孫靜　趙榮華　毛鑫　郭姍姍　高英杰　姚榮妹　董秀　吳昌標(biāo)　崔曉蘭

摘要?目的：探討開喉劍噴霧劑治療急性咽炎的最佳用法用量，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法：選取10%氨水咽部噴霧及乙型溶血性鏈球菌菌液感染2種方法造成大鼠急性咽炎模型，設(shè)置4～10噴/次，6～10次/d，共12個(gè)給藥組，評(píng)價(jià)開喉劍噴霧劑的最佳用法用量。結(jié)果：開喉劍噴霧劑各給藥組均可不同程度減輕大鼠咽部肉眼病變及鏡下組織病變，藥效穩(wěn)定劑量范圍為6～10噴/次、8～10次/d。結(jié)論：開喉劍噴霧劑治療大鼠急性咽炎模型的最佳劑量范圍為6～10噴/次、8～10次/d。

關(guān)鍵詞?開喉劍噴霧劑;急性咽炎;乙型溶血性鏈球菌;用法用量;大鼠

Study on the Usage and Dosage of Kaihoujian Spray in the Treatment of Acute Pharyngitis

Sun Jing1，Zhao Ronghua1，Mao Xin1，Guo Shanshan1，Gao Yingjie1，Yao Rongmei1，Dong Xiu2，Wu Changbiao2，Cui Xiaolan1

（1 Biosecurity laboratory，Institute of Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China; 2 Guizhou Sanli Pharmaceutical Co. LTD，Anshun 215001，China）

Abstract?Objective：To explore optimum usage and dosage of Kaihoujian Spray treating acute pharyngitis and provide references for clinical use. Methods：A total of 12 groups were given Kaihoujian Spray with 4-10 sprays/times，6-10 times/day，then evaluated the best usage and dosage of Kaihoujian Spray on rat acute pharyngitis model induced by 10% ammonia liquor by throat spray and hemolytic streptococcal type B by infection. Results：All the 12 treatments could alleviate the pharyngeal naked-eye and microscopic lesions in rats and the stable dose range was 6-10 sprays/times，8-10 times/day. Conclusion：The best dose range of Kaihoujian Spray in the treatment of acute pharyngitis in rats was 6～10 sprays/times，8～10 times/day.

Key Words?Kaihoujian Spray; Acute pharyngitis; Hemolytic streptococcal type B; Usage and dosage; Rats

中圖分類號(hào)：R289.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.03.012

藥品說(shuō)明書是指導(dǎo)醫(yī)師開具處方和患者用藥的具有法律效力的文本，是藥物最基本和重要的信息來(lái)源，也是保障用藥安全的主要依據(jù)[1-2]，但部分現(xiàn)行藥品說(shuō)明書仍存在用法用量不明確，文字表述不規(guī)范等問(wèn)題，給臨床用藥帶來(lái)諸多不便，也難以保證用藥的安全性和有效性。開喉劍噴霧劑為已上市品種，功能主治為清熱解毒，消腫止痛?，F(xiàn)有說(shuō)明書中用法用量為“噴患處，每次適量，一日數(shù)次”。本研究探討開喉劍噴霧劑治療急性咽炎的最佳有效劑量范圍，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料

1.1.1?動(dòng)物?選取SD大鼠160只，SPF級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量（200±10）g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物許可證：SCXK（京）2016-0011。實(shí)驗(yàn)中所有操作均遵循NIH及北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)的規(guī)定。

1.1.2?藥物?開喉劍噴霧劑（貴州三力制藥股份有限公司，批號(hào)：20170202）;開喉劍噴霧劑賦形劑（貴州三力制藥股份有限公司，批號(hào)：20170202）;復(fù)方一枝黃花噴霧劑（貴州百靈企業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)：20170230）;阿莫西林膠囊（昆明貝克諾頓制藥有限公司，批號(hào)：160518）。

