甘昌勝，王珊珊，李 鴻，蔡坤良

（合肥工業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，農(nóng)產(chǎn)品生物化工教育部工程研究中心，安徽 合肥230009）

疲勞是涉及許多生理生化因素的綜合性生理過(guò)程，是機(jī)體體力或腦力活動(dòng)達(dá)到一定階段時(shí)出現(xiàn)的正常生理現(xiàn)象。但若疲勞長(zhǎng)時(shí)間得不到有效緩解，會(huì)對(duì)肌體產(chǎn)生一系列傷害，甚至導(dǎo)致器質(zhì)性疾病，威脅人類健康。

紅景天作為我國(guó)傳統(tǒng)的藏藥，藥用歷史悠久，常生長(zhǎng)在高寒缺氧地帶[1]，可在極其惡劣多變的自然環(huán)境中生長(zhǎng)，造就了其獨(dú)特的抗輻射、耐缺氧、抗疲勞、延緩人體衰老等功效，被譽(yù)為“高原人參”[2-5]。目前，紅景天的抗疲勞活性已有一些報(bào)道，筆者也對(duì)紅景天的活性成分及其提取物的抗疲勞活性進(jìn)行了系列研究，表明具有較強(qiáng)的抗疲勞效果。

疲勞是一個(gè)受多重因素影響的復(fù)雜過(guò)程，中藥單體一般作用比較單一，難以達(dá)到綜合調(diào)理的效果，而且，紅景天作為一種名貴珍稀藥用植物，成本高，藥價(jià)貴，適用群體有限。關(guān)于單味中藥的實(shí)驗(yàn)報(bào)道較多見(jiàn)，檢索了在文獻(xiàn)中經(jīng)常出現(xiàn)的具有抗疲勞活性的中藥，發(fā)現(xiàn)多以滋補(bǔ)類中藥為主，其中，補(bǔ)氣的有人參、刺五加、紅景天、靈芝、枸杞、五味子、黃精、大棗、黃芪、何首烏、絞股藍(lán)等，補(bǔ)血活血的有三七、當(dāng)歸、阿膠、丹參等，還有補(bǔ)腎陽(yáng)的中藥，如淫羊藿、巴戟天、肉蓯蓉、鹿茸等。作為中醫(yī)藥的一大特色，中藥復(fù)方能夠從不同側(cè)面促進(jìn)疲勞的緩解，綜合調(diào)理，以有機(jī)的整體來(lái)認(rèn)識(shí)人與疲勞的關(guān)系，注重疲勞產(chǎn)生的綜合性和復(fù)雜性，調(diào)補(bǔ)相結(jié)合，使機(jī)體達(dá)到新的平衡，從而消除疲勞，恢復(fù)體力，具有其他單方或單味中藥無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)[6-8]。

本研究從補(bǔ)氣和補(bǔ)血活血入手，輔以補(bǔ)腎陽(yáng)，從上述常用的抗疲勞中藥中選擇了枸杞、黃精、五味子、當(dāng)歸和肉蓯蓉，整體組方性平，久服不會(huì)燥熱上火，且大多為藥食同源的植物資源，即使長(zhǎng)期服用，安全性也很高。論文在前期紅景天抗疲勞功能的基礎(chǔ)上，添加這幾味中藥復(fù)配組成復(fù)方，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，研究復(fù)方對(duì)抗疲勞活性的增強(qiáng)效果，并進(jìn)一步研究與運(yùn)動(dòng)小鼠的能量代謝密切相關(guān)的幾種酶活性的變化，探討抗疲勞機(jī)制，為保健品開發(fā)提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

大花紅景天（Rhodiola crenulata）根，西藏林芝；當(dāng)歸 （Angelica sinensis），甘肅岷縣；多花黃精（Polygonatum cyrtonemaHua）， 安徽霍山； 枸杞（Lycium barbarumL.），寧夏中寧；肉蓯蓉（Cistanche deserticolaY.C.Ma），內(nèi)蒙古阿拉善；北五味子（Schisandra chinensis（Turcz.） Baill），河北承德。 中藥材均購(gòu)自合肥大藥房。生化測(cè)試試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。色譜純乙腈、甲醇，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；水為超純水；其余試劑均為分析純，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

