羅澤萍 李麗 潘立衛(wèi) 賴紅芳

摘 要 目的：研究桑寄生醇提物改善2型糖尿?。═2DM）模型小鼠血糖水平及其肝腎并發(fā)癥的作用及機(jī)制。方法：通過高糖高脂飼料喂養(yǎng)結(jié)合腹腔注射鏈脲佐菌素的方法建立小鼠T2DM模型。將T2DM模型小鼠60只隨機(jī)分為模型對(duì)照組（生理鹽水）、陽性對(duì)照組[二甲雙胍，150 mg/（kg·d）]和桑寄生醇提物高、中、低劑量組[30、15、7.5 g/（kg·d），以生藥量計(jì)]，每組12只；另設(shè)正常小鼠12只為空白對(duì)照組（生理鹽水）。連續(xù)給予小鼠相應(yīng)藥液或生理鹽水28 d后，檢測其血清中空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、白細(xì)胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-12、γ干擾素（IFN-γ）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）的水平，收集其24 h尿液并檢測尿肌酐（Ucr）水平，并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（ISI）和胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）；采用蘇木精-伊紅染色法，觀察肝細(xì)胞病理學(xué)變化；檢測肝組織中Bcl-2、Bax水平，以及腎組織中Toll樣受體4（TLR4）、核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）水平。結(jié)果：與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠的血清FBG、FINS、IL-4、ALT、AST、BUN、Scr水平及HOMA-IR值均顯著升高，Ucr、IL-2、IL-12、IFN-γ水平及ISI值均顯著降低（P<0.01）；肝組織細(xì)胞表現(xiàn)出明顯病理變化；肝組織中Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值均顯著降低，Bax水平顯著升高（P<0.01）；腎組織中TLR4、NF-κB p65水平均顯著升高（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，桑寄生醇提物各劑量組的肝組織病理學(xué)變化明顯減輕；除桑寄生醇提物低劑量組血清中IFN-γ水平和腎組織中NF-κB p65水平無顯著差異外，上述其余各指標(biāo)均顯著改善（P<0.01或P<0.05）。結(jié)論：桑寄生醇提物具有改善T2DM模型小鼠高血糖水平及肝腎并發(fā)癥、保護(hù)肝腎功能的作用；其機(jī)制可能與提高免疫功能、上調(diào)抗凋亡相關(guān)因子、下調(diào)促凋亡及促炎相關(guān)因子的表達(dá)，從而維持肝細(xì)胞功能狀態(tài)、減輕腎細(xì)胞受損程度有關(guān)。

關(guān)鍵詞 桑寄生；醇提物；2型糖尿??；并發(fā)癥；肝損傷；腎損傷；小鼠

Improvement Effects of Ethanol Extract from Taxillus sutchuenensis on Blood Glucose Level， Liver and Renal Complications in Type 2 Diabetes Mellitus Model Mice and Its Mechanism

LUO Zeping1，LI Li2，PAN Liwei1，LAI Hongfang1（1. College of Chemical and Biological Engineering， Hechi University， Guangxi Hechi 546300， China； 2. College of Pharmacy， Guangxi University of TCM， Nanning 530200， China）

ABSTRACT OBJECTIVE： To study improvement effects of ethanol extract from Taxillus sutchuenensis on blood glucose level， liver and renal complications in type 2 diabetes mellitus （T2DM） model mice and its mechanism. METHODS： T2DM model was established by high-glucose and high-fat feed combined with intraperitoneal injection of streptozotocin. Totally 60 T2DM model mice were randomly divided into model control group （normal saline）， positive control group [metformin， 150 mg/（kg·d）] and T. sutchuenensis ethanol extract high-dose， medium-dose and low-dose groups [30， 15， 7.5 g/（kg·d）， by crude drug]， with 12 mice in each group. Other 12 normal mice were included in blank control group （normal saline）. After given drug solution or normal saline for consecutive 28 d， the serum levels of FBG， FINS， IL-2， IL-4， IL-12， IFN-γ， Scr， BUN， ALT and AST were detected； 24 h urine was collected to detect the Ucr levels. The insulin sensitivity index （ISI） and insulin resistance index （HOMA-IR） were calculated. HE staining was used to observe the pathological change of hepatocytes. The levels of Bcl-2 and Bax in liver tissue as well as the levels of TLR4 and NF-κB p65 in renal tissue were detected. RESULTS： Compared with blank control group， the serum levels of FBG， FINS， IL-4， ALT， AST， BUN， Scr and HOMA-IR value were increased significantly in model control group， while the levels of Ucr， IL-2， IL-12， IFN-γ and ISI value were decreased significantly （P<0.01）. The hepatocytes showed obvious pathological changes. Bcl-2 level and Bcl-2/Bax of liver tissue were decreased significantly， while Bax level was increased significantly （P<0.01）. The levels of TLR4 and NF-κB p65 in renal tissue were increased significantly （P<0.01）. Compared with model control group， histopathological changes of liver were relieved significantly in T. sutchuenensis ethanol extract groups. Except that there was no significant difference in serum level of IFN-γ and level of NF-κB p65 in renal tissue in T. sutchuenensis ethanol extract low-dose group， other indexes were improved significantly （P<0.01 or P<0.05）. CONCLUSIONS： T. sutchuenensis ethanol extract can improve high blood glucose， liver and renal complications， and protect liver and renal function in T2DM model mice. The mechanism may be associated with improving immunofunction， up-regulating anti-apoptosis factors， down-regulating the expression of apoptosis-promoting and inflammation- promoting factors so as to maintain the functional status of hepatocytes and reduce the degree of renal cell damage.

