李宏祥，馬巧利*，林雄，廖小娜，曾平章，陳金印, 2*

1(江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，江西省果蔬保鮮與無損檢測重點實驗室/江西省果蔬采后處理關(guān)鍵技術(shù)與質(zhì)量安全協(xié)同創(chuàng)新中心，江西 南昌，330045)2(萍鄉(xiāng)學(xué)院，江西 萍鄉(xiāng)，337055) 3(吉安市果業(yè)局，江西 吉安，343009)

采收成熟度或采收期影響園藝產(chǎn)品食用器官的著色、硬度、糖酸風(fēng)味、抗氧化力等內(nèi)外品質(zhì)和耐貯性。柑橘是世界第一大宗水果，也是我國重要的南方水果，包括柑、桔、橙、柚、檸檬等多種類型。采收時間是影響柑橘果實貯藏品質(zhì)的重要因子[1-3]。柚子提前采收時果皮色澤和風(fēng)味品質(zhì)均未達到最佳，而適期采收的果實長期貯藏后腐爛率較低，且保持較好的外觀和酸甜度[4]。有學(xué)者連續(xù)3年檢測每年11月、2月和3月采收的檸檬果實中總酚、4種黃酮、抗壞血酸(ascorbic acid, AA)、脫氫抗壞血酸(dehydroascorbic acid, DHAA)、總VC含量以及抗氧化力等指標，發(fā)現(xiàn)采收期對品質(zhì)的影響大于遺傳背景[5]。完熟栽培的葡萄柚，采收時間對果實的出汁率、可溶性固形物(total soluble solid, TSS)、可滴定酸(titratable acid, TA)和TSS:TA均產(chǎn)生影響，隨著采收期的推遲，果實的腐爛率明顯下降，貯藏后期果實出汁率發(fā)生改變[6-7]。在其他水果和蔬菜上也有較多類似報道，如蘋果[8]、梨[9]、甘藍[10]和黃秋葵[11]等。

園藝產(chǎn)品采收以后，由于營養(yǎng)物質(zhì)不斷消耗，導(dǎo)致品質(zhì)下降并逐漸衰老。細胞內(nèi)的氧化逆境是造成膜脂過氧化的重要因素，最終導(dǎo)致細胞衰老凋亡?？寡趸镔|(zhì)含量及抗氧化酶活性增加可以減緩采后衰老，研究表明采收成熟度與園藝產(chǎn)品抗氧化物和酶活性密切相關(guān)。陳學(xué)紅等綜合評價了不同采收期綠蘆筍的9個品質(zhì)指標，其中總酚、總黃酮、木質(zhì)素、微量元素和色差指標H0對貯藏品質(zhì)貢獻率最高，且5月份采收的的綠蘆筍綜合品質(zhì)最好[12]。此外，研究發(fā)現(xiàn)不同采收成熟度的刺梨果實多酚氧化酶、過氧化物酶和MDA含量有明顯差異，導(dǎo)致其衰老進程不同[13]。

柚(Citrusmaxima(Burm.) Merr)，柑橘屬，大多數(shù)品種較耐貯藏，常溫條件下可以貯藏5～6個月。江西是我國柑橘主產(chǎn)區(qū)，已成功選育出一批適應(yīng)當?shù)貧夂虻膬?yōu)良柚品種，如井岡蜜柚系列品種：桃溪蜜柚、金沙柚和金蘭柚等。桃溪蜜柚屬于沙田柚系，為實生早熟品種，成熟期為每年9月下旬左右。但生產(chǎn)上對其適宜采收成熟度及其采后貯藏特性認識不夠，常常出現(xiàn)早采情況，嚴重影響了果實品質(zhì)及商品價值。本研究以花后178 d(采收期Ⅰ)、花后192 d(采收期Ⅱ)和花后208 d(采收期Ⅲ)的桃溪蜜柚為對象，連續(xù)檢測了常溫貯藏180 d內(nèi)的果實品質(zhì)和抗氧化性相關(guān)指標，為選擇適宜桃溪蜜柚長期貯藏的采收期，為適時采收減少損耗和及時上市提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗樣品處理