UV-1600型紫外分光光度計(jì)，北京瑞利分析儀器公司；FW177型中草藥粉碎機(jī)，天津市泰斯特儀器有限公司；1260型高效液相色譜儀，美國(guó)安捷倫公司；RE52CS-1型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠。

健康雄性昆明種小鼠，體質(zhì)量20.0±2.0 g，購(gòu)于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，同室分籠飼養(yǎng)一周，環(huán)境溫度控制在25±2℃，光照12/24 h。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 復(fù)方中各味中藥材浸膏的制備 1）紅景天浸膏的制備。稱取10 g已粉碎的大花紅景天粉末，按照前期已優(yōu)化出的提取條件，70%乙醇、料液比1∶15、75℃提取3 h。減壓過(guò)濾，收集濾液，減壓濃縮，回收乙醇，得紅景天浸膏。

2）五味子浸膏的制備[9]。稱取20 g粉碎后的五味子，選擇 70%乙醇、料液比 1∶10、75 ℃提取 2 h，減壓過(guò)濾，收集濾液；濾渣在同前的條件下再提取一次，合并兩次收集的濾液，減壓濃縮，得五味子浸膏。

3）枸杞浸膏的制備[10]。稱取5g粉碎后的枸杞，加入20倍體積的水，80℃提取2h。減壓過(guò)濾，收集濾液，減壓濃縮，得枸杞浸膏。

4）黃精浸膏的制備[11]。稱取10 g黃精，粉碎，加入15倍體積水，90℃提取2 h。收集濾液，減壓濃縮，得黃精浸膏。

5）肉蓯蓉浸膏的制備[12]。稱取10 g肉蓯蓉，選擇60%乙醇、料液比1∶15、80℃提取2 h，提取2次。合并濾液，減壓濃縮，回收乙醇，得肉蓯蓉浸膏。

6）當(dāng)歸浸膏的制備[13]。稱取10 g粉碎后的當(dāng)歸粉末，加入10倍量水，80℃提取2次，第一次3 h，第二次2 h。合并濾液，濾液旋蒸濃縮，得當(dāng)歸浸膏。

1.2.2 復(fù)方中各味中藥活性成分含量的測(cè)定 據(jù)2010版《中國(guó)藥典》，紅景天中的紅景天苷、五味子中的五味子醇甲、枸杞子和黃精中的多糖、肉蓯蓉中的松果菊苷、當(dāng)歸中的阿魏酸是其主要的代表性活性成分。其中紅景天苷、五味子醇甲、松果菊苷、阿魏酸采用HPLC檢測(cè)[9-16]，枸杞多糖和黃精多糖含量由苯酚硫酸法測(cè)定[14]。

1）紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。HPLC條件。流動(dòng)相：甲醇∶水=20∶80，檢測(cè)波長(zhǎng)：275 nm，柱溫：30 ℃，進(jìn)樣量：10 μL；流速：1.00 mL/min。 分別配制質(zhì)量濃度 為 0.057 8、0.115 6、0.231 2、0.578、1.156、1.734mg/mL的紅景天苷甲醇溶液，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程：

2）五味子醇甲標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。HPLC條件。流動(dòng)相：甲醇∶水=65∶35，檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm，柱溫：30℃，進(jìn)樣量：10 μL。 配制質(zhì)量濃度為 0.010 3、0.031、0.051 5、0.103、0.152、0.206、0.31 mg/mL 的溶液，進(jìn)樣檢測(cè)，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程：y=2197 9x+23.604（R2=0.999 7）。

3）松果菊苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。HPLC條件。流動(dòng)相：26.5（甲醇）∶73.5（0.1%甲酸溶液），梯度洗脫 0～17 min；29.5∶70.5，17～27 min。 檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；流速：1.0 mL/min。 配制質(zhì)量濃度為 0.025、0.05、0.1、0.2 和 0.4 mg/mL 的松果菊苷溶液，進(jìn)樣檢測(cè)，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程：y=1 328.7x+25.385（R2=0.999 9）。

