楊 飛，李中皓，王 穎，劉珊珊，范子彥，邊照陽(yáng)，唐綱嶺，鄧惠敏

國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，鄭州高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)楓楊街2 號(hào) 450001

目前，大約有30%的登記農(nóng)藥含有1 個(gè)或多個(gè)手性中心［1］。然而，由于生產(chǎn)技術(shù)和成本的原因，大多數(shù)手性農(nóng)藥仍以外消旋體的形式銷(xiāo)售和使用。手性農(nóng)藥的對(duì)映體具有不同的生物活性、毒性及其他性質(zhì)。通常，手性農(nóng)藥的活性只存在于1個(gè)或少數(shù)幾個(gè)異構(gòu)體中，而對(duì)生物活性無(wú)效或低效的異構(gòu)體可視為農(nóng)藥中的“雜質(zhì)”［2-3］。例如，2,4-滴丙酸的除草活性幾乎全部集中在R-對(duì)映體上，其S-對(duì)映體幾乎沒(méi)有除草活性［4］。

茚蟲(chóng)威屬于具有噁二嗪結(jié)構(gòu)的氨基甲酸酯類(lèi)高效殺蟲(chóng)劑，適用于防治甘藍(lán)、辣椒、煙草等作物上的卷葉蛾類(lèi)、菜青蟲(chóng)等。其分子結(jié)構(gòu)中含有1 個(gè)手性中心，具有1 對(duì)對(duì)映體（圖1）［5］。有研究表明，茚蟲(chóng)威的殺蟲(chóng)活性主要來(lái)源于S-異構(gòu)體［6］。McCann 等［7］、李曉剛等［8］研究了茚蟲(chóng)威對(duì)映體在土壤中的選擇性降解行為，發(fā)現(xiàn)土壤理化性質(zhì)對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體的降解有很大的影響。在國(guó)際煙草科學(xué)研究合作中心（Cooperation Centre for Scientific Research Relative to Tobacco，CORESTA）農(nóng)用化學(xué)品咨詢(xún)委員會(huì)（Agro-Chemical Advisory Committee，ACAC）制定的106 種農(nóng)用化學(xué)品指導(dǎo)性殘留限量表（Agrochemical Guidance Residue Levels，GRL）中，茚蟲(chóng)威（R-茚蟲(chóng)威和S-茚蟲(chóng)威之和）的殘留限量被定為15 mg/kg［9］。

圖1 茚蟲(chóng)威化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structure of indoxacarb

研究人員主要采用高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC），以正相色譜模式對(duì)茚蟲(chóng)威進(jìn)行手性分離和測(cè)定［10-13］。該方法需要消耗大量有毒有害的有機(jī)溶劑，而且分析時(shí)間較長(zhǎng)。近年來(lái)，超臨界流體色譜（Supercritical Fluid Chromatography，SFC）引起了研究人員越來(lái)越多的關(guān)注［14-17］。與HPLC 相比，SFC 以低黏度二氧化碳為主要流動(dòng)相，且允許使用更高的流速，從而獲得更快的分離速度；同時(shí)，SFC 的有機(jī)溶劑消耗量低于HPLC。上述優(yōu)點(diǎn)使SFC 在手性化合物的分析、測(cè)定和制備分離中得到了廣泛應(yīng)用。超高效合相色譜系統(tǒng)（Ultra Performance Convergence Chromatography，UPC2）是一種超高效超臨界流體色譜，所用色譜柱的填料為亞2 μm 顆粒，與使用亞5 μm 顆粒的色譜柱相比，這種色譜柱具有更快的分離速度，而且超高效合相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜（Tandem mass spectrometry，MS/MS）聯(lián)用后可進(jìn)一步提高方法靈敏度［18-22］。本研究中基于UPC2-MS/MS 開(kāi)發(fā)了一種環(huán)境友好、靈敏快速的手性分析方法，對(duì)煙草及其土壤中的茚蟲(chóng)威對(duì)映體進(jìn)行立體選擇性拆分和測(cè)定，旨在為煙草農(nóng)殘分析提供方法參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑和儀器

10 個(gè)烤煙樣品，全部來(lái)自2018 年度國(guó)家煙草專(zhuān)賣(mài)局農(nóng)殘普查分析樣品；10 個(gè)土壤樣品，分別來(lái)自10 個(gè)煙葉樣品對(duì)應(yīng)的產(chǎn)地。所有樣品烘干后粉碎，過(guò)2 mm（10 目）篩后置于棕色玻璃瓶中，于4 ℃下保存。