1.1.3?試劑與儀器?營(yíng)養(yǎng)肉湯（北京奧博星生物技術(shù)公司，批號(hào)：02-013）;水合氯醛（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20161130）;氨水（北京市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20161102）。乙型溶血性鏈球菌，購(gòu)自美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)生物品收藏中心（ATCC），本實(shí)驗(yàn)室傳代，-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

A2型生物安全柜（Thromo）;AR1140型電子分析天平（OhausCorp.Brock.WJ.美國(guó)）;BSA3202S-CW電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）;HZQ-F160恒溫震蕩培養(yǎng)箱（哈爾濱市冬聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司）;開喉劍咽喉噴霧器（貴州三力制藥股份有限公司）。

1.2?方法

1.2.1?分組與模型制備（開喉劍噴霧劑對(duì)氨水致成年大鼠急性咽炎模型的影響）?將SD大鼠160只并按體質(zhì)量分為16組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿莫西林組、復(fù)方一枝黃花組及開喉劍噴霧劑4噴/次×6次/d、6噴/次×6次/d、8噴/次×6次/d、10噴/次×6次/d、4噴/次×8次/d、6噴/次×8次/d、8噴/次×8次/d、10噴/次×8次/d、4噴/次×10次/d、6噴/次×10次/d、8噴/次×10次/d、10噴/次×10次/d，共12個(gè)給藥組。將大鼠口腔擴(kuò)開，除正常對(duì)照組外，其余各組用開喉劍噴霧器將10%氨水噴于動(dòng)物咽部，每次1噴（每噴約0.1 mL），1次/d，連續(xù)3 d，造成急性咽炎模型，正常對(duì)照組在同等條件下噴蒸餾水[3-4]。

分組與模型制備（開喉劍噴霧劑對(duì)乙型溶血性鏈球菌致成年大鼠急性咽炎模型的影響）：將SD大鼠160只按體質(zhì)量分為16組，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿莫西林組、復(fù)方一枝黃花組及開喉劍噴霧劑6次×4噴組、6次×6噴組、6次×8噴組、6次×10噴組、8次×4噴組、8次×6噴組、8次×8噴組、8次×10噴組、10次×4噴組、10次×6噴組、10次×8噴組、10次×10噴組，共12個(gè)給藥組。大鼠水合氯醛麻醉后，除正常對(duì)照組外，使用滅菌鑷子翻開大鼠口腔，暴露上頜黏膜，用注射器將吸有1×1012 cfu/mL濃度乙型溶血性鏈球菌菌液水平方向點(diǎn)刺鼻咽部黏膜，并注射菌液，操作程度以略有點(diǎn)狀出血為止，每只0.1 mL，連續(xù)感染2 d，正常對(duì)照組在同等條件下注射生理鹽水[6]。

1.2.2?給藥方法（開喉劍噴霧劑對(duì)氨水致成年大鼠急性咽炎模型的影響）?在試驗(yàn)前將4、6、8、10噴藥量用賦形劑配制成4個(gè)濃度，于第4天各給藥組開始咽喉部噴霧給藥，大鼠按平均體質(zhì)量100 μL/（只·次）（1噴/次）給藥，每天按要求分別給藥6～10次，連續(xù)3 d，正常對(duì)照組及模型對(duì)照組在同等條件下噴賦形劑。

給藥方法（開喉劍噴霧劑對(duì)乙型溶血性鏈球菌致成年大鼠急性咽炎模型的影響）：在試驗(yàn)前將4、6、8、10噴藥量用賦形劑配制成4個(gè)濃度，于第3天各給藥組開始咽喉部噴霧給藥，大鼠按平均體質(zhì)量100 μL/（只·次）（1噴/次）給藥，每天按要求分別給藥6～10次，連續(xù)3 d，正常對(duì)照組及模型對(duì)照組在同等條件下噴賦形劑。

