張保云

（甘肅省天水市動物疫病預(yù)防控制中心，741000）

豬肉是我國主要肉類食物，保障豬肉供應(yīng)與食品安全對于民生有著非常重要的意義。豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┦歉甙l(fā)病率、高死亡率的豬瘟病，傳染性較強(qiáng)，給豬養(yǎng)殖戶帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響豬肉市場的供應(yīng)與安全。豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┲饕憩F(xiàn)為高死亡率（仔豬）、呼吸道疾病（育成豬）、繁殖障礙（母豬）三大癥狀。豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┎∝i往往同時感染多種病菌，如偽狂犬病病毒、混合豬瘟等、豬流感病毒，容易出現(xiàn)繼發(fā)性感染。為此，本文將詳細(xì)分析豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┦褂秘i藍(lán)耳病弱毒疫苗治療的效果。

1 研究過程

1.1 研究資料

選擇** 某地區(qū)豬藍(lán)耳病（普通型）疑似病豬作為研究對象，取全血27份（1例3份，共計9頭）。根據(jù)孫永亮等人的方法設(shè)計異性引物，確定上游與下游引物序列、經(jīng)典毒株與PRRSV變異株預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物長度，各項(xiàng)數(shù)據(jù)分別為：5＇-TGGGC-GACAATGTCCC-3＇、5＇-TGGGC-GCTGAGTATTTTGGGCG-3＇、418bp、508bp。同時準(zhǔn)備RNA提取試劑盒、RT-PCR 試劑、瓊脂糖、低分子質(zhì)量蛋白質(zhì)Marker[1]。

1.2 研究方法

RNA 提取方法：采集疑似病豬全血后，迅速進(jìn)行全血分離，并按照試劑盒要求提取病毒總RNA。進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時，此次研究人員應(yīng)該按照相關(guān)使用說明書，生成反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，并將其低溫保存（-20℃）或直接應(yīng)用于PCR 反應(yīng)模板之中。

PCR 反應(yīng)方法：（1）準(zhǔn)備物質(zhì)：10μL 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、10μL 5*PCR Buffer、0.5μL 上游與下游引物、0.25μL（5U/μL）TaKaRa Ex Taq HS、50μL 滅菌雙蒸水（補(bǔ)充總體積）。（2）反應(yīng)條件：調(diào)解溫度至94℃變性（5min）—PCR 循環(huán)—94℃（1min）—57℃（1min）—72℃（1min）。（3）待其循環(huán)35 次后，調(diào)節(jié)溫度至72℃（10min）。（4）反應(yīng)結(jié)束后，將產(chǎn)物低溫保存（4℃）。

電泳檢測（PCR 產(chǎn)物）：（1）準(zhǔn)備物質(zhì)：瓊脂糖凝膠（1%）、PCR 產(chǎn)物。（2）進(jìn)行電泳檢測，將溴酚藍(lán)電泳至預(yù)期位置時對其進(jìn)行觀察，并使用凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行拍照[2]。

1.3 治療措施

疫苗：選擇合適的豬藍(lán)耳病弱毒疫苗，疫苗信息：JXA1-R 株，武漢中博生物公司生產(chǎn)，1 頭1次注射，10 頭1 份。

治療方法：為確診豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┎∝i注射疫苗，同時每天注射林可霉素，在豬的日常飲水中添加口服補(bǔ)液鹽，增強(qiáng)病豬免疫力，預(yù)防繼發(fā)性感染。

治療對比：為了更加準(zhǔn)確的觀察豬藍(lán)耳病弱毒疫苗效果，將9 頭病豬分為對照組4 頭與觀測組5 頭。觀測組采用以上方法進(jìn)行治療，對照組僅是每天注射林可霉素，在豬的日常飲水中添加口服補(bǔ)液鹽。兩組病豬均接受7d 治療效果跟蹤觀察[3]。

1.4 補(bǔ)充措施

處理病死豬：病死豬本身帶有大量的病毒與細(xì)菌，如果處理不當(dāng)將會污染豬舍、水源以及尸體掩埋地，因此必須無害化處理病死豬的尸體[4]。例如：將病死豬、死胎焚燒、深埋，做好相應(yīng)的監(jiān)控與管理工作，嚴(yán)禁病死豬尸體流竄，擴(kuò)大疫情。

消毒飼養(yǎng)地：對于疫情區(qū)域，應(yīng)該做好飼養(yǎng)地消毒工作。例如：隔離病豬，消毒豬舍；封鎖疫區(qū)，隔離疫情；清洗飼養(yǎng)用具，進(jìn)行帶體消毒。