KEYWORDS Taxillus sutchuenensis； Ethanol extract； Type 2 diabetes mellitus； Complication； Liver injury； Renal injury； Mice

2型糖尿病（T2DM）是一種以高血糖為臨床特點(diǎn)，并與遺傳、免疫功能及環(huán)境飲食因素等密切相關(guān)的內(nèi)分泌代謝性疾病。糖尿病腎病、糖尿病肝病均為其常見并發(fā)癥，且發(fā)病率在我國呈快速上升趨勢[1]。如果糖尿病并發(fā)肝腎損傷得不到有效治療，將發(fā)展為不可逆的終末期器官病變，因此對(duì)糖尿病肝腎并發(fā)癥進(jìn)行及時(shí)有效的防治非常必要。降糖化學(xué)藥種類繁多，療效較為肯定，但未能有效控制并發(fā)癥的發(fā)生，且多有毒副作用。因此，尋找安全、有效的降糖中藥是目前的臨床研究熱點(diǎn)之一。研究發(fā)現(xiàn)，采用中藥治療糖尿病可有效降低患者的并發(fā)癥發(fā)生率[2]。中藥包含多種活性成分，可通過多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多途徑干預(yù)疾病的發(fā)生、發(fā)展[3]。因此，研究和開發(fā)降糖中草藥用以降低血糖及改善糖尿病并發(fā)癥有著重要意義和廣闊前景。桑寄生[Taxillus sutchuenensis（Lecomte） Danser]為桑寄生科鈍果寄生屬植物，多寄生于桑樹、梨樹、李樹、油茶、厚皮香、核桃等植物上；其性平、味苦，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕、安胎等功效，常用于治療風(fēng)濕痹痛、腰膝酸軟、筋骨無力、崩漏經(jīng)多、妊娠漏血、胎動(dòng)不安等癥[4-5]。藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，桑寄生具有抗腫瘤、降血脂、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、治療腎病蛋白尿及尿毒癥等作用[6]。目前僅有體外降血糖研究證實(shí)，其能加速肝臟的葡萄糖代謝，同時(shí)增強(qiáng)肝細(xì)胞對(duì)胰島素的敏感性，從而降低血糖水平[7]。而有關(guān)其體內(nèi)降血糖作用及抗糖尿病并發(fā)癥的研究鮮見國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本課題組通過建立T2DM小鼠模型，考察桑寄生醇提物對(duì)模型小鼠的血糖調(diào)節(jié)作用、肝腎保護(hù)作用及機(jī)制，為其作為糖尿病及相關(guān)并發(fā)癥防治中藥的開發(fā)和利用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

AUW220D型分析天平（日本Shimadzu公司）；XL-300型全自動(dòng)生化分析儀（德國ERBA公司）；xMark型酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司）；DH-20F型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（長沙百諾克離心機(jī)儀器有限公司）； HH-S4型數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市醫(yī)療儀器廠）；BX51型通用熒光顯微鏡（日本Olympus公司）；Q-250A3型高速多功能粉碎機(jī)（上海冰都電器有限公司）；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；FD-1C-80型多歧管冷凍干燥機(jī)（北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

