周原世,徐書(shū)婉,夏浩明綜述 姜興明審校

2018年全球癌癥生存趨勢(shì)監(jiān)測(cè)報(bào)告顯示，腫瘤依然是全球亟待解決的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題[1]。近幾年非編碼RNA(noncoding RNA, ncRNA)與腫瘤的關(guān)系成為研究的熱點(diǎn)，根據(jù)ncRNA的長(zhǎng)度，將其分為微小RNA和長(zhǎng)度大于200 nt的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,LncRNA)[2-3]。LncRNA能夠在轉(zhuǎn)錄、翻譯、染色質(zhì)修飾及蛋白質(zhì)激活等分子生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，調(diào)控基因的表達(dá)，影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4-6]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA不僅能夠調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展，而且在腫瘤的診斷治療等方面有著潛在的應(yīng)用[7-10]。FEZF1-AS1(Fez family zinc finger protein 1-antisense RNA 1)作為一種新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，在多種惡性腫瘤中高表達(dá)，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，在腫瘤的基因診斷、治療和預(yù)后評(píng)估等方面有著潛在的應(yīng)用前景。文章就FEZF1-AS1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制及研究前景作一綜述。

1 FEZF1-AS1概述

FEZF1-AS1定位于人類染色體7q31.32區(qū)域，全長(zhǎng)6 420 nt，由7號(hào)染色體正鏈，即它的同源基因FEZF1( Fez family zinc finger protein 1 )的相反鏈轉(zhuǎn)錄而來(lái)，包含7個(gè)外顯子且具有相對(duì)保守的序列，且FEZF1-AS1第一個(gè)外顯子和FEZF1的外顯子1之間有611個(gè)核苷酸互補(bǔ)配對(duì)[6]。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1有3種剪接變異體，分別是FEZF1-AS1-201 (679 bp, 1 exon)、 FEZF1-AS1-202 (2 653 bp, 3 exons)、 FEZF1-AS1-203 (768 bp, 1 exon) ，但是它們都不具有編碼蛋白質(zhì)的能力。HPA(Human Protein Atlas project)項(xiàng)目對(duì)人類正常組織進(jìn)行RNA測(cè)序發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1在人類的睪丸和腦組織中表達(dá)水平居高[11]。目前已有的研究表明，F(xiàn)EZF1-AS1主要分布于胞核中，胞質(zhì)中僅有少量分布，但是不管分布于哪里，它都發(fā)揮著重要的功能：FEZF1-AS1可以通過(guò)ceRNA(competitive endogenous RNA)模式或者招募多梳抑制復(fù)合體(polycomb repressive complex, PRC)等方式調(diào)節(jié)基因的表達(dá)及蛋白質(zhì)磷酸化等分子生物學(xué)過(guò)程，調(diào)控腫瘤的增殖、遷移和侵襲等惡性生物學(xué)行為，對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生重要的影響[12-13]，也將在腫瘤的診斷、治療及患者的預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮重要的作用。