外消旋茚蟲(chóng)威（R-/S-茚蟲(chóng)威，質(zhì)量分?jǐn)?shù)均為50%，德國(guó)Augsburg 公司）；R-茚蟲(chóng)威（＞96.0%，天津阿爾塔科技有限公司）；乙腈、乙醇、甲醇、異丙醇和甲酸（色譜純，德國(guó)Merck 公司）；無(wú)水硫酸鎂（MgSO4）、氯化鈉（NaCl）、N-丙基乙二胺（PSA）（AR，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；高純氮、高純氬（＞99.99%，鄭州源正科技發(fā)展有限公司）；水為超純水。

ACQUITY 超高效合相色譜儀、ACQUITY TQD 四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（配電噴霧電離源）、Acquity UPC2Trefoil CEL1 和Acquity UPC2Trefoil CEL2 柱（100 mm×2.1 mm, 1.7 μm）（美國(guó)Waters公 司）；Chiralcel OD-3 和Chiralcel IG-3 柱（100 mm×3.0 mm, 3.0 μm）（日本Daicel 公司）；VX200渦旋振蕩儀（美國(guó)Labnet 公司）；SG3-30K 高速離心機(jī)（德國(guó)Sigma 公司）；Milli-Q 超純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore 公司）；AEl63 電子天平（感量：0.000 1 g，瑞士Mettler Toledo 公司）。

1.2 方法

1.2.1 基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制

稱(chēng)取20 mg 茚蟲(chóng)威外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL容量瓶中，用乙腈定容，制得R-茚蟲(chóng)威和S-茚蟲(chóng)威質(zhì)量濃度均為100 μg/mL 的一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。移取1.0 mL 一級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10 mL 容量瓶中，用乙腈定容，得到R-茚蟲(chóng)威和S-茚蟲(chóng)威質(zhì)量濃度均為10 μg/mL 二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。分別移取二級(jí)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 000、500、200、100和50 μL 至5 個(gè)10 mL 容量瓶中，用乙腈定容，制得不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。分別移取0.2 mL 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和0.2 mL 空白樣品提取液，混合后用乙腈稀釋至1 mL。各基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中對(duì)映體的質(zhì)量濃度分別為200、100、40、20 和10 ng/mL。所有溶液避光儲(chǔ)存在-20 ℃的冰箱中。

1.2.2 樣品前處理及分析

參考本課題組前期的研究［23］對(duì)樣品進(jìn)行前處理，簡(jiǎn)述如下：稱(chēng)取2 g 樣品置于具蓋離心管中，加入超純水和乙腈，渦旋振蕩；向離心管中加入無(wú)水硫酸鎂、氯化鈉、檸檬酸鈉和檸檬酸二氫鈉，繼續(xù)渦旋振蕩；移取1 mL 上清液于1.5 mL 離心管中，加入無(wú)水硫酸鎂及PSA，渦旋振蕩；取上清液，用0.22 μm 有機(jī)相濾膜過(guò)濾；取200 μL 濾液，加入800 μL乙腈，混勻后進(jìn)行UPC2-MS/MS檢測(cè)。UPC2-MS/MS 分析條件為：

色譜柱：Chiralcel IG-3 柱（100 mm×3 mm，3.0 μm）；動(dòng)態(tài)背壓：13.79 MPa；柱溫：35 ℃；樣品室溫度：10 ℃；補(bǔ)償溶劑：0.1%甲酸的甲醇溶液，流速0.2 mL/min；進(jìn)樣量：2 μL；流動(dòng)相流速：2.0 mL/min；流動(dòng)相：A 相為CO2，B 相為甲醇；等度洗脫：流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B=92%∶8%；質(zhì)譜掃描方式：正離子掃描；離子源：電噴霧電離源（ESI）；離子源溫度：150 ℃；脫溶劑氣溫度：350 ℃；脫溶劑氣流量：600 L/h；錐空氣流量：60 L/h；停留時(shí)間：100 ms；毛細(xì)管電壓：4.5 kV；采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；定量離子對(duì)（m/z）：527.97＞149.95（錐孔電壓：38 V，碰撞電壓：20 V）；定性離子對(duì)（m/z）：527.97＞202.97（錐孔電壓：38 V，碰撞電壓：38 V）。