桃溪蜜柚果實于盛花后178 d(采收期Ⅰ)、盛花后192 d(采收期Ⅱ)、盛花后208 d(采收期Ⅲ)采收，并于當天運回實驗室，3個采收期的果實均采自江西省吉安市天豐果園，N 27°0′43.58″，E 115°08′27.74″。果實充分散盡田間熱后，用清水清洗干凈、晾干，并用保鮮袋單果包裝，室溫貯藏180 d。

實驗樣品每30 d取樣1次，連續(xù)取樣至180 d。每次選取15個大小均勻、無瑕疵的果實，平均分為3組，分別平行測定果實色差后，取果皮、果肉，用液氮速凍。樣品置于-80 ℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器與設(shè)備

MINOLTA CR-400 D65光源色差儀，日本柯尼卡美能達公司；RA250-WE手持數(shù)字糖度計，日本Kyoto Electronics公司；UV-2600紫外分光光度計，日本島津公司；Ball Mills MM 400研磨機，德國萊馳公司；UNIVERSAL 320R高速冷凍離心機，德國赫提馳科學(xué)儀器公司；DK-S28電熱恒溫水浴鍋，上海精宏實驗設(shè)備有限公司；JM-B6002電子天平，余姚市紀銘稱重校驗設(shè)備有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 果皮著色指數(shù)測定

取12個果實，每4個果實為1組，洗凈擦干后，用色差儀，分別在果實表皮赤道部位對角4個方向測定果皮的L*、a*、b*和Ho值，取平均值[3]。

1.3.2 失重率測定

采用單果稱重法檢測果實失重率。固定選取100個果實，每33個左右為1組，按順序進行編號，共重復(fù)3次，定期剔除腐爛果實后,檢測果實質(zhì)量。計算如公式(1)所示：

(1)

1.3.3 腐爛率測定

采用目測法檢測果實腐爛率。固定選取100個果實，按33個左右分1組，共重復(fù)3次，當果實表面出現(xiàn)肉眼可見的病斑(直徑約1 mm)時，即視為腐爛。定期統(tǒng)計腐爛個數(shù)，計算腐爛率如公式(2)所示。

(2)

1.3.4 TSS、TA含量檢測

取9個果實，3個為1組，果肉榨汁混勻。用手持折光儀檢測果汁中TSS含量。用果實酸度計檢測果汁中TA含量。每組樣品重復(fù)測定3次，取平均值，計算如公式(3)所示。

(3)

1.3.5 總糖含量測定

采用蒽酮比色法[14]，結(jié)果以%表示。

1.3.6 抗壞血酸(VC)含量測定

采用2, 6-二氯酚靛酚法測定[15]，結(jié)果以mg/100g表示。

1.3.7 果肉出汁率測定

取6個果實，每2個為1組。每個果實取100 g新鮮汁胞榨汁、過濾后稱重，計算出汁率。

1.3.8 果實可食率測定

取6個果實，每2個為1組，分別稱單果胞質(zhì)量和單果汁胞質(zhì)量和種子質(zhì)量，計算可食率。

1.3.9 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)酶活性檢測

采用氮藍四唑(nitro-blue tetrazolium, NBT)光化還原法測定[15],結(jié)果用U/g表示。

1.3.10 多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)酶活性檢測

采用鄰苯二酚法測定[16],結(jié)果用U/g表示。

1.3.11 丙二醛(malonic dialdehyde, MDA)含量測定

用硫代巴比妥酸法測定[15]，結(jié)果用mmol/g表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)用Excel進行統(tǒng)計處理，用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行顯著性分析；采用Graphpad prism 5.0作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同采收期對桃溪蜜柚常溫貯藏時外觀品質(zhì)的影響

2.1.1 不同采收期的桃溪蜜柚常溫貯藏時著色差異

不同時期采收的果實，由于其成熟度不同，著色情況有明顯差別。如圖1所示，在貯藏過程中3個采收期的果實均由黃綠色向淺黃色、黃色轉(zhuǎn)化。不同之處在于,采收之初(0 d)，采收期Ⅰ和Ⅱ果實未完全轉(zhuǎn)色，著色偏綠；采收期Ⅲ成熟度較高，果實已經(jīng)轉(zhuǎn)為淺黃色。

