張 芹，宋 威，張開(kāi)松，屈長(zhǎng)義，馮建新

(1.河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院，鄭州450044；2.河南工業(yè)大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，鄭州450001)

1 引言

中國(guó)大鯢(Andrias davidianus)是我國(guó)特有的珍稀兩棲動(dòng)物，素有動(dòng)物演變“活化石”之稱(chēng)，具有較高的科研價(jià)值、遺傳育種價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。中國(guó)大鯢隸屬隱鰓鯢科，全科有3種大鯢，分別是美國(guó)東部的隱鰓鯢、日本岐阜的日本大鯢和中國(guó)大鯢[1]。血液是動(dòng)物體內(nèi)循環(huán)的重要組成部分，能反映物種的特性、生理狀態(tài)和其對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)情況。有關(guān)中國(guó)大鯢[2]、新疆北鯢[3]、北方山溪鯢[4]的血液學(xué)研究已有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)人工飼養(yǎng)大鯢投喂不同的餌料，分析大鯢生長(zhǎng)情況及血液學(xué)指標(biāo)的變化，對(duì)人工養(yǎng)殖大鯢做進(jìn)一步的了解，探索出適合大鯢生長(zhǎng)的養(yǎng)殖模式，對(duì)更好地研究和開(kāi)發(fā)中國(guó)特有的這一優(yōu)良種質(zhì)資源有著重要意義。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

選擇人工養(yǎng)殖的健康大鯢16尾，分成四組，測(cè)量體長(zhǎng)、體重，分別打PIT芯片[5]作為唯一辨識(shí)標(biāo)志，養(yǎng)殖在地下室避光陰涼處。養(yǎng)殖用水為河水，通過(guò)管道供水，為保持水質(zhì)清新，每五分鐘自動(dòng)進(jìn)排水一次，水溫常年保持在13-25℃之間。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

結(jié)合養(yǎng)殖戶的經(jīng)驗(yàn)，從文獻(xiàn)[6-7]中選擇幾種大鯢愛(ài)吃的餌料魚(yú)，設(shè)置三個(gè)試驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組，對(duì)照組正常投喂野雜魚(yú)，實(shí)驗(yàn)組按照分組情況投喂特定餌料魚(yú)，餌料魚(yú)均為新鮮的活魚(yú)直接投喂。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)158天，結(jié)束后所有的大鯢統(tǒng)一測(cè)量體長(zhǎng)、體重。一次性無(wú)菌注射器尾靜脈采血，注入添加抗凝劑的采血管中。血樣保存于冰盒中，送實(shí)驗(yàn)室用美國(guó)全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行血清生化分析，測(cè)定白細(xì)胞數(shù)（WBC）、血紅蛋白（Hct）、血小板總數(shù)（Plt）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、總膽紅素（TBIL-K）、直接膽紅素（DBIL）、間接膽紅素（IBIL）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、胱抑素C（Cysc）等血液學(xué)生理生化指標(biāo)。

用SPSS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 體重指標(biāo)變化

實(shí)驗(yàn)魚(yú)均為5齡魚(yú)，實(shí)驗(yàn)前平均體重4370.9 g（3440 g-5400 g），為了避免陌生大鯢之間的爭(zhēng)斗，以原始的池塘分布為依據(jù)。

表1 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鯢體重變化情況Tab 1 Comparison of body weight with different for age fish

通過(guò)表1可以看出，實(shí)驗(yàn)組體重的增加高于對(duì)照組，說(shuō)明選出的兩種餌料對(duì)大鯢的生長(zhǎng)都比直接投喂不挑揀的野雜魚(yú)要好。泥鰍組平均體重增加了20.21%，體重增加的最多，與對(duì)照組相比存在顯著性差異，可見(jiàn)大鯢喜食泥鰍這種餌料魚(yú)，并且有利于個(gè)體體重的增加，鯽魚(yú)組平均體重增加了8.39%，作為餌料比對(duì)照組要好，但是增重百分比沒(méi)有顯著性差異。劉鑒毅等[8]對(duì)人工養(yǎng)殖的大鯢的餌料的選擇性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在人工飼養(yǎng)條件下大鯢喜歡吃泥鰍、青蛙、白鰱和鯽魚(yú)，其中泥鰍和鯽魚(yú)的攝食率分別為94.4%和65%。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果和文獻(xiàn)結(jié)果一致，對(duì)于這些大鯢喜食的餌料魚(yú)，有利于顯著增加大鯢的體重。

3.2 血液學(xué)生理和生化指標(biāo)

實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的血液學(xué)指標(biāo)見(jiàn)表2。A組總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和球蛋白（GLOB）含量都是最高的，分別為85.98g/L、32.67g/L和50.81 g/L，實(shí)驗(yàn)組的這三項(xiàng)指標(biāo)的含量均高于對(duì)照組。A組谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量為177.00 U/L，高于B組（128.00 U/L）和C組（114.00 U/L），對(duì)照組谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量最低（90.65 U/L）。A組總膽紅素（TBIL-K）含量為4.28 μmol/L，高于B組（1.02 μmol/L）、C組（0.66 μmol/L）和對(duì)照組（0.70 μmol/L）。A組間接膽紅素（IBIL）含量為22.82 μmol/L，高于B組（9.56 μmol/L） 和C組（9.39 μmol/L），對(duì)照組間接膽紅素（IBIL）含量為3.54 μmol/L，低于實(shí)驗(yàn)組。A組胱抑素C（Cysc）含量為0.74 mg/L，高于B組（0.22 mg/L）、C組（0.11 mg/L）和對(duì)照組（0.28 mg/L）。