2 FEZF1-AS1與消化系統(tǒng)腫瘤

2.1 FEZF1-AS1與結(jié)直腸癌 Chen等[14]利用qRT-PCR(quantitative real time polymerase chain reaction)測(cè)得34組結(jié)直腸癌(colorectal carcinoma, CRC)腫瘤組織中FEZF1-AS1較癌旁正常組織明顯高表達(dá)；原位雜交實(shí)驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，F(xiàn)EZF1-AS1的過(guò)表達(dá)與CRC的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：抑制FEZF1-AS1的內(nèi)源性表達(dá)能夠明顯地減少HCT116和M5細(xì)胞的增殖；敲低FEZF1-AS1導(dǎo)致G0/G1期細(xì)胞比例升高，S期細(xì)胞比例降低，而凋亡細(xì)胞的比例變化不大，即FEZF1-AS1促進(jìn)CRC細(xì)胞的增殖是通過(guò)調(diào)控細(xì)胞周期實(shí)現(xiàn)的，而非通過(guò)抑制凋亡；Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)證實(shí)，沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠明顯地抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移；肺轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)EZF1-AS1能抑制腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移；進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，抑制FEZF1-AS1的表達(dá)降低了同源基因FEZF1 mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)，F(xiàn)EZF1-AS1和FEZF1的表達(dá)呈正相關(guān)。Kaplan-Meier分析表明FEZF1-AS1的高表達(dá)和患者的總體生存率密切相關(guān)；單變量及多變量分析證實(shí)FEZF1-AS1可以作為獨(dú)立因子預(yù)測(cè)CRC的預(yù)后。Bian等[15]對(duì)FEZF1-AS1與結(jié)直腸癌的關(guān)系做了更為詳細(xì)的研究，首先對(duì)CRC和正常結(jié)直腸組織進(jìn)行基因芯片分析，最終篩選出52個(gè)在CRC組織中高表達(dá)，在正常結(jié)直腸組織中低表達(dá)的lncRNA，其中FEZF1-AS1表達(dá)尤為突出。CCk-8及克隆形成實(shí)驗(yàn)表明，沉默F(xiàn)EZF1-AS1導(dǎo)致CRC細(xì)胞的增殖和克隆受到顯著抑制；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示高表達(dá)FEZF1-AS1促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞從G1到S期的推進(jìn)，抑制了其凋亡；Transwell實(shí)驗(yàn)證實(shí)敲低FEZF1-AS1能夠抑制HCT116細(xì)胞的遷移和侵襲；在裸鼠體內(nèi)進(jìn)行成瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)高表達(dá)FEZF1-AS1能夠促進(jìn)CRC的肺轉(zhuǎn)移和肝轉(zhuǎn)移。RNA pull-down實(shí)驗(yàn)及質(zhì)譜分析預(yù)測(cè)出丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase 2, PKM2)是FEZF1-AS1相關(guān)蛋白，Western blot及RNA免疫沉淀實(shí)驗(yàn)(RNA immunoprecipitation, RIP)證實(shí)PKM2及其激活狀態(tài)下均能夠與FEZF1-AS1直接結(jié)合；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1能夠在轉(zhuǎn)錄后水平上通過(guò)調(diào)節(jié)泛素化途徑，阻礙PKM2的降解，延長(zhǎng)PKM2的半衰期，增加它的穩(wěn)定性，促進(jìn)糖酵解的發(fā)生，進(jìn)而加快腫瘤細(xì)胞的代謝；生物信息分析發(fā)現(xiàn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(signal transducer and activator of transcription3, STAT3)能夠被FEZF1-AS1和PKM2所調(diào)節(jié)，后續(xù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)FEZF1-AS1和PKM2均能促進(jìn)STAT3的磷酸化，加快CRC的進(jìn)展。同時(shí)，他們進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析也發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1的高表達(dá)給患者帶來(lái)了更差的預(yù)后。

