張文增 馬鐵錚 荊紅波 皮海倫 朱思捷 張松建

研究表明，鼠類是多種自然疫源性疾病如鼠疫、腎綜合征出血熱(HFRS)、萊姆病、恙蟲(chóng)病、斑點(diǎn)熱等的傳染源或儲(chǔ)存宿主，在疾病的傳播和流行中起重要作用[1]。因此，對(duì)小型獸類種群及病原攜帶狀況調(diào)查將有助于相關(guān)自然疫源性疾病的監(jiān)測(cè)和防控。北京五彩淺山地區(qū)位于順義區(qū)東北部，地形地貌以山區(qū)為主，地勢(shì)復(fù)雜，生境類型多樣。對(duì)于五彩淺山地區(qū)小型獸類種群密度及相關(guān)病原體攜帶狀況的本底資料較少，缺乏系統(tǒng)的調(diào)查研究。為掌握五彩淺山地區(qū)小型獸類種群密度及相關(guān)自然疫源性疾病的本底水平及地區(qū)分布，于2017-2018年開(kāi)展了為期兩年的專題調(diào)查，旨在為順義區(qū)相關(guān)自然疫源性疾病的監(jiān)測(cè)、防控策略的制定及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1監(jiān)測(cè)點(diǎn)選擇 北京市五彩淺山地區(qū)包括順義區(qū)龍灣屯鎮(zhèn)、木林鎮(zhèn)、張鎮(zhèn)、大孫各莊鎮(zhèn)及北石槽鎮(zhèn)5個(gè)鎮(zhèn)，該地區(qū)保存了良好的自然環(huán)境，野生動(dòng)物資源豐富，是自然疫源性疾病病原體的天然儲(chǔ)存庫(kù)。2017-2018年，在五彩淺山地區(qū)5個(gè)鎮(zhèn)選擇有代表性的生境如山地、果園、農(nóng)田、居民區(qū)等設(shè)立小型獸類監(jiān)測(cè)點(diǎn)，每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)設(shè)立5個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)，各監(jiān)測(cè)點(diǎn)間距500～1 000 m。

1.2監(jiān)測(cè)方法 采用中號(hào)鼠籠(浙江省杭州科凌蟲(chóng)控科技有限公司生產(chǎn))，以火腿腸作誘餌，采用5 m夾(籠)線法布放鼠籠，在不同監(jiān)測(cè)點(diǎn)開(kāi)展小型獸類種屬和密度監(jiān)測(cè)，晚放晨收。詳細(xì)記錄監(jiān)測(cè)鼠種及捕鼠地點(diǎn)。每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)不同生境每季度監(jiān)測(cè)一次。捕捉的小型獸類采用乙醚深度麻醉后進(jìn)行種類鑒定，同時(shí)采集小型獸類的肺、肝、脾等組織，置于液氮保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3病原學(xué)檢測(cè) 以無(wú)菌眼科剪及眼科鑷剪取小型獸類組織標(biāo)本(脾、肝和肺)25 mg，放入EP管中，每個(gè)微量離心管包含1個(gè)不銹鋼珠，向每個(gè)管中加入300 μLPBS(DNA 加入ATL)，將試管放入TissueLyserⅡ組織研磨儀(Qiagen公司，德國(guó))，以25 Hz研磨2 min，將樣本研碎。取200 μL采用核酸提取試劑，按照Qiagen cador?Pathogen 96 QIAcube?HT Kit試劑盒說(shuō)明書(shū)操作提取樣本核酸。恙蟲(chóng)病東方體(Ot)、伯氏疏螺旋體(Bb)、斑點(diǎn)熱群立克次體(SGFR)、巴貝西蟲(chóng)(Babesia)均使用北京金豪制藥股份有限公司生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)標(biāo)本為脾和肝；漢坦病毒(HV)使用江蘇碩世生物科技有限公司生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)標(biāo)本為肺。具體方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。儀器用羅氏熒光定量PCR儀LightCycler480(Roche Diagnostics公司，美國(guó))。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 Excel 2010和SPSS 25.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)分析。不同類型變量間小型獸類捕獲率的比較采用χ2檢驗(yàn)，捕獲率多重比較采用χ2分割法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1小型獸類種群構(gòu)成 共布放鼠籠4 050籠次，捕獲各類小型獸類191只，總體捕獲率4.72%。捕獲的小型獸類經(jīng)鑒定隸屬2目3科6屬7種，分別為嚙齒目鼠科的黑線姬鼠、大林姬鼠、褐家鼠、小家鼠、大倉(cāng)鼠，松鼠科的巖松鼠和食蟲(chóng)目猥科的遠(yuǎn)東刺猬。在捕獲小型獸類的群落構(gòu)成中，黑線姬鼠和褐家鼠分別占45.03%(86/191)和37.17%(71/191)，為該地區(qū)優(yōu)勢(shì)種。大倉(cāng)鼠、大林姬鼠和小家鼠分別占7.33%、5.24%和2.62%。此外，捕獲遠(yuǎn)東刺猬4只和巖松鼠1只。不同地區(qū)間，除北石槽鎮(zhèn)以外，其余4個(gè)鎮(zhèn)小型獸類種群構(gòu)成情況與整個(gè)地區(qū)基本一致。不同鎮(zhèn)小型獸類捕獲率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.26，P<0.01)，北石槽鎮(zhèn)捕獲率低于其他四個(gè)鎮(zhèn)(χ2分別為6.08，10.74，13.11，16.46，P均<0.05，表1)。