圖1 不同采收期桃溪蜜柚常溫貯藏期間果皮著色情況Fig.1 Peel color of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored under room temperature condition

采收期Ⅰ在貯藏第60天依舊保持較高的黃綠色；而采收期Ⅱ在第60天時已轉(zhuǎn)為黃色，并在隨后的貯藏中保持高的色飽和度；采收期Ⅲ在60～120 d色澤變化不明顯，基本保持為淺黃色，且較前2個采收期的果實著色整體偏淡。

為了進一步明確采收期對桃溪蜜柚果實貯藏期間著色的影響，本研究又利用色差分析儀檢測了采后180 d內(nèi)果皮色差相關(guān)指標。柑橘類果實表皮色差一般用L*、C*、Ho和CCI來表示。L*值表示果皮光澤度，如表1所示，3個采收期的桃溪蜜柚果皮光澤度在貯藏過程中均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，并在采后60～120 d達到峰值。采收期Ⅰ果實光澤度變化最大，其L*值從(62.71±0.86)上升到(74.35±0.92)(90 d)，差異達到11.64；其次為采收期Ⅲ，L*值在(71.49±1.70)到(76.47±0.13)，變化幅度為4.98，在60 d達到最高值；采收期Ⅱ的L*值較穩(wěn)定，維持在(70.13±0.20)到(72.50±0.99)(120 d)，變化幅度最小為2.37。此外，隨著采收時間推遲，果皮L*值增加，在整個貯藏期間采收期Ⅲ的L*值均顯著高于采收期Ⅱ和Ⅰ，說明在花后178～208 d內(nèi)采收越晚，果皮表面越光亮。

a*值為負數(shù)時表示綠色，3個采收期的a*值均由負轉(zhuǎn)為正，說明在貯藏過程中果實逐漸褪綠。采收期Ⅱ褪綠最早(60 d)；其次是采收期Ⅰ(120 d)；采收期Ⅲ褪綠最慢，直至貯藏后期才完全褪去綠色(180 d)。b*值為正值表示黃色，值越大黃色越深。貯藏過程中b*值先上升后下降，采收期Ⅰ和Ⅱ的b*值均在120 d時達到最大值，分別為(67.06±2.94)和(66.19±2.15)，且顯著高于采收期Ⅲ的最大值(60.64±2.10)(180 d)，說明采收期Ⅰ和Ⅱ的著色較采收期Ⅲ更黃。C*表示色飽和度，C*變化與b*值一致。在0～150 d采收期Ⅲ的C*值顯著小于其他2個采收期，說明采收期Ⅲ著色稍差。Ho表示色調(diào)角，3個采收期Ho值在貯藏過程中均呈逐漸下降趨勢，整體維持在(110.55±1.09)～(86.12±0.19)，即果皮色澤從黃綠色轉(zhuǎn)為黃色，而采收期Ⅲ的Ho值基本保持在90°左右，貯藏過程中顏色變化不大。Ho和CCI數(shù)據(jù)均表明在60～150 d，采收期Ⅱ的著色優(yōu)于采收期Ⅰ和采收期Ⅲ。

表1 不同采收期桃溪蜜柚果實常溫貯藏期間色差指數(shù)Table 1 Citrus color index of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored under room temperature condition

注：不同小寫字母間表示顯著差異P<0.05。下同。

總之，采收期Ⅱ轉(zhuǎn)色最快，著黃色度最高。而采收期Ⅲ在貯藏過程中可保持果實較高的L*值，較低的a*值、b*值，較穩(wěn)定的Ho值，即果實維持較高的亮度，長期保持黃綠色。