4）阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。HPLC條件。流動(dòng)相：乙腈∶水=17∶83；檢測(cè)波長(zhǎng)：316 nm；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：35℃。配制質(zhì)量濃度為 0.025 9、0.051 8、0.077 8、0.103 7、0.129 6、0.259 2、0.388 8、0.518 4mg/mL的阿魏酸甲醇溶液。在設(shè)定的色譜條件下進(jìn)行分析，以阿魏酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得回歸方程：y=32 790x+430.13（R2=0.998 2）。

5）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。配制質(zhì)量濃度為5、20、35、50、65 μg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。 分別吸取2.0 mL上述不同質(zhì)量濃度的葡萄糖溶液，置于20 mL試管中，每支試管中加入1.00 mL 5%的苯酚，搖勻后緩慢滴加5.00 mL的濃硫酸。搖勻，靜置20 min，蒸餾水作空白對(duì)照，在486 nm處測(cè)定各管吸光度。測(cè)量結(jié)果對(duì)葡萄糖質(zhì)量濃度做線性回歸，回歸方程為y=0.013 7x+0.081 9（R2=0.999 7）。

1.2.3 復(fù)方設(shè)計(jì) 將制得的各味中藥浸膏，加水定容至100 mL，得到各味中藥的水溶液，配方以水溶液的體積進(jìn)行配比。所有配方中含有的生藥材總量都是4 g，各復(fù)方中不同組分混合后，都加水稀釋至60 mL，保持與紅景天單方同樣的料液比1∶15（表1）。

表1 復(fù)方組成Table 1 Composition of the compounds

1.2.4 復(fù)方紅景天抗疲勞活性的測(cè)定[17]1）小鼠分組。小鼠隨機(jī)分成6組，每組40只，分別是安靜對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)對(duì)照組、配方一組、配方二組、配方三組、紅景天單方組（將1.2.1節(jié)中所得紅景天浸膏加150 mL水復(fù)溶），分別灌以生理鹽水、配方一、配方二、配方三溶液、紅景天提取物溶液，以12 mL/kg（體質(zhì)量）灌胃，每日一次，連續(xù)灌胃30 d。每半個(gè)月記錄小鼠體質(zhì)量。

2）負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)[17]。末次灌胃30 min后，每組隨機(jī)取出10只小鼠，在小鼠尾部綁上其體質(zhì)量5%的鉛皮，放入水深30 cm左右、水溫25±0.5℃的水箱中游泳，記錄小鼠自游泳開始至死亡的時(shí)間，作為小鼠力竭游泳時(shí)間。

3）血清尿素氮的測(cè)定[17]。末次灌胃30 min后，每組隨機(jī)取出10只小鼠，置于30℃的水中無(wú)負(fù)重游泳90 min后取出，休息60 min，摘眼球采血0.5 mL。待凝固后離心，取血清待測(cè)，具體測(cè)定方法按照南京建成試劑盒測(cè)定。

4）血乳酸測(cè)定[17-18]。末次灌胃30 min后，每組隨機(jī)取出10只小鼠，負(fù)重2%體質(zhì)量在30℃的水中游泳60 min，安靜15 min后采血備用。取小鼠全血0.1 mL，加入蛋白沉淀劑0.6 mL混勻，4 000 r/min離心10 min，取上清液待測(cè)，具體測(cè)定方法按照南京建成試劑盒測(cè)定[19]。

5）肝糖元測(cè)定[17，20]。末次灌胃 30 min 后，每組隨機(jī)取出10只小鼠，無(wú)負(fù)重置于水溫30℃的水中游泳90 min后，立即頸椎脫臼處死。取出肝臟，生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，稱取肝組織50 mg，加入150μL 30%NaOH溶液，沸水浴20 min，加0.8 mL水，混勻，制成5%反應(yīng)液，取反應(yīng)液0.5 mL加水0.5 mL，混勻，加蒽酮試劑 2 mL，沸水浴 5 min，620 nm比色，按南京建成試劑盒要求測(cè)定。

