黃竹珺，尚宇南，鄧德育，靳世民，呂迎春，李學(xué)玲*

（1.普洱學(xué)院生物與化學(xué)學(xué)院，云南 普洱 665000；2.云南省高校亞熱帶藥用食用生物資源開發(fā)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 普洱 665000）

滇 黃 精 （Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.）是常用滋補(bǔ)中藥，為云南地道藥材品種，系百合科黃精屬多年生草本植物[1]，干燥根莖入藥。滇黃精、黃精和多花黃精這三種黃精原生藥均為2015 年版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《藥典》）收錄品種，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤肺、益腎的功效。用于脾胃氣虛、體倦乏力、口干食少、肺虛燥咳、腰膝酸軟、須發(fā)早白等[2]。目前黃精有效成分含量測定研究主要有黃精多糖、薯蕷皂苷元[3-4]等的含量測定。但《藥典》以往版本到目前的2015 版中僅以黃精多糖的含量作為控制黃精藥材質(zhì)量的指標(biāo)，專屬性和實(shí)用性不強(qiáng)，不能準(zhǔn)確可靠的控制黃精藥材的質(zhì)量。

隨著人們生活水平的提高，人們的養(yǎng)生意識(shí)在不斷增強(qiáng)，對中藥的認(rèn)識(shí)也在不斷加深。黃精作為常用滋補(bǔ)中藥其需求量大幅增加，這為人工種植提供了發(fā)展機(jī)遇，但是相關(guān)部門對黃精藥材質(zhì)量監(jiān)管不夠嚴(yán)格，藥農(nóng)栽培種植不規(guī)范，加工人員加工處理不規(guī)范使之受到污染，導(dǎo)致出現(xiàn)重金屬超標(biāo)情況，以至于市場上出現(xiàn)中藥材魚龍混雜的現(xiàn)象，質(zhì)量嚴(yán)重下降。因此，需要制定嚴(yán)格的藥材質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為市場提供高質(zhì)量的原藥材。另外，我國中藥材的出口貿(mào)易快速增長，但隨之而來的質(zhì)量安全問題卻阻礙了我國中藥材產(chǎn)品進(jìn)入國際市場，嚴(yán)重影響了我國中藥產(chǎn)品的發(fā)展[5]。為了順應(yīng)國際市場對于無污染、綠色藥材的需求[6]，對滇黃精中的重金屬元素的測定勢在必行。因此，本實(shí)驗(yàn)測定滇黃精藥材中Cu、Cd、Pb、Zn 四種重金屬元素的含量，結(jié)果對其質(zhì)量控制提供依據(jù)，也可為今后藥典的增訂提供參考。

1 儀器與材料

1.1 主要儀器

SE-750 高速粉碎機(jī)、FA3204B 電子天平（上海天美天平儀器有限公司）、SH220F 石墨消解儀（山東海能科學(xué)儀器有限公司）、GB6003-85 藥典檢驗(yàn)篩（5 號(hào)篩、0.18mm，浙江上虞華豐五金儀器有限公司）、ICAP6300 等離子體發(fā)射光譜儀（賽默飛世爾科技公司）。

1.2 主要試劑

銅、鎘、鉛、鋅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（優(yōu)級(jí)純，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)商城廣州分析測試中心科力技術(shù)開發(fā)公司）、鹽酸（優(yōu)級(jí)純）、硝酸（優(yōu)級(jí)純）、超純水。

1.3 實(shí)驗(yàn)藥材

本文藥材樣品的采集以覆蓋云南省整個(gè)滇黃精主要分布區(qū)為原則，分別對10 個(gè)采樣點(diǎn)的滇黃精進(jìn)行采集，見表1。

表1 滇黃精藥材來源

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 儀器參數(shù)的設(shè)定

儀器工作參數(shù)如下：射頻功率1150W，等離子體氣（冷卻氣）流速12.0L/min，輔助氣流速0.5L/min，霧化氣流速0.75L/min，進(jìn)樣速率50r/min，蠕動(dòng)泵進(jìn)樣。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精確量取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用2%的硝酸稀釋至質(zhì)量濃度分別為0.0000、0.0500、0.1000、0.2000、0.5000、1.0000mg/L 的溶液。調(diào)諧儀器，設(shè)定相關(guān)參數(shù)，把配制好的不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，運(yùn)行儀器后自動(dòng)生成回歸方程。不同濃度下標(biāo)準(zhǔn)溶液測得的S（IR）值為縱坐標(biāo)，對應(yīng)濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算回歸方程，在所配制濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，各元素回歸方程、相關(guān)系數(shù)見表2。

表2 元素回歸方程及相關(guān)系數(shù)

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 儀器檢出限實(shí)驗(yàn)

將空白溶液平行測試11 次，Cu、Cd、Pb、Zn 的檢出限均能達(dá)到檢測要求。

2.3.2 儀器精密度實(shí)驗(yàn)