1.2.3 加標(biāo)樣品制備

在優(yōu)化的條件下，對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析。各選取1 個(gè)煙葉樣品和土壤樣品作為空白樣品。向空白樣品中添加不同量的外消旋體標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，得到3 個(gè)不同濃度的空白加標(biāo)樣品，其中R-/S-茚蟲(chóng)威對(duì)映體的含量分別為2.5、7.5、15.0 mg/kg。在樣品中加入10 mL 甲醇并渦旋振蕩10 min，混勻后置于通風(fēng)櫥中在室溫下?lián)]干溶劑。加標(biāo)樣品按照1.2.2 節(jié)方法處理，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定5 次，連續(xù)測(cè)定3 d，采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)進(jìn)行定量分析。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采集采用MassLynx V4.1 軟件。平均值、回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）的計(jì)算采用Microsoft Excel 2007 版軟件。

2 結(jié)果與討論

2.1 手性分離條件的優(yōu)化

2.1.1 手性柱的選擇

分別考察了Acquity UPC2Trefoil CEL1、Acquity UPC2Trefoil CEL2、Chiralcel OD-3 和Chiralcel IG-3 等4 種不同的手性柱對(duì)茚蟲(chóng)威兩種對(duì)映體的分離情況。Acquity UPC2Trefoil CEL1 和Acquity UPC2Trefoil CEL2 柱均使用改性的多聚糖型固定相，其中Acquity UPC2Trefoil CEL1 柱的硅膠表面涂敷有纖維素-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯），Acquity UPC2Trefoil CEL2 柱的硅膠表面涂敷有纖維素-三（3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯）。Chiralcel OD 柱為多糖衍生物正相涂敷型手性色譜柱，硅膠表面涂敷有纖維素-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）。Chiralcel IG-3 柱為多糖衍生物耐溶劑型手性色譜柱，硅膠表面以共價(jià)鍵鍵合有直鏈淀粉-三（3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖2）表明：當(dāng)使用Acquity UPC2Trefoil CEL1 和Chiralcel OD-3 柱時(shí)，不能實(shí)現(xiàn)茚蟲(chóng)威對(duì)映體的完全分離；使用Acquity UPC2Trefoil CEL2 和Chiralcel IG-3 柱均可實(shí)現(xiàn)對(duì)映體的分離，但使用Acquity UPC2Trefoil CEL2 柱時(shí)，目標(biāo)物色譜峰信號(hào)明顯減弱。綜合考慮目標(biāo)物分離度及色譜峰形和響應(yīng)情況，選擇Chiralcel IG-3 柱對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體進(jìn)行分離。

圖2 4 種不同色譜柱上茚蟲(chóng)威對(duì)映體的UPC2-MS/MS 色譜圖Fig.2 Typical UPC2-MS/MS chromatograms of indoxacarb on four different columns

2.1.2 改性劑的確定

超高效合相色譜以超臨界CO2流體為流動(dòng)相，通常需在超臨界流體中添加少量的有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、異丙醇）作為改性劑。改性劑可以改變流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度，并降低流動(dòng)相與固定相的硅烷醇基團(tuán)的相互作用，從而改善色譜峰形［24］?？疾炝? 種有機(jī)改性劑（甲醇、乙醇和異丙醇）對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體在Chiralcel IG-3 柱上分離效果的影響。結(jié)果（圖3）表明，使用甲醇、乙醇和異丙醇均可以實(shí)現(xiàn)茚蟲(chóng)威對(duì)映體的基線(xiàn)分離，但當(dāng)使用乙醇和異丙醇時(shí)，茚蟲(chóng)威對(duì)映體的MS 信號(hào)明顯減弱且保留時(shí)間變長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)中還考察了甲酸、乙酸和甲酸銨對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體拆分的影響，結(jié)果表明，加入甲酸、乙酸等并沒(méi)有改善對(duì)映體之間的分離度和信號(hào)響應(yīng)強(qiáng)度。因此，選擇甲醇作為流動(dòng)相改性劑。

圖3 改性劑對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體分離效果的影響Fig.3 Effect of modifier solvent on enantioseparation of indoxacarb enantiomers

2.1.3 動(dòng)態(tài)背壓的選擇

動(dòng)態(tài)背壓（Automatic back pressure regulator，ABPR）升高后，流動(dòng)相密度隨之增加，而目標(biāo)物的保留時(shí)間減小。原因可能是，在高背壓下色譜柱內(nèi)流動(dòng)相密度增加，溶劑化能力和洗脫效率均有所提高［25］。分別考察了不同背壓（11.03、12.41、13.79 和15.17 MPa）對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體分離效果的影響。結(jié)果（圖4）顯示，隨著動(dòng)態(tài)背壓的升高，目標(biāo)物保留時(shí)間減少，但是動(dòng)態(tài)背壓對(duì)目標(biāo)物分離效率無(wú)顯著影響，茚蟲(chóng)威對(duì)映體的分離度幾乎不變?？梢?jiàn)，動(dòng)態(tài)背壓變化在茚蟲(chóng)威對(duì)映體的分離中不起關(guān)鍵作用。當(dāng)動(dòng)態(tài)背壓為13.79 MPa 時(shí)，茚蟲(chóng)威對(duì)映體的色譜峰信號(hào)響應(yīng)強(qiáng)度較高。因此，選擇動(dòng)態(tài)背壓為13.79 MPa。