1.2.5 復(fù)方紅景天對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠能量代謝相關(guān)酶活的影響 小鼠運(yùn)動(dòng)方式同肝糖元的測(cè)定，運(yùn)動(dòng)后，立刻處死。取肝臟、血或肌肉組織測(cè)試琥珀酸脫氫酶（SDH）、肌酸激酶（CK）、三磷酸腺苷（ATP）酶活。

SDH酶活測(cè)定：取小鼠肝組織勻漿上清和肌肉組織勻漿上清，按照南京建成試劑盒要求操作，在600 nm處比色，計(jì)算5和65 s時(shí)的吸光度值差值[20-22]。

CK酶活測(cè)定：取小鼠肌肉組織勻漿上清，加生理鹽水稀釋為0.25%的勻漿。取20 μL 0.25%的肌肉組織勻漿，按照南京建成試劑盒說(shuō)明書測(cè)定[21-23]。

ATP酶活測(cè)定：稱取0.1 g肌肉組織加入0.8mL生理鹽水，制備勻漿，1 500 r/min離心l0 min，取上清0.2 mL加0.8 mL生理鹽水稀釋成2%組織勻漿，取200 μL測(cè)ATP酶活性，具體操作見(jiàn)南京建成試劑盒說(shuō)明書[21-23]。

蛋白定量：采用考馬斯亮蘭染色法，具體操作見(jiàn)南京建成考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒說(shuō)明書[24]。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x0±s）表示，結(jié)果采用方差分析進(jìn)行組間檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與討論

2.1 復(fù)方中藥材各活性成分測(cè)定結(jié)果

依據(jù)各活性成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)得紅景天溶液中紅景天苷的質(zhì)量濃度為1.2 mg/mL，五味子溶液中五味子醇甲的質(zhì)量濃度為0.85 mg/mL，枸杞溶液中枸杞多糖的質(zhì)量濃度為2.51 mg/mL，黃精溶液中黃精多糖的質(zhì)量濃度為3.34 mg/mL，肉蓯蓉溶液中的松果菊苷質(zhì)量濃度為1.56 mg/mL，當(dāng)歸溶液中的阿魏酸質(zhì)量濃度為0.05 mg/mL。從而，可以進(jìn)一步計(jì)算出各組方中不同代表性活性成分的質(zhì)量濃度，如表2所示。

表2 各組方中代表性活性物質(zhì)的含量Table 2 Content of representative active substances in the prescription

2.2 復(fù)方紅景天抗疲勞實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響 灌胃期間，各組的小鼠精神狀態(tài)良好，未見(jiàn)異常反應(yīng)，不同組藥物對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響見(jiàn)表3。由表3可以看出，隨著飼養(yǎng)天數(shù)的增加，小鼠體質(zhì)量穩(wěn)速增長(zhǎng)，增長(zhǎng)情況略有差異，但實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)趨勢(shì)相同。各給藥組與對(duì)照組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p＞0.05），表明實(shí)驗(yàn)所采用的藥物不影響小鼠的正常生長(zhǎng)。

表3 不同組藥物對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響（x0±s，n=40）Table 3 Effects of different drugs on body weight of mice（x0±s，n=40）

2.2.2 對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響 運(yùn)動(dòng)耐力的下降是疲勞最直接和客觀的一種表現(xiàn)，在保健品評(píng)價(jià)方法中，力竭游泳時(shí)間是反映疲勞程度的一個(gè)重要指標(biāo)。由圖1可以看出，與空白對(duì)照組相比，給藥組小鼠游泳時(shí)間顯著延長(zhǎng)，給藥組小鼠的游泳時(shí)間與空白組相比增加超過(guò)100%，都具有很高的抗疲勞活性。配方二組與配方三組優(yōu)于紅景天單方組，其中配方三組的游泳時(shí)間最長(zhǎng)，而配方一組的游泳時(shí)間略低于單方組。

圖1 不同組藥物對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響Fig.1 Effects of different drugs on exhaustive swimming time in mice

