李雙標(biāo) 李勝水 田甜

【摘 要】：對S100A9和S100P在膽管癌中表達(dá)和意義進(jìn)行分析和討論。方法：對我院的膽管癌患者進(jìn)行研究，對患者體內(nèi)的S100A9和S100P的表達(dá)進(jìn)行檢測，主要檢測方法是免疫組化SP法，并對S100A9與膽管癌的臨床表現(xiàn)和預(yù)后情況，和S100P的表達(dá)與膽管癌的臨床表現(xiàn)和預(yù)后情況進(jìn)行分析。結(jié)果：S100A9在膽管癌中的表達(dá)率為74.24%（49/66），S100P在膽管癌中的表達(dá)率為80.30（53/66），且癌旁組織內(nèi)的兩者表達(dá)較少。另外研究發(fā)現(xiàn)S100A9和S100P和膽管癌的組織分化程度、膽管癌臨床分期以及膽管癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無明顯意義。結(jié)論：S100A9和S100P對膽管癌的診斷具有重要幫助。

【關(guān)鍵詞】：S100A9;S100P;膽管

【中圖分類號】R735.8【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-3783（2019）07-03--01

膽管癌是一種嚴(yán)重影響人們生命健康的惡性腫瘤，其主要起源于膽管上皮，現(xiàn)今，膽管癌的發(fā)病率已經(jīng)占據(jù)了肝臟腫瘤的15%，如果不對膽管癌加以治療，會對人們的生命造成嚴(yán)重的威脅。手術(shù)切除是膽管癌臨床治療中最有效的方法，但是可能由于膽管癌患者術(shù)前就已經(jīng)發(fā)生了轉(zhuǎn)移，不能對膽管癌患者行膽管癌根治術(shù)。另外由于患者的身體情況不同，手術(shù)效果也不太相同，很可能出現(xiàn)膽管癌的復(fù)發(fā)，不能對病人的生命進(jìn)行延長，不利于患者的預(yù)后。研究表明，膽管癌患者的生存率與膽管癌患者的分期有著密切的聯(lián)系，如果在患者早期進(jìn)行治療，對膽管癌患者的治療效果具有重要作用。但是目前臨床上還沒有明確的可以對膽管癌早期進(jìn)行確診的診斷方法。近些年，通過對S100A9和S100P的研究發(fā)現(xiàn)，許多惡性腫瘤中都有S100A9和S100P中存在，但是在膽管癌中的表達(dá)還沒有很多人研究，本文就對S100A9和S100P在膽管癌中的表達(dá)進(jìn)行了研究，希望能對膽管癌的診斷和治療有所幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在本院2013年9月到2018年9月進(jìn)行膽管癌根治術(shù)的病人進(jìn)行研究，本院共有66名病人進(jìn)行了膽管癌根治術(shù)，且66名病人均確診為膽管癌。在66名膽管癌病人中，有男性35人，女性31人。66名膽管癌患者均無其他惡性腫瘤，且患者都沒有進(jìn)行系統(tǒng)性的治療。對66名膽管癌術(shù)后病人進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查時(shí)間為3～70月，中位隨訪時(shí)間為27個(gè)月。在調(diào)查過程中對66名患者的基本情況、臨床信息以及患者術(shù)后的效果進(jìn)行記錄。

1.2 免疫組化染色

在患者體內(nèi)取材，對材料進(jìn)行處理。首先將材料在4%多聚甲醛內(nèi)放置，放置時(shí)間為兩天或三天，之后用自來水進(jìn)行浸泡，一般浸泡一天，之后對材料進(jìn)行兩次梯度脫水，再對材料進(jìn)行透明處理，透明需要的試劑為二甲苯，應(yīng)透明兩次，最對透明后的材料進(jìn)行浸蠟和包埋，最后進(jìn)行切片，切片的厚度要保持在5um。

在對切片進(jìn)行烤片后，對切片進(jìn)行脫蠟處理，脫蠟需要的試劑為二甲苯，并對脫蠟后的切片進(jìn)行水化。再對切片進(jìn)行抗原修護(hù)，主要試劑為枸櫞酸緩沖劑，在修護(hù)后先不進(jìn)行處理，使其自然涼，涼至室溫。切片修護(hù)后進(jìn)行封存，材料為山羊血清，并進(jìn)行一抗孵育，在4攝氏度的溫度下進(jìn)行過夜。之后進(jìn)行復(fù)溫，并添加二抗孵育和三抗孵育。對孵育后的切片進(jìn)行顯色，主要利用DAB進(jìn)行，并觀察其結(jié)果。在適宜時(shí)間終止顯色，對切片進(jìn)行復(fù)染處理，并使用自來水對復(fù)染的切片進(jìn)行沖洗，之后對切片進(jìn)行分化，主要試劑為1%的鹽酸酒精溶液，之后對分化的切片進(jìn)行沖洗。最后對切片脫水，封片。

1.3 結(jié)果判斷

在顯微鏡下對切片進(jìn)行觀察，選擇5個(gè)視野，計(jì)數(shù)一百到二百個(gè)癌細(xì)胞，胞漿以及胞核出現(xiàn)黃染，則為陽性，觀察黃染情況，并對黃染細(xì)胞進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。對黃染的陽性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)分，計(jì)數(shù)越多，分?jǐn)?shù)越高，以5%、25%、50%、75%為分割線，其分?jǐn)?shù)分別為0，1，2，3，4。并對染色強(qiáng)度進(jìn)行分類，顏色越深則分?jǐn)?shù)增高，主要以淡黃色、黃色、褐色進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。將陽性細(xì)胞的分?jǐn)?shù)與染色強(qiáng)度的分?jǐn)?shù)相乘，以1分為分界線，一分以上為陽性細(xì)胞。

2 結(jié)果

2.1 S100A9和S100P膽管內(nèi)癌組織的表達(dá)如下圖：

如上圖所示，S100A9和S100P在膽管癌中也存在著高表達(dá)的現(xiàn)象，并且在癌旁組織中也未測到S100P，且S100P的表達(dá)和膽管癌的分化程度以及膽管癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度、腫瘤分期都沒有關(guān)系，P值均小于0.05。

對肝內(nèi)膽管癌患者中的S100A9和S100P的表達(dá)進(jìn)行檢測，主要利用Kaplan-Merier模型分析，分析證明S100A9和S100P的陽性表達(dá)與膽管癌患者的死亡概率有著密切的聯(lián)系，但是在膽管癌中的S100A9和S100P中的表達(dá)和患者的死亡率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

本研究對膽管癌患者體內(nèi)的S100A9和S100P的表達(dá)進(jìn)行了研究，主要檢測方法為免疫組化法，通過研究發(fā)現(xiàn)，S100A9和S100P都在膽管癌患者體內(nèi)具有高表達(dá)，但是在膽管癌旁組織內(nèi)的表達(dá)都不高。但是通過研究發(fā)現(xiàn)，S100A9和S100P和膽管癌的分化程度沒有密切聯(lián)系，與膽管癌患者的淋巴轉(zhuǎn)移程度也沒有聯(lián)系，同時(shí)，S100A9和S100P與患者的腫瘤分期沒有聯(lián)系。但是通過病理活檢發(fā)現(xiàn)在膽管癌中存在著S100P和S100A9的高表達(dá)，且在對膽管癌進(jìn)行診斷時(shí)，S100P的特異性更強(qiáng)，因此可以將S100P作為膽管癌的診斷幫助。

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