1.2.3?檢測(cè)指標(biāo)與方法（開喉劍噴霧劑對(duì)氨水致成年大鼠急性咽炎模型的影響）?第7天肉眼觀察各組大鼠咽部情況，并按下述評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)記錄：積分0：咽部色澤正常、無(wú)腫脹、充血;積分1：咽部腫脹，無(wú)充血;積分2：咽部腫脹，部分充血;積分3：頻繁搔抓口部，飲水，并出現(xiàn)咽部充血、腫脹，黏膜呈鮮紅色[5]。

檢測(cè)指標(biāo)與方法（開喉劍噴霧劑對(duì)乙型溶血性鏈球菌致成年大鼠急性咽炎模型的影響）：第6天解剖動(dòng)物，取大鼠咽部組織固定于10%甲醛溶液中，24 h后取出，流水沖洗，梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅（HE）染色后，光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠咽部組織病變情況。鏡下病理判斷標(biāo)準(zhǔn)：“-”：咽部黏膜上皮未見(jiàn)增生，黏膜下組織未見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腺體未見(jiàn)有水腫，結(jié)構(gòu)正常?！?”：咽部黏膜上皮未見(jiàn)有明顯增生，黏膜下組織有局限性腫脹，有輕度炎性浸潤(rùn)?！?+”：咽部黏膜上皮有節(jié)段性增生，黏膜下組織有輕度水腫，炎性浸潤(rùn)明顯?！?++”：咽部黏膜上皮有明顯增生，黏膜下組織有炎性水腫，黏液腺有輕度增生?！?+++”：咽部黏膜上皮增生明顯，黏膜下組織有炎性水腫，病變較彌漫。腺體有壞死，腺細(xì)胞核脫落。

1.3?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?開喉劍噴霧劑對(duì)氨水致成年大鼠急性咽炎模型的影響

大鼠造模后，連續(xù)給藥3 d，于第7天觀察大鼠咽部情況。結(jié)果顯示正常對(duì)照組大鼠咽部色澤正常、無(wú)腫脹、充血;模型對(duì)照組大鼠頻繁搔抓口部，飲水，并出現(xiàn)咽部充血、腫脹，黏膜呈鮮紅色;各給藥組動(dòng)物咽部充血、腫脹均有不同程度減輕。模型對(duì)照組大鼠肉眼觀察咽部病變積分明顯增加，與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;開喉劍噴霧劑6～10噴/次，8～10次/d給藥組咽部病變積分情況明顯減輕，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2?開喉劍噴霧劑對(duì)乙型溶血性鏈球菌致成年大鼠急性咽炎模型的影響

大鼠咽部組織HE染色結(jié)果顯示，正常對(duì)照組大鼠咽部黏膜上皮未見(jiàn)增生，黏膜下組織未見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腺體未見(jiàn)有水腫，結(jié)構(gòu)正常。模型對(duì)照組大鼠咽部黏膜上皮有不同程度增生，黏膜下組織有炎性水腫，黏液腺有輕度增生。各給藥組大鼠咽部充血及炎性增生均有不同程度減輕。見(jiàn)圖1。模型對(duì)照組大鼠鏡下觀察咽部組織病變分級(jí)明顯增加，與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;開喉劍噴霧劑6～10噴/次，6～10次/d給藥組咽部病變積分情況明顯減輕，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3?討論