2.2 FEZF1-AS1與胃癌 有研究指出[16]，過(guò)表達(dá)FEZF1-AS1能夠促進(jìn)MGC-803細(xì)胞的增殖；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，抑制FEZF1-AS1的表達(dá)能夠通過(guò)阻滯胃癌細(xì)胞停滯在G1期并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡；將Sh-FEZF1-AS1轉(zhuǎn)染的SGC-7901細(xì)胞注入14只裸鼠皮下，2周后發(fā)現(xiàn)Sh-FEZF1-AS1組的腫瘤體積更小，質(zhì)量更輕。RIP及RNA pull-down實(shí)驗(yàn)證實(shí)，F(xiàn)EZF1-AS1能通過(guò)結(jié)合組蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1, LSD1)在表觀遺傳學(xué)水平抑制P21的表達(dá)；染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)(chromatin immunoprecipitation, ChIP)表明，LSD1能直接結(jié)合P21的啟動(dòng)子，誘導(dǎo)組蛋白第三亞基四號(hào)賴氨酸的二甲基(dimethylation of lysine 4 on histone H3 protein subunit, H3K4me2)發(fā)生去甲基化，抑制p21的表達(dá)，促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展。Gu等[17]所在團(tuán)隊(duì)對(duì)3例胃腺癌患者的癌組織進(jìn)行高通量測(cè)序獲得lncRNA和mRNA在胃癌中的表達(dá)譜，確定lncRNAs/mRNAs在胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)差異并構(gòu)建lncRNA/mRNA共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)，同時(shí)利用TCGA(The Cancer Genome Atlas)數(shù)據(jù)庫(kù)分析等方式進(jìn)行驗(yàn)證，最終確定出9個(gè)對(duì)胃腺癌有潛在診斷價(jià)值的lncRNA，其中就包括FEZF1-AS1。Wu等[18]及其團(tuán)隊(duì)對(duì)104例胃癌組織和癌旁正常組織進(jìn)行RNA測(cè)序并分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1在胃癌組織中高表達(dá)，且FEZF1-AS1和胃癌分化程度及分期明顯相關(guān)。生存分析和時(shí)序檢驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)EZF1-AS1高表達(dá)的患者生存時(shí)間更短；受試者工作特征曲線分析證明，F(xiàn)EZF1-AS1對(duì)胃癌診斷來(lái)說(shuō)可能是一個(gè)敏感度和特異度都相對(duì)較高的潛在標(biāo)志。qRT-PCR測(cè)得MGC-803和MKN-49P中FEZF1-AS1穩(wěn)定高表達(dá)，用si-RNA轉(zhuǎn)染2種細(xì)胞，F(xiàn)EZF1-AS1表達(dá)下調(diào)，且2種細(xì)胞的生存能力明顯降低；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，沉默F(xiàn)EZF1-AS1導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞停滯在G0/G1期，凋亡細(xì)胞數(shù)增多。Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，沉默腫瘤細(xì)胞中的FEZF1-AS1，β-catenin、c-Myc和cyclin D1的表達(dá)顯著減少，E-cadherin表達(dá)增加，即FEZF1-AS1可能通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)胃癌的發(fā)展。龔丹丹等[19]的研究也發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1在胃癌SGC-7901細(xì)胞中過(guò)表達(dá)且能通過(guò)調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)節(jié)胃癌的進(jìn)展。另有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1與胃癌的異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[20]。目前看來(lái)，關(guān)于胃癌發(fā)生發(fā)展的研究從基因、RNA到蛋白繁雜多樣[21]，這就使得胃癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制顯得更為復(fù)雜，也讓人們從多個(gè)方面了解胃癌。

2.3 FEZF1-AS1與肝細(xì)胞癌 Wang等[22]的研究指出，F(xiàn)EZF1-AS1在肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)組織和細(xì)胞中明顯高表達(dá)，且FEZF1-AS1的高表達(dá)和腫瘤的大小、TNM分期、血管侵襲及預(yù)后顯著相關(guān)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，沉默HCC細(xì)胞中的FEZF1-AS1，G0/G1期細(xì)胞比例上升，S期細(xì)胞比例下降，腫瘤細(xì)胞的增殖受到抑制，且HCC細(xì)胞的遷移、侵襲以及在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)都受到了明顯抑制。Western blot實(shí)驗(yàn)證實(shí)，敲低FEZF1-AS1抑制了N-cadherin和Vimentin的表達(dá)，促進(jìn)了E-cadherin蛋白的表達(dá)，抑制了腫瘤細(xì)胞的上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)進(jìn)程；JAK/STAT3信號(hào)通路能夠調(diào)節(jié)EMT進(jìn)程，沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠明顯地抑制JAK2的表達(dá)和STAT3的磷酸化。上述實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)EZF1-AS1能夠通過(guò)調(diào)節(jié)JAK/STAT3信號(hào)通路加快EMT進(jìn)程，促進(jìn)HCC的發(fā)生發(fā)展。此外，肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)嚴(yán)重影響肝細(xì)胞癌患者的預(yù)后，是肝細(xì)胞癌治療當(dāng)中的疑難雜癥[23]，目前還未有FEZF1-AS1在肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)中的研究報(bào)道，這值得進(jìn)一步研究。

