劉亞喬,郭 磊
(大窯灣海關(guān),遼寧 大連 116000)
目前,獸藥殘留及抗生素耐藥性問(wèn)題已成為影響畜牧業(yè)發(fā)展的重要障礙,國(guó)家對(duì)獸藥的使用越來(lái)越嚴(yán)格,《獸藥禁用清單》中對(duì)部分抗生素、鎮(zhèn)定類(lèi)、興奮類(lèi)藥物進(jìn)行了全面禁止或限制,依據(jù)現(xiàn)在國(guó)內(nèi)的獸藥使用情況及國(guó)際形勢(shì),未來(lái)獸藥發(fā)展方向是我國(guó)被禁用獸藥會(huì)不斷增多。
中獸藥是依據(jù)中獸醫(yī)基礎(chǔ)理論、中藥理論和臨床辨證原則對(duì)疾病進(jìn)行辨證組方治療,對(duì)腹瀉病有著較好的臨床效果,任杰(2015)等研究發(fā)現(xiàn),復(fù)方中獸藥對(duì)仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育有明顯的促進(jìn)作用,對(duì)仔豬的腹瀉病具有良好的治療效果。萬(wàn)長(zhǎng)華(2017)等研究發(fā)現(xiàn),中獸藥制劑芪貞增免顆粒、四黃止痢顆??蓽p少仔豬腹瀉病的發(fā)病率,并對(duì)仔豬腹瀉有良好的治療效果。本研究主要針對(duì)仔豬的脾虛泄瀉進(jìn)行組方并治療,以期望得到一個(gè)對(duì)脾虛泄瀉有良好治療效果的中獸藥處方。
本研究采用具有補(bǔ)肝腎,強(qiáng)筋骨的女貞子、具有斂肺,澀腸,具有溫中驅(qū)寒、回陽(yáng)通脈的干姜組成,生津的烏梅及補(bǔ)氣升陽(yáng)、固表止汗的黃芪。按照3 ∶2 ∶2 ∶1 的比例組方。進(jìn)行中藥復(fù)方的藥理學(xué)研究,主要包括脾虛泄瀉仔豬(靶動(dòng)物)的治療試驗(yàn),從而觀(guān)察自擬中藥復(fù)方的安全性和有效性。
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
50 頭健康仔豬25 ~30 日齡,品種為PIC 豬。
1.1.2 試驗(yàn)藥物及處理
中藥復(fù)方由女貞子、黃芪、干姜和烏梅等藥材按照一定比例組合而成。先將中藥浸泡1 h 后,加水煎煮3 次,每次1 h,混合提取液濃縮至1 mL 藥液含原生藥1 g。
1.1.3 主要儀器
血細(xì)胞分析儀;酶標(biāo)儀;恒溫培養(yǎng)箱;冷凍離心機(jī);水浴鍋;電子天平。
1.1.4 主要試劑
免疫球蛋白IgG ELISA 試劑盒,免疫球蛋白IgM ELISA 試劑盒;胃動(dòng)素、胃泌素檢測(cè)試劑盒。
1.2.1 試驗(yàn)仔豬的飼養(yǎng)管理
本試驗(yàn)仔豬采用圈養(yǎng)形式,每組1 個(gè)圈舍,每個(gè)圈舍10 頭。試驗(yàn)仔豬飼喂相同的飼料(正大乳豬配合飼料),均自由飲水和采食,仔豬按照豬場(chǎng)免疫程序進(jìn)行免疫,驅(qū)蟲(chóng)。
1.2.2 試驗(yàn)動(dòng)物的分組及處理
將50 頭健康仔豬適應(yīng)性飼喂3 d 后進(jìn)行分組,分組按照對(duì)等分配原則按照試驗(yàn)動(dòng)物的體重、性別隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、中藥復(fù)方高、中、低劑量組5 組,每組10 頭,除空白對(duì)照組外,其余4 組參照文獻(xiàn)[1,2]使用利血平復(fù)制脾虛泄瀉模型(利血平按照0.1 mL/kg 劑量肌肉注射,連續(xù)注射3 d),模型建立成功后進(jìn)行給藥,空白組不做任何處理,正常采食和飲水;模型組只造模型不給藥,中藥復(fù)方組造模同時(shí)給藥,連續(xù)灌服給藥5 d,每天2 次。具體處理方法見(jiàn)表1。
1.2.3 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬生長(zhǎng)性能的影響
試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)仔豬稱(chēng)重,試驗(yàn)期間每天記錄加料量和剩余飼料量,計(jì)算日均增重,日均采食量和料重比。日均增重=(試驗(yàn)后每組豬的體重- 試驗(yàn)前每組豬的體重)/ 試驗(yàn)天數(shù)。日均采食量=總采食量/ 試驗(yàn)天數(shù);料重比= 平均采食量/ 日均增重。
表1 試驗(yàn)分組及處理
1.2.4 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬治療效果的影響
試驗(yàn)期間對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行臨床觀(guān)察,主要觀(guān)察仔豬的精神狀態(tài)、被毛狀態(tài)、運(yùn)動(dòng)量,糞便情況、采食和飲水狀況,并進(jìn)行評(píng)價(jià)。治愈:試驗(yàn)仔豬精神狀態(tài)、采食、運(yùn)動(dòng)量恢復(fù)正常,糞便成形,無(wú)稀便。有效:上述癥狀均有好轉(zhuǎn)。無(wú)效:癥狀無(wú)明顯改善甚至更加嚴(yán)重。
1.2.5 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血液生理指標(biāo)的影響
試驗(yàn)結(jié)束后, 禁食不禁水12 h,進(jìn)行前腔靜脈采血,置于抗凝管中,使用全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)血液生理指標(biāo),包括白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量。
1.2.6 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影響
試驗(yàn)結(jié)束后,禁食不禁水12 h,進(jìn)行前腔靜脈采血,置于促凝管中,3 000 r/min 離心,離心10 min,分離血清,用于免疫球蛋白IgG、IgM檢測(cè),免疫球蛋白IgG、IgM 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