2.1.2 不同采收期對桃溪蜜柚常溫貯藏時失重率和腐爛率的影響

桃溪蜜柚常溫條件下貯藏180 d，果實失重率和腐爛率變化如圖2所示。隨著貯藏時間的延長,果實失重率(圖2-A)和腐爛率(圖2-B)均逐漸上升。在30～150 d，采收期Ⅲ的果實失重率顯著低于采收期Ⅰ和Ⅱ，后兩者之間無顯著差異(圖2-A)，說明采收成熟度影響果實失重率，過早采收會加重失水失鮮。在整個貯藏過程中采收期Ⅱ的果實腐爛率最高；在30～150 d，采收期Ⅰ和Ⅱ的果實腐爛率無顯著差異。在貯藏結(jié)束時采收期Ⅰ腐爛率最低(1%)，其次是采收期Ⅲ(4%)，采收期Ⅱ最高(6%)，表明采收期Ⅲ和采收期Ⅰ的果實較采收期Ⅱ更耐貯藏。

A-失重率；B-腐爛率圖2 不同采收期桃溪蜜柚常溫貯藏期間果實失重率和腐爛率Fig.2 The weight loss rate and decay rate of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored under room temperature condition

2.2 不同采收期對桃溪蜜柚內(nèi)在品質(zhì)的影響

2.2.1 不同采收期的桃溪蜜柚常溫貯藏時糖酸含量的變化

糖酸是果實內(nèi)在品質(zhì)的重要組分，糖酸比是評價柑橘果實風(fēng)味品質(zhì)的重要指標。如圖3-A所示，采收期Ⅲ在貯藏期間果實總糖含量先上升后下降，在90 d時達到最大值8.52%；在30～150 d內(nèi)采收期Ⅲ的總糖含量顯著高于采收期Ⅰ和Ⅱ，貯藏150 d后總糖含量顯著下降；采收期Ⅰ和Ⅱ在120 d內(nèi)果實總糖含量相對較穩(wěn)定。3個采收期的桃溪蜜柚TSS含量均呈先上升后下降的趨勢(圖3-B)。除150 d外，整個貯藏過程中采收期Ⅱ和Ⅲ的TSS含量顯著高于采收期Ⅰ，前兩者分別在90 d、120 d達到最大值12.50% 左右；采收期Ⅰ的TSS含量于150 d達到最大值。

A-總糖含量; B-TSS含量; C-TA含量; D-固酸比圖3 不同采收期桃溪蜜柚常溫貯藏期間汁胞總糖含量、TSS、TA含量和固酸比Fig.3 Total sugar contents, TSS, TA and solid-acid ratio of juicy sac of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored at room temperature

3個采收期TA含量與TSS含量變化趨勢一致(圖3-C)。在貯藏90 d內(nèi)采收期Ⅱ的TA含量較高，并在第60天達到最大值0.84%；在貯藏120～150 d采收期Ⅰ的TA含量顯著高于其他2個時期，除30 d外(0.70%)，采收期Ⅲ的TA含量顯著低于其他2個采收期。3個采收期固酸比呈‘V’形變化(圖3-D)。采收期Ⅲ的固酸比在貯藏中期顯著高于采收期Ⅰ、采收期Ⅱ；且貯藏90 d后采收期Ⅱ顯著高于采收期Ⅰ。

2.2.2 不同采收期的桃溪蜜柚常溫貯藏時汁胞抗壞血酸(VC)含量的變化

與TSS和TA變化類似，采收期Ⅱ和Ⅲ的果實VC含量呈先上升后下降的趨勢，并在60 d達到最大值，約為59.7 mg/100g FW；而采收期Ⅰ的果實VC含量隨貯藏時間的延長呈下降趨勢(如圖4)。

在0～30 d采收期Ⅱ和Ⅲ的果實VC含量顯著低于采收期Ⅰ；隨后含量逐漸上升并顯著高于采收期Ⅰ。

總體而言， 3個采收期在貯藏150 d內(nèi)均可維持較高的總糖、TSS和TA含量，隨后內(nèi)在品質(zhì)迅速劣變；總糖、TSS、TA和VC的變化趨勢說明桃溪蜜柚在貯藏過程中存在明顯的后熟現(xiàn)象；采收期Ⅲ的果實TSS和VC含量較高，TA含量較低，擁有較高的固酸比和良好的風(fēng)味品質(zhì)。