2.4 FEZF1-AS1與胰腺導(dǎo)管腺癌 Ye等[24]發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1在胰腺導(dǎo)管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)組織中明顯高表達(dá)且過(guò)表達(dá)的FEZF1-AS1及其同源基因ZNF312B和PDAC的分化類型、高級(jí)別的AJCC分期、神經(jīng)侵犯及較差的預(yù)后密切相關(guān)。免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ZNF312B高表達(dá)的PDAC組織，F(xiàn)EZF1-AS1也高表達(dá)，雙變量分析證明兩者之間呈正相關(guān)；下調(diào)FEZF1-AS1和ZNF312B能夠明顯地抑制PDAC細(xì)胞的增殖、克隆形成、遷移和侵襲，且能夠抑制腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)；生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)miR-107能夠靶向FEZF1-AS1和ZNF312B，從而提出FEZF1-AS1/miR-107/ZNF312B調(diào)控軸；并且還發(fā)現(xiàn)該調(diào)控軸對(duì)腫瘤細(xì)胞的Warburg效應(yīng)維持具有重要作用。

3 FEZF1-AS1與生殖系統(tǒng)腫瘤

3.1 FEZF1-AS1與宮頸癌 Zhang等[25]利用RT-PCR測(cè)定發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1在宮頸癌組織及細(xì)胞中明顯高表達(dá)。將196例患者分為高表達(dá)組和低表達(dá)組，進(jìn)行臨床病理資料分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1的過(guò)表達(dá)和高級(jí)別組織學(xué)分型、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移及晚期FIGO分期密切相關(guān)。在平均44個(gè)月的隨訪中，生存分析結(jié)果表明，F(xiàn)EZF1-AS1高表達(dá)的患者總體生存率更低，生存時(shí)間更短。單變量分析表明組織學(xué)分級(jí)、癌腫轉(zhuǎn)移、FIGO分期和FEZF1-AS1的表達(dá)水平都與較差的預(yù)后相關(guān)，多變量分析證實(shí)FEZF1-AS1是宮頸癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。

3.2 FEZF1-AS與卵巢癌 Zhao等[26]研究發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1在卵巢癌組織和細(xì)胞系中明顯過(guò)表達(dá)，生存分析結(jié)果表明，F(xiàn)EZF1-AS1的過(guò)表達(dá)給卵巢癌患者帶來(lái)了更差的預(yù)后。CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，下調(diào)FEZF1-AS1的表達(dá)能夠明顯地抑制ES2細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡的發(fā)生。進(jìn)一步對(duì)FEZF1-AS1促進(jìn)卵巢癌進(jìn)展的機(jī)制進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，STAT3起到促進(jìn)卵巢癌發(fā)生發(fā)展的作用，而過(guò)表達(dá)FEZF1-AS1能夠促進(jìn)STAT3的表達(dá)及磷酸化，抑制FEZF1-AS1的表達(dá)則對(duì)STAT3起到相反的的作用，即FEZF1-AS1能夠通過(guò)促進(jìn)STAT3的表達(dá)及磷酸化來(lái)激活JAK-STAT3信號(hào)通路促進(jìn)卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展。