2.2.3 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血乳酸（LA）濃度和血清尿素氮（BUN）濃度的影響 通過(guò)測(cè)定小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸的水平，可以了解其乳酸代謝情況，機(jī)體中乳酸的濃度與其疲勞程度密切正相關(guān)。由表4可知，小鼠游泳后，血LA濃度大幅度升高。與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比，各給藥組均明顯降低LA濃度（p＜0.05），其中配方三組差異極顯著（p＜0.01）；配方一組和二組的LA水平也顯著低于紅景天單方組（p＜0.05）。同時(shí)，運(yùn)動(dòng)后小鼠血清BUN大幅度提高，給藥組均能顯著降低BUN濃度，其中配方一組與紅景天單方組基本相當(dāng)，配方三組降低BUN幅度最大，表現(xiàn)出良好的清除運(yùn)動(dòng)小鼠代謝產(chǎn)物的能力。

2.2.4 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠肝糖元質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響 運(yùn)動(dòng)耐力的強(qiáng)弱與機(jī)體糖元的儲(chǔ)備量有著密切的聯(lián)系，機(jī)體的糖元儲(chǔ)備和血糖水平直接影響運(yùn)動(dòng)耐力水平。由表5看出，游泳后小鼠體內(nèi)的肝糖元含量急速下降，給藥后，與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比，有所增加。其中，配方一組與紅景天單方組效果基本相當(dāng)，對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠的肝糖元增加較少；配方二組和三組相比運(yùn)動(dòng)對(duì)照組提升顯著。文獻(xiàn)報(bào)道大量運(yùn)動(dòng)后肝臟組織損害嚴(yán)重，影響細(xì)胞的正常代謝和肝糖元合成。添加適量的肉蓯蓉可通過(guò)降低乳酸脫氫酶LDH 5的活性以及上調(diào)一氧化氮合酶NOS 3的表達(dá)來(lái)保護(hù)肝臟和促進(jìn)乳酸的糖異生過(guò)程，從而促進(jìn)體能恢復(fù)[25]。適當(dāng)增加具有補(bǔ)血活血功能的當(dāng)歸用量，能改善血液循環(huán)，提高運(yùn)輸氧及各種原料的能力，加速糖元合成，有利于維持機(jī)體處于正常生理代謝水平。

2.3 復(fù)方紅景天對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠能量代謝相關(guān)酶活的影響

疲勞的產(chǎn)生及其緩解與運(yùn)動(dòng)時(shí)的能量供給密切相關(guān)。線粒體被稱為細(xì)胞內(nèi)的 “能量工廠”，SDH是反映線粒體功能的標(biāo)志酶之一，其活性一般可作為評(píng)價(jià)三羧酸循環(huán)運(yùn)行程度的指標(biāo)。ATP酶是一類能將三磷酸腺苷催化水解為二磷酸腺苷和磷酸根離子的酶，釋放的能量可以通過(guò)傳遞而被用于驅(qū)動(dòng)另一需要能量的反應(yīng)。CK催化三磷酸腺苷和肌酸，生成磷酸肌酸，是一個(gè)與細(xì)胞內(nèi)能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、ATP再生有直接關(guān)系的重要激酶。本節(jié)研究了不同藥物組對(duì)SDH、CK、ATP酶活性的影響，以進(jìn)一步考察對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠能量代謝的干預(yù)作用，初步探討抗疲勞機(jī)制。

2.3.1 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠SDH活力的影響 由表6可以看出，小鼠運(yùn)動(dòng)后SDH活性具有明顯組織特異性。與安靜對(duì)照組相比，游泳小鼠肝組織SDH顯著降低，給藥后有所升高，其中配方二組和配方三組的小鼠肝SDH含量較高，已接近安靜組水平；而小鼠骨骼肌SDH在運(yùn)動(dòng)后活性有所升高，給藥后小鼠SDH活力較安靜組有所升高，但低于運(yùn)動(dòng)對(duì)照組，其中配方三與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組無(wú)顯著性差異。提高SDH活力，有利于有氧代謝過(guò)程的順暢進(jìn)行，促進(jìn)運(yùn)動(dòng)過(guò)程中能量的供給。