精密取標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測試10 次所得RSD 值。經(jīng)檢測Cu、Cd、Pb、Zn 的RSD 分別為：0．9%、2.3%、3.1%、1.8%均能達(dá)到檢測要求。

2.3.3 重復(fù)性及穩(wěn)定性試驗(yàn)

分別精密稱取不同產(chǎn)地滇黃精樣品6 份，按照樣品處理方法進(jìn)行處理后，通過測定Cu、Cd、Pb、Zn 并計(jì)算其含量，結(jié)果RSD 均小于5.6%。再將其放置24h 后進(jìn)行測定，各元素的含量變化較小，其變動(dòng)范圍在9%以內(nèi)。

2.4 滇黃精供試液的制備

先將容量瓶，移液管，消解管等玻璃儀器用1∶1 的硝酸溶液浸泡24h，洗凈后用超純水沖洗，放入烘箱烘干，備用。

準(zhǔn)確稱取過0.18mm 篩的云南各地區(qū)滇黃精藥材粉末1.0000g 置于消解管中，平行取樣三次，加入混酸8∶2（鹽酸4.8mL，硝酸19.2mL），靜置10min，按照設(shè)定條件進(jìn)行消解，消解采用升溫消解處理，首先使溫度在8min 內(nèi)由0℃升至120℃，保持2min；然后使溫度在11min 內(nèi)由120℃升至180℃，保持23min[7-8]；消解后進(jìn)行趕酸處理，趕酸至2 ～3mL，取出消解管，冷卻15min 后，先用定量濾紙將消解液過濾，再用超純水清洗消解管2～3 次一并過濾，最后轉(zhuǎn)移至100mL 容量瓶中，定容至刻度，用0.45μm 水系微孔濾膜過濾，濾液置于25mL 比色管中，最后用ICP-AES 測出濃度，并做空白試驗(yàn)，最后根據(jù)公式計(jì)算出重金屬含量。

2.5 不同產(chǎn)地滇黃精中各種重金屬含量測定及結(jié)果

按2.2 項(xiàng)下的方法，分別測定云南各地滇黃精藥材中重金屬含量，樣品中所含Cu、Cd、Pb、Zn 的含量均測量3 次，取其平均值，即為滇黃精中該重金屬元素的含量，詳見表3 及圖1～圖4。

以《藥典》為核心的我國中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系中，目前涉及重金屬檢查的藥材品種還不多，已有的中藥材中重金屬Cu、Cd、Pb 的檢出限分別為：w（銅）≤20mg/kg，w（鎘）≤0.3mg/kg，w（鉛）≤5mg/kg。由于《藥典》中未對鋅作出限定，本文采用的是《食品中鋅限量衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB13106-91 中對糧食的限量：w（鋅）≤50mg/kg。

根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)可知，所測10 個(gè)樣品中重金屬Cu、Cd、Pb、Zn 含量均存在明顯差異。其中1 號(hào)樣品重金屬Cd、Zn 含量超出檢出限；3 號(hào)樣品重金屬Zn 含量超出檢出限；6 號(hào)樣品重金屬Cd、Pb、Zn 含量超出檢出限；7、8、9 號(hào)樣品重金屬Cd、Pb 含量均超出檢出限；10 號(hào)樣品重金屬Cd 含量超出檢出限；其余均符合限量標(biāo)準(zhǔn)要求。

表3 滇黃精中重金屬Cu、Cd、Pb、Zn 含量數(shù)據(jù)表（n=3）

圖1 云南不同地區(qū)滇黃精中重金屬銅含量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖

圖2 云南不同地區(qū)滇黃精中重金屬鎘含量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖

圖3 云南不同地區(qū)滇黃精中重金屬鉛含量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖

圖4 云南不同地區(qū)滇黃精中重金屬鋅含量數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖

2.7 討論

中藥材中重金屬含量超標(biāo)，影響因素有很多：土壤環(huán)境，灌溉的水源，化肥和農(nóng)藥的不合理使用等。本文探究滇黃精中的重金屬含量是值得的，通過檢測，可以評(píng)價(jià)滇黃精的營養(yǎng)價(jià)值；提供滇黃精藥理活性中關(guān)于金屬元素含量的信息，對開發(fā)滇黃精資源具有指導(dǎo)意義；有利于滇黃精藥材加工工藝的改進(jìn)和質(zhì)量的提高；可以了解滇黃精藥材污染情況，以便查清和控制污染源[9]。因此，我們迫切需要加強(qiáng)對藥材基地重金屬污染的監(jiān)測力度，嚴(yán)格控制工業(yè)三廢的排放，合理使用化肥和農(nóng)藥，改善藥材的生長環(huán)境，從而保證藥材的質(zhì)量。