鄧楚君,許琳霜,李 波,楊 偉

(河南科技學(xué)院食品學(xué)院,河南新鄉(xiāng) 453003)

姜黃素(Cur)是從姜黃根莖中提取分離出的一種多酚類物質(zhì),具有抗菌和抗氧化等多種生物活性[1-4]。但其水溶性較差,生物利用率低,嚴(yán)重限制了其在食品體系中的應(yīng)用。研究表明,利用食品傳遞體系能夠有效提高Cur的水溶性和生物利用率,如納米顆粒[5]和納米乳液[6]等。

蛋白質(zhì)能夠作為壁材,用于包埋、傳遞食品功能因子[7]。乳鐵蛋白(LF)是一種單鏈的球狀糖蛋白。與其他蛋白質(zhì)不同,LF具有多種生物活性功能,如抗菌、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等[8-9]。

許多研究表明,球狀蛋白可通過(guò)熱變性形成納米顆粒和微米顆粒[10-11]。Sneharani等[12]發(fā)現(xiàn)熱變性β-乳球蛋白比天然β-乳球蛋白具有更高的運(yùn)載Cur的能力。當(dāng)LF在85 ℃條件下加熱時(shí),蛋白質(zhì)構(gòu)象發(fā)生改變,疏水性增加[13-14],因而可能有利于其與疏水性多酚(如Cur)形成復(fù)合物。Yamauchi等[15]研究表明,熱變性LF能夠形成納米顆粒。然而,目前沒(méi)有關(guān)于天然和熱變性LF與Cur相互作用的研究報(bào)道。

本文采用多種光譜學(xué)方法研究了LF-Cur復(fù)合物的結(jié)構(gòu)和相互作用機(jī)制。通過(guò)濁度法和動(dòng)態(tài)光散射研究了復(fù)合物的顆粒特性,應(yīng)用紅外光譜和圓二色譜研究了LF-Cur復(fù)合物的結(jié)構(gòu)特性,采用熒光光譜比較研究了Cur與天然和熱變性LF的結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù),以期為L(zhǎng)F-Cur復(fù)合物在食品中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

LF(純度>92%) 新西蘭國(guó)際有限公司;Cur(純度>98%) 美國(guó)Sigma公司;乙酸鈉、冰乙酸 天津市德恩化學(xué)試劑有限公司;溴化鉀 上海譜振生物科技有限公司;其他化學(xué)試劑均為分析純。

HACH 2100N型濁度儀、DR390型可見(jiàn)光分光光度計(jì) 美國(guó)哈希公司;Zetasizer Nano-ZS90型納米激光粒度儀 英國(guó)馬爾文儀器有限公司;Spectrum Tensor27型傅立葉變換紅外光譜儀 德國(guó)布魯克科技有限公司;Pistar π-180型圓二色光譜 英國(guó)應(yīng)用光物理公司;熒光分光光度計(jì) 美國(guó)安捷倫科技有限公司;THZ-82型水浴恒溫振蕩器 江蘇金壇億通電子有限公司;JA1003N型電子天平 上海菁海儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 復(fù)合物的制備 在室溫下,溶解一定量的LF于pH5.0、0.01 mol/L的醋酸緩沖液中,持續(xù)攪拌2 h,使LF在緩沖液中的最終濃度為4×10-4mol/L。同時(shí),配制5.4×10-3mol/L的Cur無(wú)水乙醇溶液。

天然LF-Cur復(fù)合物制備:將天然LF(記為L(zhǎng)F25 ℃)與不同濃度的Cur溶液等體積混合,使混合溶液中LF的終濃度為2×10-4mol/L,Cur的終濃度分別為0、1.4×10-5、2.7×10-5、5.4×10-5、8.1×10-5和1.08×10-4mol/L。

熱變性LF-Cur復(fù)合物制備:將天然LF溶液裝入直徑1 cm的塑料管中,于90 ℃的恒溫水浴中加熱20 min。熱處理后,將樣品立即放入冰水中冷卻以防止進(jìn)一步變性。取熱變性的LF(記為L(zhǎng)F90 ℃)與不同濃度的Cur溶液等體積混合,使混合溶液中LF的終濃度和Cur的終濃度與天然LF-Cur復(fù)合物中保持一致。