表6 不同組藥物對(duì)游泳小鼠SDH活力的影響Table 6 Effects of different groups of drugs on SDH activities after swimming in mice（x0±s，n=8）

2.3.2 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠體內(nèi)CK活力的影響 在一定程度上，血清CK水平的高低與橫紋肌損害程度有關(guān)，肌細(xì)胞受損后，CK會(huì)經(jīng)細(xì)胞間隙滲透到淋巴液，最終進(jìn)入血液循環(huán)，間接引起血清CK增加。由表7可以看出，與安靜組相比，游泳小鼠體內(nèi)骨骼肌和血清中的CK活力均有升高趨勢(shì)，這是因?yàn)檎顟B(tài)下，CK處于肌肉中，它的功能是使肌酸上増加磷酸基團(tuán)，轉(zhuǎn)化為高能分子磷酸肌酸，釋放能量。當(dāng)肌肉損傷時(shí)，CK不能正常發(fā)揮功能，CK由肌肉細(xì)胞進(jìn)入血液，在血液中檢測(cè)到CK含量增加，暗示肌肉損傷發(fā)生[26]。給藥組與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組相比，血清CK活力均有所下降，其中配方三組降低顯著（p＜0.05），基本接近正常水平，表明紅景天復(fù)配各味中藥材大大降低了運(yùn)動(dòng)后細(xì)胞膜的損傷程度。而對(duì)于骨骼肌CK活力，運(yùn)動(dòng)組和給藥組與安靜組相比，均有所升高，其中只有配方三組與運(yùn)動(dòng)對(duì)照組有顯著性差異（p＜0.05）。

表7 各組藥物對(duì)小鼠血清和骨骼肌CK活力的影響Table 7 Effects of different groups of drugs on CK activities in serum and skeletal muscle in mice after swimming（x0±s，n=8）

2.3.3 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠骨骼肌ATP酶活力的影響ATP酶活性高低可以反映機(jī)體能量代謝的水平。由表8可以看出，相比較安靜組，運(yùn)動(dòng)組小鼠骨骼肌中的Na+K+-ATP酶活和Ca2+Mg2+-ATP酶活均顯著降低，給藥后，酶活均有所升高，其中配方三組對(duì)Na+K+-ATP酶活的提高極顯著（p＜0.01），接近正常水平，配方二組也較顯著（p＜0.05），而配方一組和紅景天單方組提高Na+K+-ATP酶活的能力無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，都低于配方二組和配方三組。對(duì)于Ca2+Mg2+-ATP酶活，相比較運(yùn)動(dòng)對(duì)照組，各給藥組中只有配方三組提升顯著（p＜0.05），其他組增加不明顯。

表8 不同組藥物對(duì)游泳小鼠骨骼肌ATP酶活影響Table 8 Effects of different groups of drugs on ATPase activity of skeletal muscle after swimming in mice（x0±s，n=8）

3 結(jié)語(yǔ)

1）確定了復(fù)方紅景天抗疲勞藥物中的各藥材的提取工藝，并通過(guò)其中代表性物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，分析了各提取物中活性物質(zhì)五味子醇甲、枸杞多糖、黃精多糖、松果菊苷、阿魏酸的含量。

2）以兼補(bǔ)氣血、輔以補(bǔ)腎陽(yáng)思路，保持中藥原藥總量4.0 g，確定了三組復(fù)方的組方。通過(guò)小鼠游泳實(shí)驗(yàn)，以及血清BUN、血LA、肝糖元的測(cè)定，分析比較了各組方和單方紅景天的抗疲勞活性。結(jié)果表明各配方組均能提高運(yùn)動(dòng)小鼠的抗疲勞效果，配方二組和三組的活性優(yōu)于一組和單獨(dú)紅景天組，綜合比較，配方三組的活性更佳。

3）通過(guò)對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠體內(nèi)SDH、CK、ATP酶活的測(cè)定，進(jìn)一步分析了各組方的抗疲勞活性，并從能量代謝方面對(duì)抗疲勞機(jī)制進(jìn)行了初探。