1.2.7 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬十二指腸淀粉酶、脂肪酶的影響
試驗(yàn)結(jié)束后, 禁食不禁水12 h,解剖仔豬,取十二指腸內(nèi)容物,按照重量體積比1 ∶9 加入生理鹽水,并進(jìn)行勻漿,制成10% 的組織勻漿液,用于淀粉酶、脂肪酶檢測(cè),淀粉酶、脂肪酶檢測(cè)方法步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用EXCEL 進(jìn)行收集,使用分析統(tǒng)計(jì)軟件 SPSS 20.0軟件進(jìn)行分析,采用單因素方差分析、多重比較進(jìn)行分析,結(jié)果用 “平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差” 表示,P <0.05 為差異顯著,P <0.01 為差異極顯著。
1.4.1 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬生長(zhǎng)性能的影響
由表2 可知:試驗(yàn)前各組試驗(yàn)動(dòng)物體重?zé)o顯著性差異;造模后,除空白組外,體重均下降,與空白組相比, 差異顯著(P <0.05);試驗(yàn)結(jié)束后,藥物組體重增高,中藥復(fù)方高劑量組與空白組相比,差異不顯著(P >0.05),與模型組相比差異極顯著(P <0.01),中藥復(fù)方中劑量組與低劑量組相比,差異顯著(P <0.05);中藥復(fù)方組日增重增加,其中中藥復(fù)方高、中劑量組與空白對(duì)照組相比,差異不顯著(P >0.05),與模型組相比, 差異極顯著(P <0.01)。給藥后,中藥復(fù)方組試驗(yàn)仔豬的日均采食量增加, 與空白組相比,差異不顯著(P >0.05),與模型組相比,差異亦不顯著(P >0.05);給藥后,中藥復(fù)方組試驗(yàn)仔豬的料重比的降低,但各個(gè)試驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異。
1.4.2 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬治療效果
造模型后,仔豬精神狀態(tài)不佳,食欲降低,采食量減少,運(yùn)動(dòng)量少,糞便不成形,稀便,被毛不整齊,雜亂無(wú)光澤。給藥后,試驗(yàn)豬精神狀態(tài)好轉(zhuǎn),采食量明顯增加,運(yùn)動(dòng)量增多,糞便成形。中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬治療效果:高劑量組治愈率達(dá)到70%,有效率為90%,中劑量組治愈率達(dá)到50%,有效率為80%,其結(jié)果詳見(jiàn)表3。
1.4.3 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血液生理指標(biāo)的影響
由表4 可知,給藥后,中藥復(fù)方高、中劑量組白細(xì)胞數(shù)增加,與空白組相比,無(wú)顯著性差異(P >0.05),與模型組相比,差異顯著(P <0.05);而紅細(xì)胞及血紅蛋白含量,各個(gè)試驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異(P >0.05)。
1.4.4 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影響
由表5 可知,給藥后,各個(gè)試驗(yàn)組仔豬血清中免疫球蛋白IgG 的含量無(wú)顯著性差異(P >0.05);而中藥復(fù)方組仔豬血清中免疫球蛋白IgM 的含量升高,其中中藥復(fù)方高、中劑量組與空白組相比,無(wú)顯著性差異(P >0.05),與模型組相比,差異顯著(P <0.05)。
表2 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬生長(zhǎng)性能的影響
1.4.5 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬十二指腸淀粉酶、脂肪酶的影響
由表6 可知, 給藥后, 中藥復(fù)方組十二指腸組織淀粉酶含量升高,其中高、中劑量組,與空白組相比,差異不顯著(P >0.05),與模型組相比,差異顯著(P <0.05);給藥后,中藥復(fù)方組十二指腸組織脂肪酶含量升高,其中高、中劑量組,與空白組相比,差異不顯著(P >0.05),與模型組相比,差異顯著(P <0.05)。
脾虛泄瀉是由于脾臟運(yùn)化、升清的功能受礙,以脾虛濕盛的為病機(jī)的一種疾病,臨床上以腹瀉、精神狀態(tài)不佳、食欲減退,易復(fù)發(fā)為主要特征。目前,對(duì)該病的治療主要是對(duì)癥治療和支持治療,多用抗生素等藥物治療,治療效果并不明顯,且抗生素的長(zhǎng)期使用會(huì)有較大的弊端[3,4]。本研究主要依據(jù)脾虛泄瀉的臨床癥狀對(duì)脾虛泄瀉進(jìn)行辨證組方,從而達(dá)到較好的治療效果,研究結(jié)果表明自擬的中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬有較好的治療效果,其中高劑量組治愈率能達(dá)到70%,有效率達(dá)到90%。還可以提高機(jī)體脂肪酶的活性,從而提高機(jī)體的消化功能。
中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬有較好的治療效果,同時(shí)可以提高脾虛泄瀉仔豬的末重、日增重,降低其料重比,升高仔豬血清中免疫球蛋白IgM 含量。
表 3 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬治療效果
表4 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血液生理指標(biāo)的影響
表5 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影響 μg/mL
表6 中藥復(fù)方對(duì)脾虛泄瀉仔豬十二指腸淀粉酶、脂肪酶的影響 U/L