其中,天然和熱變性LF-Cur混合溶液中乙醇的最終濃度為2%(該乙醇濃度不會(huì)引起LF變性)。

1.2.2 濁度和粒徑測(cè)定 取3 mL天然/熱變性LF-Cur復(fù)合物溶液(Cur濃度分別為0、1.4×10-5、2.7×10-5、5.4×10-5、8.1×10-5和1.08×10-4mol/L)于試樣瓶中,擦拭干凈試樣瓶外壁,放入濁度儀測(cè)定溶液的濁度數(shù)值并記錄[16]。取1 mL Cur濃度分別為0、1.4×10-5、2.7×10-5、5.4×10-5、8.1×10-5和1.08×10-4mol/L的天然/熱變性LF-Cur復(fù)合物溶液于玻璃皿中,采用納米激光粒度儀分析復(fù)合物的粒徑大小與粒徑分布(PDI),掃描次數(shù)12次[17]。測(cè)定溫度均為25 ℃,散射角165°。每個(gè)樣品測(cè)定3次,結(jié)果以平均值表示。

1.2.3 ζ-電位測(cè)定 取1 mL Cur濃度分別為0、1.4×10-5、2.7×10-5、5.4×10-5、8.1×10-5和1.08×10-4mol/L的天然/熱變性LF-Cur復(fù)合物溶液于電位皿中,采用納米激光粒度儀測(cè)定復(fù)合物的ζ-電位。測(cè)定溫度為25 ℃,掃描次數(shù)30次,每個(gè)樣品測(cè)定3次,結(jié)果以平均值表示[18]。

1.2.4 圓二色光譜(CD)分析 取0.1 mL Cur濃度分別為5.4×10-5和1.08×10-4mol/L的天然/熱變性LF-Cur復(fù)合物溶液于石英比色皿中,掃描波長(zhǎng)為190～250 nm,響應(yīng)時(shí)間2 s。使用在線圓二色光譜網(wǎng)站(http://dichroweb.cryst.bbk.ac.uk)[19]對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。圓二色光譜圖為三次測(cè)量結(jié)果的平均值。

1.2.5 傅立葉變換紅外(FTIR)光譜分析 LF-Cur復(fù)合物(Cur的濃度為1.08×10-4mol/L)經(jīng)過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,冷凍干燥后得到復(fù)合物粉末。分別取LF、Cur及LF-Cur復(fù)合物干燥粉末2 mg與200 mg溴化鉀研細(xì)均勻后制成透明薄片,進(jìn)行FTIR分析。測(cè)定波數(shù)為500～4000 cm-1,掃描次數(shù)為11次,分辨率為4 cm-1[20]。

1.2.6 熒光光譜分析 參考文獻(xiàn)[21-22]方法,并做適當(dāng)修改。取LF與不同濃度的Cur溶液等體積混合,使溶液中LF濃度為2×10-4mol/L,Cur濃度分別為2.71×10-6、5.43×10-6、8.14×10-6、1.086×10-5、1.629×10-5、2.172×10-5和2.715×10-5mol/L。在25 ℃靜置2 h,然后進(jìn)行熒光測(cè)定。激發(fā)波長(zhǎng)設(shè)定為292 nm,激發(fā)和發(fā)射的狹縫寬度分別為5和10 nm[18]。熒光淬滅數(shù)據(jù)通過(guò)Stern-Volmer方程式(1)進(jìn)行分析。

式(1)

式中:F0和F分別為不加Cur和添加Cur時(shí)的熒光強(qiáng)度;Kq為分子淬滅常數(shù);τ0是沒(méi)有淬滅劑時(shí)的熒光壽命;[Q]為Cur的濃度;Ksv為Stern-Volmer淬滅常數(shù)。結(jié)合常數(shù)Ka和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n通過(guò)雙對(duì)數(shù)方程式(2)進(jìn)行分析。

式(2)