4 FEZF1-AS1與肺癌

He等[27]研究者利用qRT-PCR測(cè)出FEZF1-AS1在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)組織和細(xì)胞中高表達(dá)；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析還發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1的高表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化等級(jí)以及晚期TNM分期密切相關(guān)。用si-RNA干擾FEZF1-AS1在A549和SPC-A1中的表達(dá)，MTT及克隆形成試驗(yàn)表明，下調(diào)FEZF1-AS1的表達(dá)明顯降低了腫瘤細(xì)胞的增殖能力；Transwell實(shí)驗(yàn)則證實(shí)，下調(diào)FEZF1-AS1的表達(dá)對(duì)腫瘤細(xì)胞的侵襲有著顯著的抑制作用。Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，沉默NSCLC細(xì)胞中的FEZF1-AS1能夠抑制轉(zhuǎn)錄因子Slug、Twist和Vimentin的表達(dá)，增加E-cadherin及ZO-1蛋白的表達(dá)，即FEZF1-AS1能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的EMT進(jìn)程。RIP及ChIP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1能夠直接結(jié)合 EZH2(enhancer of zeste homolog 2)和LSD1，而EZH2和LSD1能夠與E-cadherin的啟動(dòng)子區(qū)域相結(jié)合發(fā)揮脫甲基作用，即沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠上調(diào)E-cadherin的表達(dá)；此外，下調(diào)FEZF1-AS1的表達(dá)能夠明顯地增加Axin1的表達(dá)，減少β-catenin的表達(dá)，這表明FEZF1-AS1能夠調(diào)節(jié)NSCLC中的Wnt/β-catenin信號(hào)通路，參與NSCLC的發(fā)生發(fā)展。Jin等[28]及其團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1在肺腺癌(lung adenocarcinoma, LAD)組織和細(xì)胞中高表達(dá)，且和腫瘤的大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后明顯相關(guān)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，干擾FEZF1-AS1的表達(dá)能夠?qū)AD細(xì)胞阻滯在G1期，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，促進(jìn)其凋亡的發(fā)生。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，抑癌基因p57在LAD組織中顯著低表達(dá)，沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠明顯地提高抑癌基因p57的表達(dá)水平；RIP及ChIP實(shí)驗(yàn)證實(shí)，F(xiàn)EZF1-AS1能夠與EZH2和LSD1相結(jié)合，誘導(dǎo)它們結(jié)合到p57基因的啟動(dòng)子區(qū)域，使p57基因的啟動(dòng)子發(fā)生去甲基化，抑制p57基因的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞抑癌和抗癌基因表達(dá)的失衡，細(xì)胞發(fā)生惡性質(zhì)變。此外，有研究指出沉默A549和SPC-A1細(xì)胞中的內(nèi)源性FEZF1-AS1，F(xiàn)EZF1 mRNA及蛋白的表達(dá)水平都降低；利用si-RNA敲低FEZF1蛋白編碼基因的表達(dá)，F(xiàn)EZF1-AS1的表達(dá)也受到明顯抑制；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果證實(shí)，F(xiàn)EZF1-AS1和FEZF1的表達(dá)呈明顯正相關(guān)[29-30]。

5 FEZF1-AS1與其他腫瘤

5.1 FEZF1-AS1與骨肉瘤 Zhou等[31]發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1在骨肉瘤(osteosarcoma, OS)組織及細(xì)胞中高表達(dá)，且與OS分期分型、轉(zhuǎn)移及預(yù)后顯著相關(guān)。沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠明顯地減少U2OS和MG63S期細(xì)胞的數(shù)目，降低其增殖能力，同時(shí)能夠抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移及減緩腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)，顯著地減小肺轉(zhuǎn)移瘤的體積。生物信息預(yù)測(cè)及熒光素酶報(bào)告分析證實(shí)，miR-4443能和FEZF1-AS1直接結(jié)合，且FEZF1-AS1上只有一個(gè)miR-4443結(jié)合位點(diǎn)；過(guò)表達(dá)miR-4443能夠抑制OS細(xì)胞中FEZF1-AS1的表達(dá)。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)miR-4443能夠與NUPR1 mRNA的3’-非翻譯區(qū)域(untranslated region, UTR)相結(jié)合，且miR-4443過(guò)表達(dá)抑制了NUPR1 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)，過(guò)表達(dá)FEZF1-AS1則能夠上調(diào)腫瘤細(xì)胞中NUPR1 mRNA的水平。綜上所述，F(xiàn)EZF1-AS1促進(jìn)OS的發(fā)生發(fā)展，一部分是通過(guò)調(diào)節(jié)miR-4443/NUPR1軸實(shí)現(xiàn)的。

