的細(xì)沙徹底翻動(dòng)一遍，然后噴灑適量的水，使沙層的含水量保持在7%左右。黃緣閉殼龜通常在傍晚產(chǎn)卵，管理人員應(yīng)每天傍晚時(shí)觀察雌龜?shù)漠a(chǎn)卵情況，確定產(chǎn)卵位置。第2天清晨，在產(chǎn)卵場(chǎng)找到產(chǎn)卵窩后，輕輕扒開(kāi)卵窩上的沙土，將龜卵小心取出輕放在盛卵器中，放置龜卵時(shí)要避免龜卵的滾動(dòng)、撞擊、擠壓、陽(yáng)光直射等。采卵結(jié)束后，整理好產(chǎn)卵場(chǎng)，做好產(chǎn)卵記錄。黃緣閉殼龜親龜從5月14日產(chǎn)卵開(kāi)始至7月19日結(jié)束，共產(chǎn)卵89窩，收集龜卵232枚。

孵化前，在每個(gè)泡沫箱內(nèi)裝入4 kg蛭石，并按照每千克蛭石淋入0.7 kg純凈水的比例調(diào)配好。當(dāng)龜開(kāi)始產(chǎn)卵時(shí)，每天09:00左右將收集到的龜卵放入孵化箱后，在箱體上用記號(hào)筆標(biāo)注產(chǎn)卵日期、產(chǎn)卵池號(hào)、窩數(shù)、卵編號(hào)等。為了便于觀察龜卵的發(fā)育情況，2018年采用了半裸露孵化法進(jìn)行孵化。人工操作時(shí)，將受精卵的動(dòng)物極向上，沒(méi)有顯現(xiàn)受精的卵可隨意平放，輕輕覆上基質(zhì)，使龜卵面的中央部分約1/6裸露在空氣中，然后蓋上箱蓋。在整個(gè)孵化過(guò)程中，孵化箱不采取任何加溫加濕措施，使龜卵在房間中正常孵化直至破殼出苗。

在孵化過(guò)程中，不得隨意翻動(dòng)受精卵，否則會(huì)造成胚胎死亡。室內(nèi)空氣干燥時(shí)，及時(shí)向空氣中噴灑水霧，使室內(nèi)的濕度在孵化期內(nèi)始終保持在75%～95%。每天早、晚各巡視1次，檢查濕度、溫度、空氣流通性、受精卵發(fā)育、破殼出苗等情況，及時(shí)清除霉變、壞死及未受精的卵，防止蛇、鼠等敵害生物的危害，并做好孵化記錄。

1.5 稚龜?shù)氖占?/h3>

受精卵發(fā)育到第六胚胎期時(shí)，胎體各器官基本發(fā)育成形，對(duì)于外界刺激開(kāi)始有反應(yīng)，即將破殼時(shí)，稚龜用喙輕啄蛋殼，啄出小洞再逐漸擴(kuò)大，經(jīng)過(guò)1～2 d可破殼而出。破殼后，稚龜會(huì)迅速鉆入蛭石中。第2天取出稚龜，放入20 g/m3的高錳酸鉀溶液中浸泡10 min，隨后將清洗過(guò)的稚龜，按照50只/m2的密度放入消過(guò)毒的稚龜飼養(yǎng)箱中進(jìn)行飼養(yǎng)管理。對(duì)于少量卵黃囊吸收不徹底的稚龜，放入無(wú)菌器具中，1～3 d后卵黃囊可自行吸收干凈。

2 結(jié)果與分析

黃緣閉殼龜個(gè)體雌龜68只，雄龜26只，產(chǎn)卵期為2018年5月14日至2018年7月18日，孵化從2018年5月14日開(kāi)始到2018年9月28日結(jié)束。孵化期內(nèi)，孵化室內(nèi)空氣平均濕度為83.6%，空氣平均溫度為29.1℃，龜卵孵化的有效積溫為2 062～2 308（℃·d）。黃緣閉殼龜親龜產(chǎn)卵及受精孵化情況見(jiàn)表1。