鏈脲佐菌素對(duì)照品（STZ，美國Sigma公司，批號(hào)：S0130，純度：≥98%）；鹽酸二甲雙胍片（北京京豐制藥集團(tuán)有限公司，批號(hào)：160943，規(guī)格：0.25 g）；葡萄糖測定試劑盒、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）測定試劑盒、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）測定試劑盒（長春匯力生物技術(shù)有限公司，批號(hào)分別為2017033、2017022、2017007）；尿素氮（BUN）測定試劑盒、肌酐測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)分別為20171218、20171216）；胰島素試劑盒、白細(xì)胞介素2（IL-2）試劑盒、IL-4試劑盒、IL-12試劑盒、γ干擾素（IFN-γ）試劑盒、Bcl-2試劑盒、Bax試劑盒、Toll樣受體4（TLR4）試劑盒、核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）試劑盒（上海優(yōu)選生物科技有限公司，均為酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒，批號(hào)均為201804）；其余試劑均為國產(chǎn)分析純或?qū)嶒?yàn)室常用規(guī)格；檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液（0.1 mol/L檸檬酸溶液-0.1 mol/L檸檬酸鈉溶液按體積比14 ∶ 11混勻制得，臨用現(xiàn)配）、生理鹽水均為實(shí)驗(yàn)室自制，水為蒸餾水。

1.3 藥材

桑寄生藥材于2017年1月購自廣西河池市中藥材市場（產(chǎn)地：廣西河池市宜州區(qū)），經(jīng)河池學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院鄧晰朝副教授鑒定為桑寄生科鈍果寄生屬植物桑寄生[Taxillus sutchuenensis（Lecomte） Danser]。

1.4 動(dòng)物

SPF級(jí)昆明小鼠100只，雌雄各半，體質(zhì)量為（20±2）g，由廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（桂）2014-0002。實(shí)驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼料購自沈陽市前民動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼料廠；膽固醇、膽酸鈉購自河南鴻鑫食品有限公司；蔗糖購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；豬油為自煉。

2 方法

2.1 桑寄生醇提物浸膏制備

取桑寄生于50 ℃烘干，粉碎成粗粉。取粗粉5 kg，依次用95%乙醇、60%乙醇室溫滲漉提取（溶劑均為50 L，每次浸提時(shí)間為10 d）。收集滲漉液，減壓回收乙醇，得乙醇提取物浸膏。浸膏冷凍干燥后，即得桑寄生醇提物（約587.4 g），于4 ℃冰箱保存，備用。

2.2 造模、分組與給藥

取小鼠88只，給予自制高糖高脂飼料（按1%膽酸鈉、2.5%膽固醇、20%蔗糖、10%豬油、66.5%基礎(chǔ)飼料進(jìn)行配比）喂養(yǎng)6周后，腹腔注射STZ溶液（以檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液為溶劑）45 mg/（kg·d），qd，連續(xù)7 d。末次注射完畢后第9天時(shí)，檢測小鼠空腹血糖（FBG）水平，當(dāng)FBG≥12 mmol/L則視為T2DM模型成功建立[8-9]。成功建模的小鼠繼續(xù)給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)4周。

取成功造模的T2DM模型小鼠60只，隨機(jī)分為模型對(duì)照組（生理鹽水）、陽性對(duì)照組[二甲雙胍，150 mg/（kg·d）]和桑寄生醇提物高、中、低劑量組[30、15、7.5 g/（kg·d），以生藥量計(jì)]，每組12只；另取正常小鼠12只作為空白對(duì)照組。各組小鼠分別灌胃給予相應(yīng)藥液或生理鹽水，灌胃體積均為0.2 mL/10 g，連續(xù)給藥28 d。其中，二甲雙胍片和“2.1”項(xiàng)下制備的桑寄生醇提物浸膏均以水制成適當(dāng)濃度的混懸藥液后灌胃；給藥劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及臨床擬用藥劑量換算所得。

2.3 血清/尿液相關(guān)指標(biāo)測定

灌胃給藥結(jié)束后，所有小鼠均禁食不禁水12 h，然后摘眼球取血并處死，立即解剖取肝臟、腎臟，用預(yù)冷（5 ℃）生理鹽水沖洗3次，于-80 ℃保存，待測。處死前1 天，采用代謝籠收集小鼠24 h尿液。按相應(yīng)試劑盒說明書操作，檢測小鼠血清中FBG、空腹胰島素（FINS）、IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ、血肌酐（Scr）、BUN、ALT、AST水平；收集24 h尿液并檢測尿肌酐（Ucr）含量。計(jì)算小鼠胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、胰島素敏感指數(shù)（ISI），計(jì)算公式分別為：HOMA-IR=FBG×FINS/22.5[10]；ISI=ln[1/（FBG×FINS）][11]。

2.4 肝組織病理學(xué)變化觀察

取“2.3”項(xiàng)下肝臟部分組織，于福爾馬林液中固定24 h 后，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片（厚度4 μm），蘇木精-伊紅（HE）染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理學(xué)變化。