圖4 動(dòng)態(tài)背壓對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體分離效果的影響Fig.4 Effect of ABPR on enantioseparation of indoxacarb enantiomers

2.1.4 柱溫的確定

對(duì)于合相色譜，溫度也會(huì)影響目標(biāo)物的保留時(shí)間。隨著柱溫的升高，二氧化碳的密度和黏度降低，對(duì)目標(biāo)物的洗脫能力降低，從而導(dǎo)致目標(biāo)物保留時(shí)間延長(zhǎng)［26-27］。在動(dòng)態(tài)背壓13.79 MPa、流速2 mL/min 的條件下，考察了不同柱溫（35～50 ℃）對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體拆分效果的影響。結(jié)果（圖5）表明，隨著柱溫的升高，目標(biāo)物保留時(shí)間增加，但對(duì)映體分離度幾乎不變；在柱溫35 ℃時(shí)，茚蟲(chóng)威對(duì)映體的色譜峰面積最大，方法靈敏度較高。因此選擇柱溫為35 ℃。

圖5 柱溫對(duì)茚蟲(chóng)威對(duì)映體分離效果的影響Fig.5 Effect of column temperature on enantioseparation of indoxacarb enantiomers

2.1.5 茚蟲(chóng)威對(duì)映體的洗脫順序

在優(yōu)化的條件下，利用R-茚蟲(chóng)威標(biāo)準(zhǔn)溶液確定茚蟲(chóng)威兩種異構(gòu)體在UPC2-MS/MS 分析中的洗脫順序。實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)先前的研究報(bào)道［5］鑒定了茚蟲(chóng)威對(duì)映體的旋光性。結(jié)果顯示，茚蟲(chóng)威對(duì)映體在手性柱（Chiralcel IG-3）上的洗脫順序?yàn)椋篠-（+）-茚蟲(chóng)威（1.05 min）和R-（-）-茚蟲(chóng)威（1.28 min）。在優(yōu)化的手性分離條件下，煙草和土壤實(shí)際加標(biāo)樣品的選擇離子色譜圖如圖6 所示?？梢钥闯觯诓煌幕|(zhì)中，S-茚蟲(chóng)威和R-茚蟲(chóng)威均實(shí)現(xiàn)了基線(xiàn)分離，且峰形良好。

2.2 方法評(píng)價(jià)

圖6 烤煙和土壤實(shí)際加標(biāo)樣品的色譜圖Fig.6 Chromatogram of actual spiked samples of flue-cured tobacco and soil

2.2.1 基質(zhì)效應(yīng)一般認(rèn)為，液質(zhì)聯(lián)用中的基質(zhì)效應(yīng)是由于基質(zhì)成分和目標(biāo)物在離子化時(shí)相互競(jìng)爭(zhēng)造成的，表現(xiàn)為離子抑制或離子增強(qiáng)效應(yīng)，其對(duì)儀器的靈敏度和重復(fù)性影響顯著［28］。通常采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)斜率和溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)斜率之比（K）來(lái)評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)：當(dāng)K 在0.9～1.1 之間時(shí)，基質(zhì)效應(yīng)不明顯；當(dāng)K大于1.1 時(shí)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)；當(dāng)K 小于0.9 時(shí)為基質(zhì)減弱效應(yīng)。結(jié)果（表1）表明，在基質(zhì)不稀釋的情況下，基質(zhì)效應(yīng)在0.15～0.39 范圍內(nèi)，說(shuō)明在煙草和土壤基質(zhì)中存在顯著的基質(zhì)抑制效應(yīng)。因此，對(duì)于煙草和土壤樣品中茚蟲(chóng)威對(duì)映體的測(cè)定，均使用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量分析。