式中:Ka為結(jié)合常數(shù);n為結(jié)合位點(diǎn)數(shù)。

1.2.7 包埋率和運(yùn)載率測(cè)定 參考文獻(xiàn)[23]方法,并做適當(dāng)修改。取10 mL Cur終濃度分別為0、1.4×10-5、2.7×10-5、5.4×10-5、8.1×10-5和1.08×10-4mol/L的天然/熱變性LF-Cur復(fù)合物溶液于50 mL離心管中,在20000 r/min 條件下離心10 min。收集上清液,采用分光光度計(jì)在427 nm處測(cè)定Cur的吸光度;同時(shí)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=6.31916x-0.44581,R2=0.9994)。所有測(cè)定均在25 ℃條件下進(jìn)行。

包埋率(%)=上清液中Cur的量(mg)×100/總Cur的量(mg)

式(3)

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS 16.0 for Windows軟件(SPSS Inc.,Chicago,IL,USA)進(jìn)行方差分析(ANOVA)和動(dòng)力學(xué)回歸分析,顯著性水平為0.05,圖表中小寫字母不同表示在5%水平上差異顯著(p<0.05)。多重比較采用LSD法。所有試驗(yàn)重復(fù)兩次,所有分析檢測(cè)試驗(yàn)重復(fù)三次,測(cè)定結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 濁度和粒徑分析

圖1為L(zhǎng)F-Cur復(fù)合物濁度隨Cur濃度的變化曲線。由圖 1可知,隨著Cur濃度的增加,LF25 ℃-Cur復(fù)合物的濁度迅速增加;當(dāng)Cur濃度為1.08×10-4mol/L時(shí),濁度為(165±6.34)NTU。LF90 ℃-Cur復(fù)合物的濁度隨Cur濃度的增加變化較小,由(0.75±0.12)NTU(Cur濃度為1.4×10-5mol/L)增加到(5.1±3.73)NTU(Cur濃度為1.08×10-4mol/L)。

圖1 LF-Cur復(fù)合物濁度隨Cur濃度的變化曲線

圖2為L(zhǎng)F-Cur復(fù)合物粒徑隨Cur濃度的變化曲線。單獨(dú)LF25 ℃和LF90 ℃的粒徑分別為(12.65±0.48)和(29.96±0.61)nm。這是因?yàn)長(zhǎng)F在90 ℃加熱時(shí)發(fā)生聚集,從而導(dǎo)致熱變性LF粒徑的增加[24]。由圖2可知,隨Cur濃度的增加,LF-Cur復(fù)合物粒徑增加:當(dāng)Cur濃度為(1.4～2.7)×10-5mol/L時(shí),粒徑為13.32～15.18 nm;當(dāng)Cur濃度進(jìn)一步增加(從5.4×10-5mol/L增加到1.08×10-4mol/L),粒徑由135.9 nm增加到334.9 nm,表明溶液中形成了更大的聚集體,這與濁度結(jié)果分析一致。研究表明,多酚能夠與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物。當(dāng)多酚含量較高時(shí),結(jié)合在蛋白質(zhì)表面的多酚能夠通過(guò)橋聯(lián)作用,使蛋白質(zhì)-多酚復(fù)合物形成具有較大粒徑的亞穩(wěn)定狀態(tài)的分散體[25-26]。Chen 等[27]研究表明,大豆分離蛋白-Cur復(fù)合物之間能夠通過(guò)姜黃素的相互作用而結(jié)合,從而形成較大的顆粒。

圖2 LF-Cur復(fù)合物粒徑隨Cur濃度的變化曲線

由圖2可知,相對(duì)于LF25 ℃-Cur復(fù)合物,LF90 ℃-Cur復(fù)合物的粒徑變化較小。Cur濃度為1.4×10-5～1.08×10-4mol/L時(shí),LF90 ℃-Cur復(fù)合物均為納米顆粒(31.77～95.12 nm)。此外,隨著Cur濃度的增加,LF90 ℃-Cur復(fù)合物粒徑分布減小(PDI值從0.61降低到0.24),表明LF90 ℃-Cur復(fù)合物顆粒分布較為均一。

