穆國冬 任銳 盧松巖 張忠湛 王晉
摘 要 豬繁殖和呼吸綜合征(PRRSV)作為一種免疫抑制性疾病,與豬繁殖和呼吸綜合征病毒有關,臨床癥狀主要表現(xiàn)為懷孕母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎以及仔豬、育肥豬的呼吸道疾病為主。豬一旦感染這種疾病,組織病理學變化會體現(xiàn)在器官上,如肺臟、淋巴結等,急性PRRS的表現(xiàn)主要是敗血癥;全身性巨噬細胞與血管內(nèi)皮細胞存在活化、腫大、增生的情況,具有間質(zhì)性肺炎,廣泛性微循環(huán)障礙與非化膿性腦炎。
關鍵詞 高致病性豬繁殖;呼吸綜合征;病理學;研究思路
本次研究通過系統(tǒng)性的研究確診自然感染HP-PRRSV的臨床病理,對其發(fā)病特點、抗原分布、病理組織學變化、組織超微病理變化等,從而能夠準確掌握疾病特點,便于更好的預防、治療疾病[1]。
1 材料與方法
1.1 材料
病豬:選擇通過血清學檢測、RT-TRC檢測為陽性的自然感染HP-PRRSV臨床病例。
檢測試劑:2.5%戊二醛、10%中性福爾馬林。
染色液:DAB、伊紅、蘇木素。
其他試劑:酒精、抗體稀釋液、二甲苯、樹脂等。
主要儀器:切片機、顯微鏡、數(shù)碼相機、烤片機、電熱恒溫培養(yǎng)箱、PAP筆、防脫磨砂載玻片。
1.2 方法
首先開展流行病學與臨床癥狀調(diào)查,然后開展病理學檢查,采用常規(guī)方法剖檢尸體,將眼觀病變認真記錄下來,采集各臟器會在10%中性福爾馬林溶液中固定,使用常規(guī)石蠟進行包埋紙片處理。HE染色、免疫組化染色,在光學顯微鏡下認真觀察:取1mm3組織在2.5%戊二醛溶液中立即固定,送到農(nóng)業(yè)科學院原子所制作電鏡超薄片,并進行觀察[2]。
2 結果
2.1 流行病學調(diào)查
肥豬(30-50kg)的發(fā)生率超過50%,病死率超過80%,病程在5-15天之間;母豬流產(chǎn)率為10%,主要是臨產(chǎn),流產(chǎn)也會出現(xiàn)在懷孕早期,一般80天,且經(jīng)產(chǎn)與初產(chǎn)母豬在產(chǎn)仔后的死亡率為3%左右。公豬出現(xiàn)呼吸道癥狀的可能性為10%,如咳嗽,成年公豬的死亡率幾乎為零。仔豬開始發(fā)病多在10日齡左右,斷奶后到50日齡比較容易發(fā)病,發(fā)生率超過70%,死亡率高達90%以上[3]。
2.2 臨床癥狀
病初體溫會迅速升高到41℃,精神沉郁,會極大的減少采食量,呼吸不佳、皮膚大面積發(fā)功,紫紅色斑塊或丘疹會出現(xiàn)在腹部、四肢末梢等處皮膚,存在眼結膜炎,后肢很難站立,且伴有一系列精神癥狀,如抽搐等。該病在臨床上具有很高的死亡率,超過50%,尤其是仔豬;少數(shù)母豬在懷孕后期會出現(xiàn)流產(chǎn)、弱仔、死胎的情況;該病具有很強的傳染性,可長時間流行,通常遷延數(shù)月后也不能有效好轉,經(jīng)常規(guī)治療很難取得理想效果。
2.3 病理剖檢變化
頜下與腹股溝淋巴結存在腫大的情況,被膜及其以下的外觀呈大理石樣,顏色為暗紅色、深層灰白色淋巴組織相間;腸系膜淋巴結存在腫大的情況、呈明顯的紅褐色。脾臟背側會突起紅色的丘疹狀,邊緣梗死呈暗紅色;肺部存在灶性暗紅色實變,主要表現(xiàn)為出血、淤血、心葉、尖葉;腦出血、淤血、滲出膠凍樣物質(zhì);心衰、心肌出血、心冠脂膠凍樣變性可見;膽囊壁水腫增厚膽囊黏膜存在出血、充血的情況;腎表面與切面出血點如同針尖大小,外觀與麻雀蛋十分相似;少數(shù)豬會出現(xiàn)蒼白色的扁桃體,腹腔內(nèi)會滲出纖維素性,胃腸道出血、充血,同時存在其他病變,如纖維素性關節(jié)炎等[4]。
2.4 病理組織學變化