2.5 肝、腎組織相關(guān)指標(biāo)測定

取“2.3”項(xiàng)下肝臟、腎臟部分組織，以預(yù)冷（5 ℃）生理鹽水制成勻漿后，按相應(yīng)試劑盒說明書操作，檢測肝組織中細(xì)胞凋亡相關(guān)因子Bcl-2、Bax的表達(dá)水平，測定腎組織中炎癥相關(guān)因子NF-κB p65、TLR4的表達(dá)水平。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 桑寄生醇提物對(duì)T2DM模型小鼠血糖和胰島素相關(guān)指標(biāo)的影響

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠的血清FBG、FINS水平及HOMA-IR值均顯著升高，ISI值顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠的血清FBG、FINS水平及HOMA-IR值均顯著降低，ISI值顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05），詳見表1（注：在28 d給藥期間，除空白對(duì)照組外其余組均有小鼠死亡，因此數(shù)量上有不同程度的減少；以下各表同）。

3.2 桑寄生醇提物對(duì)T2DM模型小鼠血清細(xì)胞因子的影響

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠血清中IL-2、IL-12、IFN-γ水平均顯著降低，IL-4水平顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠血清中IL-2、IL-12、IFN-γ水平均顯著升高，IL-4水平顯著降低，除桑寄生醇提物低劑量組的IFN-γ外，其余指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05）

3.3 桑寄生醇提物對(duì)T2DM模型小鼠肝組織病理學(xué)變化、血清中肝功能指標(biāo)及肝組織中Bcl-2、Bax水平的影響

3.3.1 肝組織病理學(xué)變化 空白對(duì)照組小鼠肝組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、分界清晰、大小均勻，細(xì)胞核完整；模型對(duì)照組小鼠肝組織出現(xiàn)大量空泡，有細(xì)胞核減少、肝細(xì)胞壞死及纖維化現(xiàn)象；陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠肝組織空泡現(xiàn)象減輕，細(xì)胞核數(shù)量增多，肝細(xì)胞壞死及纖維化現(xiàn)象較模型對(duì)照組均明顯改善。各組小鼠肝組織病理學(xué)變化顯微圖見圖1。

3.3.2 血清中肝功能指標(biāo) 與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠血清中ALT、AST水平均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠血清中ALT、AST水平均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），詳見表3。

3.3.3 肝組織中Bcl-2、Bax水平 與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠肝組織中Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值均顯著降低，Bax水平顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠肝組織中Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值均顯著升高，Bax水平均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05），詳見表3。

3.4 桑寄生醇提物對(duì)T2DM模型小鼠腎功能指標(biāo)和腎組織中TLR4、NF-κB p65水平的影響

3.4.1 腎功能指標(biāo) 與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠血清中BUN、Scr水平均顯著升高，Ucr水平顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠血清中BUN、Scr水平均顯著降低，Ucr水平均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），詳見表4。

3.4.2 腎組織中TLR4、NF-κB p65水平 與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠腎組織中TLR4、NF-κB p65水平均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組和桑寄生醇提物各劑量組小鼠腎組織中TLR4、NF-κB p65水平顯著降低，除桑寄生醇提物低劑量組的NF-κB p65之外，其余指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01或P<0.05），詳見表4。

4 討論

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)水平的提高，我國糖尿病的發(fā)病率也明顯升高，其與血糖升高及胰島素抵抗密切相關(guān)，若不及時(shí)治療可誘發(fā)機(jī)體代謝功能紊亂，最終引起嚴(yán)重的臟器及心血管損傷。二甲雙胍是臨床應(yīng)用最廣泛的降糖藥，可通過提高胰島素的敏感性來降低糖尿病患者的血糖水平，由于其無肝腎毒性、偶見消化道不良反應(yīng)、罕見乳酸中毒[12]，因此本研究以其作為陽性對(duì)照藥。結(jié)果顯示，二甲雙胍對(duì)T2DM模型小鼠表現(xiàn)出肝腎保護(hù)作用，可能與其能糾正小鼠血糖紊亂，從而減少高血糖引起肝腎并發(fā)癥的發(fā)生有關(guān)。