強(qiáng)化飼養(yǎng)管理：優(yōu)化飼養(yǎng)環(huán)境，科學(xué)飼養(yǎng)。例如：加強(qiáng)通風(fēng)管理，控制飼養(yǎng)密度，做好降溫工作；為病豬提供高能量飼料，滿足病豬礦物質(zhì)、維生素需求。

其它合并病癥治療：多數(shù)豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┩瑫r合并多種病癥，因此應(yīng)該加強(qiáng)對其它病癥的診治，輔助其它治療方法，減少混合感染，降低病豬死亡率。

2 研究結(jié)果

2.1 PCR 反應(yīng)

經(jīng)過電泳檢測后，獲得兩項(xiàng)數(shù)據(jù)結(jié)果：（1）經(jīng)典毒株508BP；（2）對照變異毒株（陽性）418BP。兩項(xiàng)數(shù)據(jù)結(jié)果與豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┎∝i預(yù)期數(shù)據(jù)相一致。根據(jù)數(shù)據(jù)結(jié)果可以得知，檢測樣本病豬為豬藍(lán)耳病（普通型）。

2.2 治療效果

經(jīng)過10d 的治療后，觀測組的5 頭病豬病情穩(wěn)定，各項(xiàng)病癥基本好轉(zhuǎn)，無1 頭病豬死亡，僅1頭病豬仍未完全康復(fù)，有輕微病癥。相比之下，對照組4 頭病豬中已有3 頭死亡，余下1 頭病癥較為輕微，如表1。

表1 病豬死亡率

3 研究結(jié)論

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗配合每天注射林可霉素，在豬的日常飲水中添加口服補(bǔ)液鹽等綜合性治療方案效果十分明顯，病豬死亡率較低，治愈率高。由此可以推斷出，豬藍(lán)耳病弱毒疫苗在豬藍(lán)耳病（普通型）的治療中效果十分明顯。此次研究中受限于樣本數(shù)量限制，研究數(shù)據(jù)上精準(zhǔn)度有所欠缺，但研究結(jié)論與李東明、楊麗華、張桂生等人基本相符合，研究數(shù)據(jù)可信性高[5]。

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗優(yōu)勢明顯，對于豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┑闹委熜Ч@著。豬藍(lán)耳病弱毒疫苗被注射到病豬體內(nèi)后，可以對豬藍(lán)耳病毒起到干擾作用，使其體內(nèi)產(chǎn)生抗干擾素。豬藍(lán)耳病弱毒疫苗作用的發(fā)揮與劑量大小呈正相關(guān)，劑量越大產(chǎn)生的干擾素越快。因此在合理范圍之內(nèi)，可以通過加大劑量的方式使病豬體內(nèi)盡快產(chǎn)生干擾素，迅速釋放IFN，讓感染細(xì)胞衰化、死亡、崩解，并隨著病豬的全身血液系統(tǒng)漫延，與周圍細(xì)胞膜受體相結(jié)合，最后促使cAMP 生成，增加豬體內(nèi)健康細(xì)胞的抗病毒能力[6]。相關(guān)研究資料中認(rèn)為感染素與補(bǔ)體治療共同作用下產(chǎn)生的治療效果，但均承認(rèn)豬藍(lán)耳病弱毒疫苗在豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┲械闹委熜ЧＴ谪i藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┎∝i的治療中，為迅速遏制病豬病情的發(fā)展，讓其體內(nèi)生成病毒干擾素，應(yīng)該立即為病豬注射豬藍(lán)耳病弱毒疫苗，使其盡早發(fā)揮作用。

綜上所述，豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停﹤鞑ニ俣瓤欤∝i死亡率高，嚴(yán)重影響豬養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益。豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對于豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┑闹委熜Ч置黠@，可以顯著改善病豬病癥，分析豬藍(lán)耳病弱毒疫苗治療的應(yīng)用效果是十分必要的。但應(yīng)該注意，豬藍(lán)耳?。ㄆ胀ㄐ停┎∝i往往混合多種病癥，在治療過程中不能僅是單一依賴于疫苗對于豬藍(lán)耳病毒的抑制作用，更要結(jié)合病豬病癥，制定綜合治療方案，加強(qiáng)抗感染與營養(yǎng)補(bǔ)充治療，提高病豬的免疫能力，有助于病豬的康復(fù)。同時，要做好相應(yīng)的補(bǔ)充措施，加強(qiáng)豬舍管理與衛(wèi)生監(jiān)管，處理好病死豬，預(yù)防疫情的進(jìn)一步傳播。