圖4 不同采收期桃溪蜜柚常溫貯藏期間抗壞血酸(VC)含量Fig.4 VC content in juicy sac of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored at room temperature

2.2.3 不同采收期的桃溪蜜柚常溫貯藏時出汁率和可食率的變化

桃溪蜜柚在貯藏期間果實出汁率和可食率變化情況見表2。在0～60 d 3個采收期的出汁率無顯著差異；在90～180 d采收期Ⅲ出汁率顯著高于其他2個采收期；采收期Ⅰ和Ⅱ的出汁率均無差異。整個貯藏期間3個采收期平均果實出汁率為采收期Ⅲ(54.10%)>采收期Ⅰ(51.06%)>采收期Ⅱ(46.15%)。3個采收期果實可食率在34%～42%之間，整體上在每個貯藏期內(nèi)三者的可食率無顯著差異，說明采收期與果實可食率之間無明顯相關(guān)關(guān)系。

表2 不同采收期桃溪蜜柚果實常溫貯藏期間出汁率和可食率的變化Table 2 Citrus juice yield and edible rate of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored under room temperature condition

2.3 不同采收期對桃溪蜜柚貯藏期抗性品質(zhì)的影響

膜脂過氧化是導(dǎo)致柑橘果實采后衰老的重要原因，抗氧化酶活性的提高有助于細胞抵抗氧化逆境從而延緩衰老，本研究檢測了3個采收期桃溪蜜柚常溫貯藏時汁胞丙二醛(MDA)含量、SOD和PPO的酶活性差異，結(jié)果如圖5所示。

隨著貯藏時間的延長，3個采收期果實汁胞中生成的MDA均逐漸增多(圖5-A)。從總體趨勢上看除150 d外，采收期Ⅲ和Ⅰ生成的MDA含量低于采收期Ⅱ；在0 d和120 d時，采收期Ⅲ汁胞MDA含量低于采收期Ⅰ；在90 d和180 d時，采收期Ⅲ汁胞MDA含量高于采收期Ⅰ。汁胞中SOD活性隨著貯藏時間的延長明顯增強(圖5-B)。在0～120 d采收期Ⅲ汁胞的SOD活性顯著高于采收期Ⅰ和Ⅱ；在30～60 d采收期Ⅰ的SOD活性顯著高于采收期Ⅱ，在其他貯藏期二者無明顯差異。相對其他2個時期，采收期Ⅲ的PPO活性在貯藏期間整體保持較高水平；采收期Ⅱ在30～120 d內(nèi)PPO活性顯著低于其他2個時期；貯藏150 d后三者無差異(圖5-C)?？傊?，采收期Ⅲ汁胞生成的MDA含量較低，同時SOD和POD活性相對較高，說明采收期Ⅲ汁胞的膜系統(tǒng)完整性更好，細胞的抗氧化能力強，較其他2個采收時期衰老更慢。

A-MDA; B-SOD活性; C-PPO活性圖5 不同采收期桃溪蜜柚常溫貯藏期間MDA含量、SOD和PPO酶活性Fig.5 MDA contents, SOD and PPO enzyme activity in juicy sac of Taoxi pomelo with different harvest maturity stored at room temperature