表1 黃緣閉殼龜親龜產(chǎn)卵及受精孵化情況

3 討論

3.1 親龜產(chǎn)卵率分析

本次試驗(yàn)中，68只黃緣閉殼龜雌龜共產(chǎn)卵232枚，每只雌龜年平均產(chǎn)卵3.41枚，年產(chǎn)1～3次，每次1～4枚，說(shuō)明其自身的產(chǎn)卵量并不是很大，這除了與自身的遺傳產(chǎn)卵因子有決定性的關(guān)系外，還與親龜?shù)呐嘤闆r、生產(chǎn)管理等其他因子有關(guān)。因此，可以從以下幾個(gè)方面來(lái)提高黃緣閉殼龜?shù)漠a(chǎn)卵量：①養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)選在安靜、向陽(yáng)、避風(fēng)、有良好的水源地、交通便利、用電方便的地方，養(yǎng)殖區(qū)域模擬野外仿生態(tài)的生存環(huán)境；②在人工養(yǎng)殖中，可在飼料配比中加入促進(jìn)產(chǎn)卵和生長(zhǎng)的添加劑，投喂鮮活蚯蚓、青蝦、果蔬等，保證食物的多樣、營(yíng)養(yǎng)、均衡，滿(mǎn)足其生理需求，提高卵子的數(shù)量及質(zhì)量；③黃緣閉殼龜?shù)穆雅菰诼殉仓邪l(fā)育不是同步的，卵的大小差別大，卵分1～3次產(chǎn)出。當(dāng)冬眠結(jié)束后，可提升養(yǎng)殖環(huán)境的溫度，保證其進(jìn)食良好，快速恢復(fù)體質(zhì)，使龜達(dá)到產(chǎn)卵狀態(tài)，延長(zhǎng)產(chǎn)卵期，增加龜產(chǎn)卵頻次。

3.2 龜卵受精率分析

本次試驗(yàn)雌龜共產(chǎn)卵232枚，受精卵171枚，受精率為73.71%，受精率較低，有幾個(gè)方面的原因：一是黃緣閉殼龜自身的背部隆起較高，雄龜在交配時(shí)不易和雌龜充分接觸，身體常因失去平衡而從雌龜背上滑下，并且雄龜?shù)纳渚c雌龜?shù)呐怕巡煌?；二是雄龜與雌龜?shù)呐浔仁?∶2.6，雄龜數(shù)量過(guò)少；三是這批親龜人工飼養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，已達(dá)10年以上，由于環(huán)境、飼料等生態(tài)因子不盡合理，造成了雄龜精子活力的下降，從而影響了龜卵受精率。綜上，我們可采取以下措施來(lái)提高受精率：①合理搭配雄龜和雌龜?shù)呐浔?，調(diào)整雄雌比例為1∶1左右，提高交配率。同時(shí)，保證龜池內(nèi)個(gè)體的穩(wěn)定性，不要隨意引進(jìn)新龜。②加強(qiáng)雄龜?shù)呐嘤?。營(yíng)造良好的仿生態(tài)環(huán)境，合理投喂全價(jià)飼料，做好疾病的診治和預(yù)防，保證雄龜擁有健壯的體質(zhì)。③親龜交配后，將雌龜、雄龜分開(kāi)飼養(yǎng)，或?qū)⑿猿墒斓拇讫斉c上一年性成熟的未交配的雄龜進(jìn)行交配。

3.3 人工孵化率分析

本次試驗(yàn)受精卵共171枚，孵化出苗151只，孵化率為88.3%，仍有提高的空間。孵化過(guò)程中，出現(xiàn)了弱精蛋發(fā)育停止、炸裂蛋、提前破殼、不破殼和受精卵霉變等現(xiàn)象，對(duì)孵化率造成了一定的影響。發(fā)生這些現(xiàn)象有以下幾個(gè)原因：一是雄龜?shù)捏w質(zhì)不夠強(qiáng)壯，精子活力不強(qiáng)，致使卵子出現(xiàn)不受精或弱精現(xiàn)象；二是受精卵在室內(nèi)自然孵化，較易受外界溫度、濕度等因子變化的影響；三是工作人員的生產(chǎn)管理操作不夠規(guī)范，造成受精卵的受傷、滾動(dòng)、破損、細(xì)菌感染等情況的發(fā)生。因此，提高孵化率應(yīng)從以下幾個(gè)方面著手：①培育優(yōu)質(zhì)的親龜。通過(guò)提供適宜的仿生態(tài)環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)全面的飼料供給、精細(xì)化的管理來(lái)保證動(dòng)物生長(zhǎng)生存的福利需求，增強(qiáng)親龜體質(zhì)。②龜卵的孵化過(guò)程中，溫度和濕度是2個(gè)關(guān)鍵因素。室內(nèi)可安裝控溫加熱裝置和濕度控制裝置，根據(jù)龜卵胚胎發(fā)育期對(duì)溫度、濕度的不同要求，人為地加以精準(zhǔn)控制，使溫度穩(wěn)定在23～33℃，基質(zhì)的含水量在60%～80%之間，空氣的相對(duì)濕度在75%～95%之間，同時(shí)保持室內(nèi)相對(duì)通風(fēng)，這些措施有利于胚胎的正常發(fā)育。③做好孵化時(shí)的日常管理。每天早晚巡查1次，孵化過(guò)程中不要翻動(dòng)受精卵，保持適宜的溫度和濕度，及時(shí)清除霉變或壞死的卵，防止蛇、鼠、螞蟻等敵害生物的危害，并做好日常孵化記錄。