相比LF25 ℃-Cur復(fù)合物,LF90 ℃-Cur復(fù)合物的濁度和粒徑變化較小。這可以歸因于兩個(gè)方面。一方面,LF90 ℃-Cur復(fù)合物的ζ-電位較大,復(fù)合物之間排斥力較強(qiáng),不容易聚集,因此,濁度和粒徑較小[28]。另一方面,由于熱誘導(dǎo)的作用,LF變性,結(jié)構(gòu)展開(kāi)。在這一過(guò)程中,LF90 ℃可能會(huì)失去部分存在于表面的Cur結(jié)合位點(diǎn),但同時(shí)暴露出位于LF90 ℃結(jié)構(gòu)內(nèi)部的結(jié)合位點(diǎn)。此時(shí)更多的Cur與這些結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。但由于空間位阻等作用,Cur不能夠發(fā)揮“橋聯(lián)”作用[29]。因此,LF90 ℃-Cur復(fù)合物主要是納米顆粒,其濁度和粒徑均較小。

2.2 ζ-電位分析

圖3為Cur濃度對(duì)LF-Cur復(fù)合物ζ-電位的影響。單獨(dú)LF25 ℃和LF90 ℃的ζ-電位分別為(7.72±0.35) mV和(8.20±0.19) mV。單獨(dú)LF90 ℃的ζ-電位高于LF25 ℃,這與蛋白質(zhì)90 ℃加熱后,LF的兩個(gè)葉片連續(xù)展開(kāi),最初位于LF疏水內(nèi)部的更多陽(yáng)離子基團(tuán)暴露于溶液中,導(dǎo)致單獨(dú)LF90 ℃ζ-電位的增加有關(guān)[30]。

圖3 Cur濃度對(duì)LF-Cur復(fù)合物電位的影響

由圖3可知,隨著Cur濃度的增加,LF-Cur復(fù)合物的ζ-電位增加。這可能與Cur的添加導(dǎo)致LF結(jié)構(gòu)的改變有關(guān)。該結(jié)果與Teng等[31]的相關(guān)研究結(jié)果一致。通常,溶液中顆粒帶電荷越多,顆粒間聚集的可能性越小,溶液穩(wěn)定性越高。LF90 ℃-Cur復(fù)合物的ζ-電位高于LF25 ℃-Cur復(fù)合物,這有利于提高復(fù)合物溶液的穩(wěn)定性;同時(shí),也解釋了LF90 ℃-Cur復(fù)合物具有的較低濁度和粒徑。

2.3 圓二色譜(CD)分析

如圖4a1所示,在190～260 nm范圍內(nèi),LF25 ℃的圓二色光譜有一個(gè)較寬的、位于208～210 nm中心的負(fù)峰和一個(gè)218～220 nm處的肩峰。與LF25 ℃相比,LF90 ℃的圓二色光譜圖(形狀和強(qiáng)度)發(fā)生了明顯變化,表明加熱使LF變性,蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)改變。當(dāng)加入1.08×10-4mol/L Cur時(shí),LF25 ℃和LF90 ℃的峰值減小,表明Cur能夠誘導(dǎo)LF二級(jí)結(jié)構(gòu)變化。

圖4 LF和LF-Cur復(fù)合物遠(yuǎn)紅外圓二光譜圖(a1)和二級(jí)結(jié)構(gòu)含量(a2)