B組谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量為11.50 U/L，低于A組（19.75 U/L）和C組（23.00 U/L），對(duì)照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量為13.15 U/L，僅高于B組。B組谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）含量為9.50 U/L，低于A組（9.75 U/L）和C組（14.00 U/L），而對(duì)照組谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（ALT）含量為8.50 U/L，低于實(shí)驗(yàn)組。

表2 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血液學(xué)指標(biāo)Tab 2 Comparison of blood physiological indices with different forage fish

4 討論

魚(yú)類(lèi)血液學(xué)指標(biāo)的變化，可以反應(yīng)出魚(yú)體的生理狀態(tài)和健康狀況。血液中的氧氣絕大部分以血紅蛋白為載體[9]，血紅蛋白直接參與氧氣的運(yùn)輸，若血紅蛋白含量低，則魚(yú)體在劇烈運(yùn)動(dòng)或應(yīng)激狀態(tài)時(shí)得不到足夠的氧氣。血紅蛋白含量高說(shuō)明對(duì)氧氣的運(yùn)輸能力較強(qiáng)，也就是動(dòng)物體質(zhì)處于較好的狀態(tài)，魚(yú)類(lèi)在患病[10-12]時(shí)紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量都會(huì)降低。本實(shí)驗(yàn)中，血紅蛋白的含量沒(méi)有顯著性差異，但A、B和C三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的血紅蛋白含量都較D組要高，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組的大鯢體質(zhì)狀態(tài)要好于對(duì)照組。

總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，良好的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)可以使血蛋白維持在較高水平，患瘋狂病的鰱其總蛋白明顯降低[10]，患敗血癥的鰱總蛋白、白蛋白明顯降低[12]，患病組斑點(diǎn)叉尾鮰白蛋白含量顯著降低[13]。這幾項(xiàng)指標(biāo)在本實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有顯著性差異，但實(shí)驗(yàn)組的總蛋白、白蛋白水平要高于對(duì)照組，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)要好于對(duì)照組。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶[14-16]是反應(yīng)魚(yú)類(lèi)肝功能、健康狀態(tài)的一個(gè)重要指標(biāo)，對(duì)照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量低于于實(shí)驗(yàn)組，谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶低于實(shí)驗(yàn)組，說(shuō)明對(duì)照組肝功能存在一定的問(wèn)題，同時(shí)也可以說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組的餌料在改善大鯢的肝功能上有一定的效果，泥鰍和大鯢可以作為加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的餌料在平時(shí)的喂養(yǎng)中定期投喂，有利于改善人工養(yǎng)殖大鯢的健康狀況。

膽紅素大部分來(lái)自衰老紅細(xì)胞釋放出的血紅蛋白，當(dāng)肝細(xì)胞有異常時(shí)會(huì)引起直接型、中間型高膽紅素血癥[17-18]，A組總膽紅素、直接膽紅素和間接膽紅素含量都顯著較高，說(shuō)明長(zhǎng)時(shí)間投喂單一餌料，對(duì)肝細(xì)胞也會(huì)造成一定的損傷，血清胱抑素C可作為腎小球?yàn)V過(guò)功能的指標(biāo)，和肌酐都可以作為腎功能損傷的診斷指標(biāo)[19]。A組胱抑素C含量最高，D組肌酐含量最高，通過(guò)這兩個(gè)指標(biāo)可以看出餌料魚(yú)泥鰍的投喂對(duì)大鯢腎功能一定的保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)中大鯢的餌料來(lái)自人工捕獲的野雜魚(yú)，每隔一天，會(huì)有專(zhuān)車(chē)送餌料魚(yú)進(jìn)場(chǎng)，工作人員對(duì)餌料魚(yú)進(jìn)行篩選，剔除大鯢不能食用的種類(lèi)，其他新鮮野雜魚(yú)直接活體投喂到養(yǎng)殖池塘。經(jīng)過(guò)課題組鑒定，大鯢平時(shí)食用的魚(yú)類(lèi)有花、鯽魚(yú)、泥鰍、馬口魚(yú)、麥穗魚(yú)、黃顙魚(yú)等。結(jié)合本次試驗(yàn)需要，專(zhuān)人對(duì)餌料魚(yú)進(jìn)行篩選，鯽魚(yú)和泥鰍挑選后單獨(dú)喂養(yǎng)，標(biāo)明野雜魚(yú)的組別還是按照平時(shí)的喂養(yǎng)習(xí)慣進(jìn)行。由于雜魚(yú)個(gè)體小，大鯢易于捕食，一般的大鯢養(yǎng)殖戶投喂的活餌都以野雜魚(yú)為主。通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以得知，大鯢以泥鰍為主要餌料魚(yú)時(shí)，大鯢體重的增加與對(duì)照組相比有顯著差異，而且在餌料中添加泥鰍和鯽魚(yú)，對(duì)于大鯢的健康狀況也有較好的影響。所以在給養(yǎng)殖大鯢投喂野雜魚(yú)的同時(shí)，我們建議定期增加一些泥鰍、鯽魚(yú)等其他品種，對(duì)于大鯢的增重和體質(zhì)都有好的作用。在實(shí)際操作中我們發(fā)現(xiàn)，野雜魚(yú)中混有刺鰍，倒刺容易卡到大鯢，需要對(duì)鰍的品種進(jìn)行篩選。鯽魚(yú)個(gè)體大小不一，需要根據(jù)大鯢個(gè)體大小挑選適口的進(jìn)行投喂，若鯽魚(yú)個(gè)體過(guò)大，反而不利于大鯢捕食。