5.2 FEZF1-AS1與乳腺癌 乳腺癌已成為女性健康的一大殺手，近年來(lái)關(guān)于乳腺癌方面的分子機(jī)制研究也逐漸增多。研究發(fā)現(xiàn)FEZF1-AS1在乳腺癌組織和細(xì)胞中表達(dá)明顯被上調(diào)，且FEZF1-AS1高表達(dá)患者的總體生存率更低，預(yù)后更差[32]。低表達(dá)FEZF1-AS1導(dǎo)致CD44+/CD24-乳腺癌干細(xì)胞樣細(xì)胞(breast cancer-stem like cells, BCSC)及干細(xì)胞因子Nanog、OCT4及SOX2減少，降低了BCSC的成球能力，腫瘤細(xì)胞的干細(xì)胞能力被削弱。FEZF1-AS1主要位于胞質(zhì)中，沉默F(xiàn)EZF1-AS1抑制了MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲以及腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miR-30a和FEZF1-AS1 3’-UTR之間有7個(gè)堿基互補(bǔ)配對(duì)，兩者能直接結(jié)合，且miR-30a能夠抑制FEZF1-AS1在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-30a和Nango mRNA的3’-UTR相結(jié)合，且能夠FEZF1-AS1和Nango mRNA及蛋白的表達(dá)。即FEZF1-AS1能夠通過(guò)對(duì)FEZF1-AS1/miR-30a/Nango軸的調(diào)節(jié)，影響乳腺癌的發(fā)生發(fā)展。從另一方面來(lái)說(shuō)，對(duì)乳腺癌干細(xì)胞的研究也能為乳腺癌的治療及預(yù)后評(píng)估帶來(lái)巨大效益[33-34]。

5.3 FEZF1-AS1與多發(fā)性骨髓瘤 Li等[35]通過(guò)qRT-PCR測(cè)得FEZF1-AS1在多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)組織和細(xì)胞中高表達(dá)；干擾U266細(xì)胞中FEZF1-AS1的表達(dá)，能夠阻止腫瘤細(xì)胞從G1到S期的轉(zhuǎn)變，抑制腫瘤的增殖，增加U266細(xì)胞的凋亡。數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)，miR-610能夠和FEZF1-AS1 3’-UTR結(jié)合，且miR-610與FEZF1-AS1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，用miR-610 mimics轉(zhuǎn)染的U266細(xì)胞中Akt3(protein kinase B3)表達(dá)水平降低；在MM樣本中，Akt3 mRNA的表達(dá)明顯增加且與miR-610的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)；沉默F(xiàn)EZF1-AS1能夠減少Akt3 mRNA和蛋白的表達(dá)，F(xiàn)EZF1-AS1與Akt3的表達(dá)呈正相關(guān)。這表明FEZF1-AS1能夠通過(guò)調(diào)節(jié)miR-610/Akt3軸促進(jìn)MM細(xì)胞的增殖。

5.4 FEZF1-AS1與鼻咽癌 Cheng等[36]經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)EZF1-AS1在鼻咽癌組織和細(xì)胞中較正常組織和細(xì)胞中明顯高表達(dá)，且高表達(dá)的FEZF1-AS1與鼻咽癌的遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移及患者較差的總體生存率、較低無(wú)的病生存率密切相關(guān)。敲低5-8F細(xì)胞中FEZF1-AS1的表達(dá)，腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲受到顯著抑制，p21表達(dá)被上調(diào)，cyclin D1表達(dá)被下調(diào)。此外，下調(diào)FEZF1-AS1的表達(dá)能夠明顯地抑制腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，干擾FEZF1-AS1的表達(dá)能夠明顯地促進(jìn)E-cadherin的表達(dá)，抑制N-cadherin和Vimentin的表達(dá)從而抑制腫瘤細(xì)胞的EMT進(jìn)程；同時(shí)也增加了β-catenin的表達(dá)，激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路。

6 小結(jié)及展望

FEZF1-AS1作為新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，主要通過(guò)ceRNA或者招募PRC2的方式，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞內(nèi)某些蛋白質(zhì)的磷酸化以及染色質(zhì)甲基化等表觀遺傳學(xué)修飾，調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲和細(xì)胞代謝，但FEZF1-AS1在其他方面的作用及機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。目前看來(lái)，F(xiàn)EZF1-AS1的研究?jī)H限于腫瘤方面，并無(wú)在其他疾病中的報(bào)道。相信隨著研究的逐步開(kāi)展，上述謎團(tuán)將被一一解開(kāi)，F(xiàn)EZF1-AS1也可以在疾病尤其是惡性腫瘤的基因診斷、治療以及預(yù)后評(píng)估等方面發(fā)揮重要的作用，更好地服務(wù)于臨床實(shí)踐。