通過(guò)DICHROWEB程序計(jì)算得到LF二級(jí)結(jié)構(gòu)的含量[32]。通過(guò)SELCON3計(jì)算了α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)卷曲的比例,如圖4a2所示。LF25 ℃和LF90 ℃的二級(jí)結(jié)構(gòu)中α-螺旋結(jié)構(gòu)含量較低(LF25 ℃和LF90 ℃分別為21%和18%),β-折疊含量較高(LF25 ℃和LF90 ℃分別為32%和35%)。加熱變性導(dǎo)致LF中的α-螺旋含量顯著減小(p<0.05),β-折疊含量顯著增加(p<0.05),而β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)卷曲差異不顯著(p>0.05)。該結(jié)果表明,熱變性能夠穩(wěn)定LF中的β-折疊結(jié)構(gòu);同時(shí),使LF結(jié)構(gòu)更為伸展。添加5.4×10-5和1.08×10-4mol/L Cur后,LF在LF25 ℃-Cur復(fù)合物和LF90 ℃-Cur復(fù)合物中的二級(jí)結(jié)構(gòu)有不同程度的改變。其中,α-螺旋含量減少(p<0.05)。但β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)卷曲含量變化不顯著(p>0.05)。也有研究表明:Cur不能引起β-乳球蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化,這可能與Cur主要吸附在蛋白質(zhì)表面有關(guān)[12]。

2.4 傅立葉變換紅外(FTIR)光譜

圖5為L(zhǎng)F和LF-Cur復(fù)合物(Cur含量為1.08×10-4mol/L)的紅外光譜。FTIR圖譜顯示LF25 ℃-Cur亞微米顆粒與LF90 ℃-Cur納米顆粒之間存在一些明顯的結(jié)構(gòu)差異。

圖5 傅里葉變換紅外光譜

如圖5a所示,Cur在3504 cm-1有一個(gè)特征峰,來(lái)自于-H鍵的伸縮振動(dòng);在1509和1028 cm-1處有兩個(gè)特征峰,分別來(lái)自于酮基的伸縮振動(dòng)和-NH的形變[33]。1605、1435和1285 cm-1的特征峰分別來(lái)自于苯環(huán)的伸縮振動(dòng)、C-H彎曲振動(dòng)和C-O伸縮振動(dòng)[34]。在LF-Cur復(fù)合物的光譜中(圖5d與圖5e),Cur在3504、1509、1028、964和810 cm-1處的特征峰均消失,說(shuō)明Cur與LF發(fā)生了結(jié)合。Liu等[35]在研究卵白蛋白與Cur復(fù)合物時(shí)也觀察到類似的現(xiàn)象。如圖5(b～e)所示,所有復(fù)合物在3300 cm-1附近均有一個(gè)較寬的峰,這與分子間H鍵和O-H伸縮振動(dòng)有關(guān)。LF-Cur復(fù)合物與單一LF相比,3300 cm-1附近的峰型均有一定的變化,表明LF與Cur之間存在氫鍵作用[36]。該結(jié)果與文獻(xiàn)[37-38]研究結(jié)果一致,表明多酚能夠通過(guò)氫鍵部分得與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合。

天然LF在1653 cm-1處和熱變性LF在1654 cm-1處的吸收峰為酰胺Ⅰ帶的C=O伸縮振動(dòng)[39-40];如表1,LF25 ℃在1535 cm-1處和LF90 ℃在1541 cm-1處的吸收峰為酰胺Ⅱ帶的N-H彎曲振動(dòng)和C-N伸縮振動(dòng)[41-43]。C=O鍵和C-N鍵的伸縮振動(dòng)均與蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元間的氫鍵有關(guān)[44]。添加Cur(1.08×10-4mol/L)前后,LF在酰胺I帶(1600～1700 cm-1處)沒(méi)有明顯差異,但在酰胺II帶(1535 cm-1處)有明顯紅移(約4 cm-1)。LF25 ℃的酰胺II帶從1535和1450 cm-1分別紅移至1530和1444 cm-1;而LF90 ℃的酰胺II的峰從1455 cm-1藍(lán)移至1456 cm-1。上述結(jié)果表明Cur與蛋白質(zhì)亞基結(jié)構(gòu)中的C=O和C-N基團(tuán)發(fā)生了相互作用。