胰島素抵抗是指各種原因引起的胰島素促進(jìn)葡萄糖攝取和利用的能力下降，使靶器官對(duì)胰島素所產(chǎn)生的生理效應(yīng)低于正常水平，導(dǎo)致機(jī)體代償性地分泌過多胰島素而產(chǎn)生高胰島素血癥以維持血糖穩(wěn)定的現(xiàn)象[13]。其易導(dǎo)致代謝綜合征，后者是T2DM發(fā)病的主要機(jī)制和始動(dòng)因素。因此，降低血糖水平并改善其胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)是治療T2DM的重要途徑。HOMA-IR和ISI是評(píng)價(jià)胰島素抵抗的兩個(gè)重要指標(biāo)，當(dāng)胰島素抵抗發(fā)生時(shí)，HOMA-IR值升高、ISI值降低[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，桑寄生醇提物能明顯降低T2DM模型小鼠的FBG、FINS水平及HOMA-IR值，升高ISI值，表明其具有明顯的降血糖、提高胰島素敏感性及改善胰島素抵抗的作用。

T2DM患者同時(shí)伴有明顯的細(xì)胞免疫或體液免疫異常，Th1值及Th1/Th2比值異常降低是其主要表現(xiàn)。Th細(xì)胞也叫輔助性T細(xì)胞，主要分為Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞：前者的減少會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降，引起高血糖的發(fā)生；后者的增加將導(dǎo)致胰島B細(xì)胞分泌功能下降，使胰島素分泌不足，影響機(jī)體血糖調(diào)節(jié)功能[14]。IFN-γ、IL-2、IL-12等均為Th1細(xì)胞分泌的炎癥因子，IL-4則為Th2細(xì)胞分泌的炎癥因子[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，桑寄生醇提物能顯著升高T2DM模型小鼠血清中IL-2、IL-12、INF-γ水平，降低IL-4水平，提示其能提高小鼠免疫功能。

ALT、AST主要存在于肝細(xì)胞中，當(dāng)肝臟受到損傷或者出現(xiàn)功能障礙時(shí)，會(huì)釋放入血，導(dǎo)致其血清水平升高[15]，因此常用于評(píng)價(jià)肝功能。Bcl-2、Bax作為細(xì)胞凋亡因子，分別發(fā)揮抗凋亡和促凋亡作用，兩者的平衡決定著細(xì)胞是否會(huì)發(fā)生凋亡[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，桑寄生醇提物能改善T2DM模型小鼠肝細(xì)胞空泡、壞死及纖維化等病理癥狀，顯著降低其血清中ALT、AST水平，同時(shí)能顯著升高其肝組織中Bcl-2水平及Bcl-2/Bax比值、降低Bax水平，表明該醇提物對(duì)模型小鼠的肝功能損傷具有一定保護(hù)作用，且這一作用與上調(diào)抗凋亡相關(guān)因子、下調(diào)促凋亡相關(guān)因子從而維護(hù)肝細(xì)胞功能狀態(tài)有關(guān)。

BUN是血漿中除蛋白質(zhì)以外的另一種含氮化合物，Scr是肌肉在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，兩者均主要由腎小球?yàn)V過排出體外。根據(jù)BUN、Scr、Ucr水平的變化可判斷腎小球功能的受損害程度：在腎功能不全失代償期，血清中BUN、Scr水平會(huì)上升，尿Ucr水平會(huì)下降，表明有害毒素在體內(nèi)蓄積[17]。在高血糖狀態(tài)下，TLR4作為機(jī)體炎性反應(yīng)鏈的啟動(dòng)蛋白，會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生從而導(dǎo)致細(xì)胞受損、凋亡及功能障礙[18]；NF-κB是一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，包括5個(gè)亞單位（Rel、p65、RelB、p50、p52），其與糖尿病患者胰島細(xì)胞的增殖和凋亡關(guān)系密切，其中p65蛋白作為NF-кB通路蛋白家族的重要組成，能加速炎癥因子的表達(dá)[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，桑寄生醇提物能顯著降低T2DM模型小鼠血清BUN、Scr水平，升高尿Ucr水平，同時(shí)能顯著降低腎組織中TLR4、NF-κB p65的水平，表明其對(duì)模型小鼠的腎功能損傷具有一定保護(hù)作用，且這一作用與下調(diào)促炎相關(guān)因子的表達(dá)從而減輕腎細(xì)胞受損程度有關(guān)。

綜上所述，桑寄生提取物具有改善T2DM模型小鼠的血糖水平、胰島素抵抗、肝腎并發(fā)癥及保護(hù)肝腎功能的作用；其機(jī)制可能與提高小鼠免疫功能、上調(diào)抗凋亡相關(guān)因子、下調(diào)促凋亡及促炎相關(guān)因子的表達(dá)，從而維護(hù)肝細(xì)胞功能狀態(tài)、減輕腎細(xì)胞受損程度有關(guān)。

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（收稿日期：2018-10-04 修回日期：2019-01-23）

（編輯：段思怡）