3 討論與結(jié)論

采收成熟度對采后果實品質(zhì)和耐貯性有重要影響。過早采收品質(zhì)尚未形成，而過晚采收品質(zhì)在貯藏過程中下降較快，這對生產(chǎn)指導(dǎo)尤為重要。在貯藏過程中果實水分損失不斷上升，張文英[17]認為，早采的果實表皮結(jié)構(gòu)發(fā)育不完全，蠟質(zhì)層薄，果面積較大，有較多的開放氣孔，蒸騰作用強,可能導(dǎo)致果實失水嚴重。王俊寧[18]研究發(fā)現(xiàn)，火龍果過早采收，果實呼吸代謝旺盛，消耗大，導(dǎo)致大量失水。本研究發(fā)現(xiàn)，在30～150 d，桃溪蜜柚采收期Ⅰ和Ⅱ失重率顯著高于采收期Ⅲ；在第150 天，采收期Ⅰ和Ⅱ失重率分別較采收期Ⅲ高了0.78%、0.94%，可能是早采收的果實果皮結(jié)構(gòu)發(fā)育不完善或皮孔組織之間結(jié)構(gòu)不緊密的原因。桃溪蜜柚在第0天時，果皮L*值采收期Ⅲ>采收期Ⅱ、采收期Ⅰ，三者差異顯著，說明采收期Ⅲ果實亮度最大。在整個貯藏期，采收期Ⅲ果皮L*值顯著高于采收期Ⅰ和Ⅱ，說明越晚采收果實亮度保持越好。王志華在酥梨不同成熟度采收常溫貯藏研究中發(fā)現(xiàn)[19]，采收越晚果面亮度越高；對紅香酥梨冷藏研究發(fā)現(xiàn)[20]，不論是剛采收還是貯藏150 d和210 d均表現(xiàn)果實采收越晚，L*值越高，與本試驗結(jié)果一致。果實在貯藏中有一個后熟過程，在這期間，總糖、TSS、TA和VC含量不斷積累達到最佳的品質(zhì)狀態(tài)[21-22]。吳寶玉[23]、刁俊明[24]對甌柑與沙田柚的研究發(fā)現(xiàn)，晚采收的果實在貯藏中積累更多的總糖、TSS含量。采收期Ⅲ在后熟/衰老過程中維持較高的總糖，并于第90天達到最大值，TSS含量也維持較高，說明晚采收有利于桃溪蜜柚積累更多總糖、TSS含量。前人研究發(fā)現(xiàn)黃金蜜柚、琯溪蜜柚在貯藏期間TA含量呈先上升后下降的趨勢[25-26]，3個采收期桃溪蜜柚果實TA含量有相同的變化趨勢，越晚采收，TA含量越低，且在貯藏中積累的時間越短，分別在貯藏第30天(Ⅲ)、60天 (Ⅱ)、90天 (Ⅰ)完成積累。采收期Ⅰ在貯藏0～30 d時，VC含量顯著高于采收期Ⅱ和Ⅲ，隨后迅速下降；采收期Ⅱ和Ⅲ VC含量呈先上升后下降的趨勢，說明成熟度高的果實有利于保持較高的VC含量。賈曉輝[9]、郜海燕[27]認為梨、桃這種成熟度高的果實在冷藏期間可維持較高的VC含量，與本試驗結(jié)果相似。

果實采收達到后熟后便開始漸漸衰老，表現(xiàn)出MDA含量的增加、SOD、POD和PPO活性的下降引起活性氧積累，導(dǎo)致膜被氧化而遭受毒害[28]。桃溪蜜柚在貯藏過程中活性氧逐漸積累，同時抗氧化酶如SOD、PPO活性顯著增強，在貯藏時間0～120 d，采收期Ⅲ SOD活性顯著高于采收期Ⅰ和Ⅱ，在30～120 d采收期Ⅰ和Ⅲ PPO活性顯著高于采收期Ⅱ，說明采收期Ⅰ和Ⅲ阻止了果實早衰老。隨著貯藏時間的延長桃溪蜜柚汁胞中MDA含量積累就越多，采收期Ⅰ和Ⅲ在貯藏期生成的MDA含量顯著低于采收期Ⅱ，說明采收期Ⅰ和Ⅲ在貯藏過程中具有更好的抗氧化性，更好地保護膜結(jié)構(gòu)的完整性。段宇[29]研究發(fā)現(xiàn)北村、美登藍莓越靠近采收末端，抗氧化物質(zhì)含量和抗氧化活性越高，與本試驗中采收期Ⅲ的抗氧化活性結(jié)論相似。

綜上所述，采收期Ⅲ在貯藏過程中保持著較低的失重率和腐爛率，較高的總糖含量、TSS、固酸比、VC含量及抗氧化性，建議采用花后208 d(采收期Ⅲ)作為桃溪蜜柚采收上市的最佳時間，綜合貯藏期間內(nèi)外品質(zhì)變化趨勢，建議在貯存120 d內(nèi)完成上市，最晚不要超過150 d。