基質(zhì)的稀釋倍數(shù)也是影響基質(zhì)效應(yīng)的重要因素。實(shí)驗(yàn)中考察了不同稀釋倍數(shù)下烤煙和土壤樣品中茚蟲(chóng)威對(duì)映體的基質(zhì)效應(yīng)。結(jié)果（表1）表明，隨著稀釋倍數(shù)的增加，目標(biāo)物的相對(duì)響應(yīng)強(qiáng)度（各樣品的響應(yīng)強(qiáng)度與標(biāo)樣的響應(yīng)強(qiáng)度之比）也增大，表明稀釋樣品有助于減小基質(zhì)效應(yīng)。但是稀釋的作用有限，稀釋倍數(shù)過(guò)高，則目標(biāo)物濃度太低，從而影響方法靈敏度。因此，選擇用乙腈將其稀釋5倍后進(jìn)樣。

表1 茚蟲(chóng)威對(duì)映體的線(xiàn)性方程、基質(zhì)效應(yīng)、檢出限和定量限Tab.1 Regression equation, matrix effect, LODs, and LOQs for enantiomers of indoxacarb

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、檢出限和定量限

通過(guò)繪制茚蟲(chóng)威對(duì)映體色譜峰面積與其濃度的關(guān)系圖來(lái)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的形式為Y = AX + B，其中A 和B 分別表示為斜率和截距。對(duì)于每種對(duì)映體，在10～200 ng /mL 的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)分析標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和不同基質(zhì)匹配的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，以確定該方法曲線(xiàn)的線(xiàn)性。表1 表明，不同基質(zhì)中各對(duì)映體線(xiàn)性關(guān)系良好（R2＞0.993），可以滿(mǎn)足定量分析的需要。將加標(biāo)空白煙草和土壤提取物中產(chǎn)生的信噪比（S/N）等于3 和10 時(shí)對(duì)映體的濃度分別定義為檢出限（LOD）和定量限（LOQ）。由表1 可知，不同基質(zhì)中LOD 和LOQ 分別為0.028～0.048 和0.088～0.148 mg/kg。

2.2.3 方法回收率及精密度

通過(guò)空白樣品加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)試該方法的準(zhǔn)確度和精密度。制備了3 個(gè)不同濃度的加標(biāo)樣品，按照1.2.2 節(jié)的方法進(jìn)行前處理，每個(gè)濃度的樣品每天重復(fù)測(cè)定5 次，連續(xù)測(cè)定3 d。3 個(gè)不同濃度的加標(biāo)樣品中R-茚蟲(chóng)威和S-茚蟲(chóng)威的含量為2.5、7.5 和15.0 mg/kg。該方法的精密度由重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確定，并以RSD 表示。通過(guò)比較同一天內(nèi)加標(biāo)樣品的回收率的標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)測(cè)量日內(nèi)精密度。通過(guò)分析3 個(gè)不同日期的加標(biāo)樣品來(lái)確定日間精密度。結(jié)果（表2）顯示，在所有濃度水平下均獲得較好的平均回收率（83.7%～96.6%），兩種對(duì)映體的日內(nèi)精密度（RSD）為2.4%～6.1%，日間精密度（RSD）為3.3%～5.8%。

2.3 方法的應(yīng)用

采用本方法對(duì)10 個(gè)烤煙樣品和10 個(gè)土壤樣品進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果顯示：僅有1 個(gè)土壤樣品檢出有R-茚蟲(chóng)威和S-茚蟲(chóng)威，含量分別為1.05 和0.88 mg/kg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于GRL中規(guī)定的茚蟲(chóng)威對(duì)映體的殘留限量［9］。該研究結(jié)果也與煙草中農(nóng)藥實(shí)際使用情況相吻合。氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥在煙草中的使用量很小，多年來(lái)煙草中該農(nóng)藥的檢出率一直保持在很低的水平。個(gè)別土壤樣品檢出茚蟲(chóng)威可能是由于輪作所致。另外，由于茚蟲(chóng)威對(duì)映體的降解速率不同，因此，兩種茚蟲(chóng)威對(duì)映體的含量存在差異。

表2 方法的精密度和準(zhǔn)確度Tab.2 Accuracy and precision of the proposed method

3 結(jié)論

建立了手性分離和測(cè)定煙草和土壤樣品中茚蟲(chóng)威對(duì)映體的超高效合相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，采用本方法可在5 min 內(nèi)實(shí)現(xiàn)茚蟲(chóng)威對(duì)映體的基線(xiàn)分離。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，茚蟲(chóng)威對(duì)映體的回收率在83.7%～96.6%之間，日內(nèi)精密度為2.4%～6.1%，日間精密度為3.3%～5.8%。本方法以CO2作為主要流動(dòng)相，定量結(jié)果較為準(zhǔn)確可靠。本研究為煙草及土壤中茚蟲(chóng)威對(duì)映體的分離和測(cè)定提供了一種綠色、快速、可靠的方法。