表1 北京五彩淺山地區(qū)不同地點(diǎn)小型獸類種類構(gòu)成

2.2不同生境小型獸類種群分布及其密度 五彩淺山地區(qū)不同生境小型獸類種群分布及其密度存在一定差異。黑線姬鼠、大倉(cāng)鼠、大林姬鼠等野棲型鼠類在山地、果園2類生境中有分布，巖松鼠僅在山地有發(fā)現(xiàn)。家棲型的褐家鼠主要分布在居民區(qū)、農(nóng)田和山地3種生境，小家鼠僅在果園有發(fā)現(xiàn)。遠(yuǎn)東刺猬在果園和農(nóng)田兩種生境有發(fā)現(xiàn)。不同生境小型獸類優(yōu)勢(shì)種各異，山地以黑線姬鼠為優(yōu)勢(shì)種，占78.10%；果園以小家鼠為優(yōu)勢(shì)種，占33.33%；居民區(qū)和農(nóng)田以褐家鼠為優(yōu)勢(shì)種，分別占100%和75%。不同生境間小型獸類密度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.06，P<0.01)。以居民區(qū)小型獸類密度最高，為6.38%，其次為山地和果園，分別為 4.72% 和3.75%，農(nóng)田最低，為1.33%(表2)。

2.3不同季節(jié)小型獸類種群分布及其密度 2017年和2018年，五彩淺山地區(qū)小型獸類捕獲率分別為4.49%和4.93%，兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.44，P>0.05)。不同季度間小型獸類捕獲率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=54.87，P<0.001)，小型獸類捕獲率季節(jié)消長(zhǎng)明顯，呈單峰型，高峰出現(xiàn)在秋季，為7.87%，高于其他三個(gè)季節(jié)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為22.59、36.45、14.08，P均<0.001，圖1)。

表2 北京五彩淺山地區(qū)不同生境小型獸類種類構(gòu)成

圖1 北京五彩淺山地區(qū)不同季節(jié)小型獸類種類構(gòu)成

2.4小型獸類攜帶病原體情況 191只小型獸類共采集有效樣本182份，樣本有效率95.3%(182/191)。對(duì)182份有效樣本開(kāi)展相關(guān)病原體檢測(cè)，結(jié)果恙蟲(chóng)病東方體、伯氏疏螺旋體、斑點(diǎn)熱群立克次體、巴貝西蟲(chóng)和漢坦病毒均為陰性。

3 討論

3.1調(diào)查結(jié)果顯示，五彩淺山地區(qū)不同生境小型獸類種群分布及其密度存在一定差異。其中，山區(qū)小型獸類種群構(gòu)成與周邊同類地區(qū)監(jiān)測(cè)結(jié)果基本一致[2-3]，而平原地區(qū)小型獸類種群構(gòu)成與順義區(qū)歷年監(jiān)測(cè)情況存在一定差異[4-5]。山區(qū)小型獸類種群以黑線姬鼠、大倉(cāng)鼠、大林姬鼠等野棲型鼠類為優(yōu)勢(shì)種，而平原地區(qū)以褐家鼠和小家鼠等家棲型為優(yōu)勢(shì)種。此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，五彩淺山地區(qū)小型獸類總體捕獲率低于深圳地區(qū)新型旅游區(qū)小型獸類密度[6]，但略高于近些年順義區(qū)平原地區(qū)鼠類監(jiān)測(cè)捕獲率，說(shuō)明該地區(qū)小型獸類種群結(jié)構(gòu)復(fù)雜，密度較高。建議相關(guān)部門將小型獸類種群防制與其季節(jié)消長(zhǎng)結(jié)合起來(lái)，同時(shí)考慮不同鼠類的種群繁殖特性，在鼠類密度高峰來(lái)臨前開(kāi)展相關(guān)滅鼠工作，科學(xué)滅鼠，以達(dá)到良好的控制效果。

3.2根據(jù)北京市疾控中心工作方案要求，順義區(qū)每年開(kāi)展腎綜合征出血熱鼠間疫情監(jiān)測(cè)工作，采集不少于30份標(biāo)本送市疾控中心檢測(cè)，2013年以來(lái)送檢樣本漢坦病毒抗原均為陰性[4]。呂燕寧等[5]對(duì)2013年順義區(qū)送檢的39份褐家鼠標(biāo)本開(kāi)展恙蟲(chóng)病東方體及巴貝西蟲(chóng)檢測(cè)，結(jié)果2份標(biāo)本巴貝西蟲(chóng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率5.13%。此次調(diào)查中，182份標(biāo)本5種病原體檢測(cè)均為陰性，因此，目前該地區(qū)人群及游客感染相關(guān)自然疫源性疾病風(fēng)險(xiǎn)不大。然而既往調(diào)查結(jié)果顯示，順義區(qū)為HFRS自然疫源地[4]，五彩淺山地區(qū)毗鄰的平谷區(qū)是北京市恙蟲(chóng)病主要流行區(qū)[7]，與其臨近的自然條件相近的密云、懷柔、延慶區(qū)也有較高的感染率[8-9]。北京遠(yuǎn)郊山林地區(qū)存在著萊姆病自然疫源地，順義區(qū)周邊密云、懷柔、昌平等地區(qū)有萊姆病的流行[10-11]。監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，五彩淺山地區(qū)小型獸類種群結(jié)構(gòu)復(fù)雜，密度較高，因此，該地區(qū)發(fā)生上述自然疫源性疾病的風(fēng)險(xiǎn)持續(xù)存在，應(yīng)加強(qiáng)該地區(qū)高危人群健康監(jiān)測(cè)與健康宣教工作，定期開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，根據(jù)評(píng)估結(jié)果適時(shí)公布相關(guān)疾病預(yù)警信息，保障該地區(qū)旅游安全和人群健康。