根據(jù)國(guó)家藥品不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)中心統(tǒng)計(jì)，我國(guó)不合理用藥情況十分嚴(yán)重，每年至少有250萬(wàn)人因藥物不良反應(yīng)入院[7]。因此，推動(dòng)合理用藥，避免和減少藥物不良反應(yīng)，是關(guān)系公眾健康、減少醫(yī)藥資源浪費(fèi)的重要內(nèi)容。合理用藥包括正確的選擇藥物、正確的用法用量、正確的給藥途徑、正確的療程、正確的治療終點(diǎn)5個(gè)方面。其中科學(xué)、全面的藥品說(shuō)明書是合理用藥的重要途徑。根據(jù)美國(guó)FDA調(diào)查，美國(guó)每天都有一名患者死于用藥錯(cuò)誤，而有一半的用藥錯(cuò)誤與說(shuō)明書有關(guān)[8]。每一種藥品都配有相應(yīng)的專業(yè)說(shuō)明書介紹其適應(yīng)證及用法用量，并需要在一定的專業(yè)知識(shí)指導(dǎo)下使用。因此，藥品說(shuō)明書內(nèi)容的科學(xué)性和準(zhǔn)確性對(duì)臨床合理用藥起著至關(guān)重要的作用。然而許多藥品特別是中成藥說(shuō)明書仍存在用法用量標(biāo)注不明確，導(dǎo)致發(fā)生長(zhǎng)期用藥、超劑量用藥等不合理用藥現(xiàn)象[9-10]。

開喉劍噴霧劑功能主治為清熱解毒，消腫止痛，用于肺胃蘊(yùn)熱所致的咽喉腫痛，口干、口苦，牙齦腫痛以及口腔潰瘍，復(fù)發(fā)性口瘡見(jiàn)上述證候者，是臨床上治療各種原因引起的急性咽炎的常用藥[11]。但開喉劍噴霧劑說(shuō)明書標(biāo)注的用法用量為“噴患處，每次適量，一日數(shù)次”，表述不夠科學(xué)準(zhǔn)確，給醫(yī)患雙方用藥均造成諸多不便。因此本研究通過(guò)化學(xué)刺激及病原菌感染2種方法建立大鼠急性咽炎模型，探討開喉劍噴霧劑的最佳有效劑量范圍，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。開喉劍噴霧劑臨床常用劑量為6～8噴/次，6～8次/d。本研究擴(kuò)展給藥范圍為4～10噴/次，6～10次/d，共12個(gè)給藥組。

急性咽炎是一種臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病，臨床上理化刺激如氣候劇變、粉塵、煙霧等是其致病因素之一[12-13]。故本試驗(yàn)采用咽部噴霧濃氨水造成大鼠急性咽炎模型，造模后，各組大鼠均出現(xiàn)頻繁搔抓口部，飲水增加，咽部充血、腫脹等現(xiàn)象，造模第3天表現(xiàn)最為明顯。連續(xù)給藥3 d后，開喉劍噴霧劑6噴/次×8次/d、開喉劍噴霧劑8噴/次×8次/d、6噴/次×10次/d、8噴/次×10次/d 4個(gè)給藥組的大鼠咽部病變積分情況明顯減輕，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

另外，病原菌（包括乙型溶血性鏈球菌和金黃色葡萄球菌等）感染也是臨床上急性咽炎的重要發(fā)病原因之一[14-15]。因此本研究采用乙型溶血性鏈球菌點(diǎn)刺大鼠鼻咽部黏膜，并注射菌液建立病原菌感染型大鼠急性咽炎模型。連續(xù)給藥3 d后，取大鼠咽部組織進(jìn)行HE染色，病理結(jié)果顯示，各給藥組大鼠咽部組織充血及炎性增生均有不同程度減輕。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，開喉劍噴霧劑6噴/次×6次/d、8噴/次×6次/d、10噴/次×6次/d、4噴/次×8次/d、6噴/次×8次/d、8噴/次×8次/d、10噴/次×8次/d、6噴/次×10次/d、8噴/次×10次/d、10噴/次×10次/d 10個(gè)給藥組大鼠咽部病變積分情況明顯減輕，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

總之，開喉劍噴霧劑產(chǎn)生穩(wěn)定藥效的用法用量范圍在6～10噴/次、8～10次/d之間，結(jié)合臨床應(yīng)用反饋，建議臨床應(yīng)用劑量6～8噴/次、8～10次/d。

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