表1 LF與LF-Cur復(fù)合物傅里葉變換紅外光譜的峰值

2.5 Cur與天然LF和熱變性LF結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)的比較

由圖6可知,加熱處理后LF的熒光強(qiáng)度增加(約66.81%),這與熱變性使得LF兩葉依次展開(kāi),其構(gòu)象發(fā)生了不可逆的改變有關(guān)[24]。隨著Cur濃度的升高,LF的熒光強(qiáng)度逐漸減小,表明LF與Cur之間存在結(jié)合行為(圖6)。在Cur存在下,LF25 ℃和LF90 ℃的λem有明顯的藍(lán)移現(xiàn)象(LF25 ℃從346 nm藍(lán)移至337 nm,LF90 ℃從350 nm藍(lán)移至341 nm),這可能與Cur結(jié)合到LF的疏水區(qū)域有關(guān)[45]。

圖6 LF-Cur復(fù)合物熒光光譜圖

通過(guò)Stern-Volmer方程(式(1))和雙對(duì)數(shù)方程(式(2))研究了Cur與LF的結(jié)合機(jī)制(圖7)。表2總結(jié)了公式(1)和(2)的相關(guān)數(shù)據(jù)。在Stern-Volmer回歸曲線的線性范圍內(nèi),LF25 ℃和LF90 ℃的平均淬滅常數(shù)(Ksv)分別為2.69×104M-1和2.47×104M-1。有研究表明,色氨酸的τ0在2.33±0.15 ns與3.16±0.1 ns之間[46]。取τ0值3.16±0.1 ns進(jìn)行計(jì)算,得到kq值分別為8.5×1012M-1s-1和7.8×1012M-1s-1,遠(yuǎn)高于2.0×1010M-1s-1(動(dòng)態(tài)淬滅最大值)[47]。因此,LF與Cur的相互作用為靜態(tài)淬滅過(guò)程。對(duì)于靜態(tài)淬滅,雙對(duì)數(shù)Stern-Volmer方程(公式(2))可以用于分析計(jì)算LF-Cur復(fù)合物形成過(guò)程的結(jié)合常數(shù)(Ka)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n)。由表2可知,與Cur的Ka和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n)高于LF25 ℃,表明熱變性LF與Cur的結(jié)合能力較強(qiáng)。

表2 Cur與天然或熱變性LF相互作用的Stern-Volmer淬滅常數(shù)、結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)

圖7 Stern-Volmer方程(a1,a2)和雙對(duì)數(shù)方程擬合圖(b1,b2)

2.6 包埋率

表3為Cur在LF25 ℃-Cur復(fù)合物和LF90 ℃-Cur復(fù)合物的包埋率。由表3可知,與在LF25 ℃-Cur復(fù)合物中相比,Cur在LF90 ℃-Cur復(fù)合物中的包埋率顯著提高。有研究表明,蛋白質(zhì)疏水性提高有利于其與Cur結(jié)合[48]。另外,隨Cur濃度的增加,LF對(duì)Cur的包埋率均減小,其中天然LF對(duì)Cur的包埋率從41.11%±1.71%下降到13.72%±1.77%,熱變性LF對(duì)Cur的包埋率從62.40%±1.02%下降到26.01%±2.02%。Teng等[31]研究了β-乳球蛋白包埋運(yùn)載Cur,結(jié)果表明,隨著Cur濃度的增加,包埋率減小。

表3 LF-Cur復(fù)合物中Cur包埋率(%)

3 結(jié)論

LF-Cur復(fù)合物的濁度和粒徑與Cur濃度和LF結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。當(dāng)Cur濃度為(1.4～5.4)×10-5mol/L時(shí),天然LF-Cur復(fù)合物為納米顆粒,溶液濁度低;當(dāng)Cur濃度為8.1×10-5～1.08×10-4mol/L時(shí),天然LF-Cur復(fù)合物為亞微米顆粒,溶液濁度高。熱變性LF-Cur復(fù)合物均為納米顆粒,溶液濁度低。紅外光譜和圓二光譜表明,Cur能夠改變天然和熱變性LF的二級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)。熒光光譜表明,Cur與天然和熱變性LF的結(jié)合均為靜態(tài)淬滅過(guò)程,且熱變性LF與Cur的結(jié)合能力較強(qiáng),熱變性能夠提高LF對(duì)Cur的包埋率。本研究為開(kāi)發(fā)基于LF為載體運(yùn)載疏水性多酚提供了理論依據(jù)。