肺臟病變以間質(zhì)性支氣管肺炎為主,細支氣管黏膜上皮存在增生的情況且具有褶皺,肺泡壁、支氣管、小葉間隔、小動脈周圍間質(zhì)增生,且聚集了大量巨噬、淋巴細胞、葉間靜脈與肺泡壁毛細血管內(nèi)含有大量紅細胞,肺泡壁增厚,少量脫落的上皮、炎性細胞會出現(xiàn)在肺泡腔內(nèi)。病灶周圍的肺小葉呈明顯的氣腫狀。
淋巴結:淋巴小結中細胞在皮質(zhì)內(nèi)會出現(xiàn)變形壞死額情況,會破壞固有結構,模糊的淋巴結皮髓質(zhì)界限,細胞松散的排列。淋巴竇擴張,髓質(zhì)內(nèi)毛細血管存在明顯的淤血充血。
脾臟:能夠有效分辨小梁,模糊的脾小體輪廓,淋巴與網(wǎng)狀細胞面臨崩解、破碎的情況,紅細胞蓄積、巨噬細胞增生的情況可發(fā)生在白髓、紅髓中。
肝:細胞核濃縮、破裂,肝索不能整齊的排列,中央靜脈、肝竇狀隙存在擴張的情況且所瘀積的紅細胞較多,淋巴細胞、單核巨噬細胞浸潤的情況比較少。
大腦:會出現(xiàn)非化膿性腦炎病變,大量紅細胞在血管內(nèi)蓄積,血管周圍環(huán)繞著2-3層淋巴細胞且呈袖套情況,神經(jīng)元變性壞死、膠質(zhì)細胞增生[5]。
另外,在肝、腎臟、腸道均存在不同程度的病變,而在顯微鏡下心肌與其他器官上未發(fā)現(xiàn)明顯病變。
3 討論
因PRRSV會造成免疫抑制,臨床上與其他病原體出現(xiàn)繼發(fā)或混合感染的可能性較大,由此會加重病理變化。經(jīng)過觀察病理組織學發(fā)現(xiàn)病豬存在嚴重的全身、脾臟淋巴結組織壞死,會極大的減少淋巴濾泡、生發(fā)中心與淋巴細胞,增加單核-巨噬細胞,說明機體免疫機能較低,誘發(fā)其他疾病繼發(fā)感染的可能性較大。通過切片發(fā)現(xiàn)其他器官也具有血液循環(huán)障礙的情況,如肝腦腎肺等,實質(zhì)細胞存在變性壞死的情況,可見該病會嚴重損傷組織,因臟器功能衰竭病豬極易死亡。
參考文獻:
[1]劉曉東,郝堯光,王宗升,王輝之,范根成,杜元釗,董雅琴,高豐.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗(TJM-F92株)安全性調(diào)查及有效性和干擾性試驗[J].中國動物檢疫,2019,36(07):62-67.
[2]王彩霞,王海云,黃慧輝,魯立柱,黃炯.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒體外抗體依賴增強作用的初步研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2019(10):85-86+177.
[3]徐錚,周吉培,申翰欽,劉相聰,于林洋,董建國,張樂宜,劉燕玲,王磊,梁鵬帥,宋長緒.2016-2017年廣東地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分子檢測及NSP2、ORF5基因變異分析[J].中國獸醫(yī)雜志,2019,55(04):25-30+34.
[4]蘇瑋瑋,趙攀攀,夏銘崎,丁赫楠,張秀華,張樹成,王煒.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(TJM-F92株)微載體懸浮培養(yǎng)疫苗比較研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2019(07):108-112+170.
[5]熊俊垚,趙款,于芳,楊勇博,田志軍,蔡雪輝,安同慶.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒3-UTR堿基缺失對病毒復制影響的初步研究[J/OL].中國預防獸醫(yī)學報,2019(06):1-6