楊帆 赫雪 楊遠(yuǎn)

【摘 要】 目的：探究藏藥柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠的降脂效果，為藏藥柳茶的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：將25只SD小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組5只、高脂飼料組20只建模。建模成功后高脂飼料組分為模型組、高、中、低劑量組，每組5只。除模型組外，各組給予不同濃度的柳茶水提物進(jìn)行灌胃治療，每日1次，6周后解剖，記錄并觀察不同濃度的藏藥柳茶提取物對(duì)單純性肥胖小鼠體重、體脂、脂肪量和脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響。結(jié)果：治療前高脂飼料組小鼠體重高于對(duì)照組小鼠體重的60%，表明建模成功。治療后各組間比較，高、中、低組劑量組均可使單純性肥胖小鼠體重、體脂和脂肪量降低，脂肪細(xì)胞直徑減小（P<0.05）。結(jié)論：藏藥柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠具有明顯的降脂效果，以柳茶水提物中劑量組效果最佳。

【關(guān)鍵詞】 藏藥柳茶;水提物;降脂

【中圖分類號(hào)】R285.5 ??【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A ???【文章編號(hào)】1007-8517（2019）18-0026-03

Abstract：Objective To investigate the lipid-lowering effect of Tibetan medicine Liucha aqueous extract on simple obese mice. Provide experimental basis for the development and utilization of Tibetan medicine Liucha. Methods 25SD mice wererandomly divided into 5 groups in the normal diet group and 20 in the high fat diet group. After successful modeling， the high-fat diet components were high-fat feed model group and Liucha high， medium and low dose groups， with 5 in each group. In addition to the high-fat diet model group， each group was given different concentrations of water extract of Liucha water， once a day， after 6 weeks， dissected， recorded and observed different concentrations of Tibetan medicine Liucha extract on the weight of simple obese mice Effects of body fat， fat mass， liver weight， and fat cell morphology. Result Before treatment， the weight of mice in the high-fat diet group was 60% higher than that in the control group， indicating that the modeling was successful. Aftertae atment， the high-， medium-， and low-dose groups of Tibetan medicine Liucha could make simple obesity. Body weight， body fat， fat mass， liver weight decreased，and fat cell diameter decreased （P<0.05）. Conclusion The water extract of Tibetan medicine Liucha has obvious fat-reducing effect on simple obese mice. The dosage of the extract of Liucha water was the best.

Keywords：Tibetan Medicine Liucha;Water Extract;Lipid-lowering Effect

肥胖是由一種脂肪組織過(guò)度堆積和脂質(zhì)代謝失調(diào)所引起的疾病，能夠引發(fā)多種代謝疾病，如2型糖尿病、高脂血癥、高血壓、心血管疾病等[1]。研究數(shù)據(jù)表明，39% 的子宮內(nèi)膜癌、37%的食道癌、 25%的腎癌、11%的結(jié)腸癌、9%的乳腺癌均與肥胖有關(guān)[2]。預(yù)計(jì)到2030年超重和肥胖人群將達(dá)全世界總?cè)丝诘?58%[3]，肥胖將成為全球流行性疾病。

傳統(tǒng)的減肥方法分為兩類，一類是通過(guò)節(jié)食、食欲抑制劑、緩瀉劑、手術(shù)等方式減少能量的攝入，或者通過(guò)運(yùn)動(dòng)利用食物的特殊動(dòng)力學(xué)作用增加能量的消耗，最終形成能量的負(fù)平衡從而達(dá)到消耗脂肪的目的[4]。而另一類，是通過(guò)服用化學(xué)類降脂藥物達(dá)到降脂目的。國(guó)內(nèi)常用的降脂藥物主要成分集中在他汀類、膽汁酸鰲合劑及甲亞油酰胺類等，這些西藥類雖具有不同程度的降脂效果，但都存在一定的毒副作用，如損害肝功能、肌痛等[5]。因此，研發(fā)一種能夠達(dá)到健康減肥效果的天然降脂藥物是非常重要的。有效的健康減肥方法不僅有利于提高國(guó)民體質(zhì)，還有利于管控慢性病，進(jìn)而能夠減輕相關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的財(cái)政壓力[6] 。

藏藥柳茶（Sibiraea angustata）又稱為窄葉鮮卑花，隸屬于薔薇科鮮卑花屬 （Sibiraea），其作為茶飲在藏族民間廣為流行，又因其形狀與柳葉相似，故俗稱“柳茶”，主要分布在我國(guó)的青海、西藏、云南及甘肅等地[7]。柳茶幼時(shí)紫紅色，老時(shí)黑褐色，冬芽卵形，外披紫褐色鱗片。當(dāng)年生的柳茶枝條為葉多互生，老枝上則為叢生，葉片呈或?yàn)榫€狀披針形、長(zhǎng)圓倒披針形或?qū)捙樞?，上下兩面均為無(wú)毛，但有明顯中脈及側(cè)脈，葉柄不顯，無(wú)托葉，屬于雜性異株，花期1月，果期1月[8]。藏藥柳茶作為我國(guó)藏族傳統(tǒng)的珍貴藥材，當(dāng)?shù)夭孛褚话阋云淙~和嫩枝入藥做茶飲，能夠治療食后腹脹或消化不良等癥狀[9]。據(jù)牧民觀察，食用柳茶的牛羊等牲畜體重明顯減輕，而且精神飽滿、皮毛光潔，因此可推斷柳茶可能具有降脂效果。

本研究以藏藥柳茶為供試材料，以SD小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)比較灌胃同劑量不同濃度的柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠體重、體脂、腎周邊脂肪質(zhì)量、皮下脂肪質(zhì)量和脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響，探究柳茶的降脂效果，旨在為藏藥柳茶的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定理論基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD小鼠25只，體質(zhì)量20～25 g，購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，合格證號(hào)：0049435。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 藏藥柳茶于 2018年6月采自甘肅省甘南藏族自治州，由西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院郭鵬輝副教授鑒定為薔薇科鮮卑花屬 （Sibiraea）植物柳茶的葉片。

1.3 儀器 KQ-500B超聲波提取儀（昆山市超聲儀器有限公司）、KD1508A切片機(jī)、KD-P攤片機(jī)、KD-H烘片機(jī)（金華科迪儀器設(shè)備有限公司）、BX43生物顯微鏡、BGG-9070A恒溫干燥箱、BSC- 1000A2生物安全柜（江西立康科技有限公司）。

2 方法

2.1 小鼠單純性肥胖模型的建立 小鼠25只，取5只按照隨機(jī)數(shù)字表法以基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)1周，其余喂飼高脂飼料（基礎(chǔ)飼料75%、蔗糖10%、羊油15%）。每籠5只，自由攝食和飲水，明暗周期為12h，室溫20～25℃，相對(duì)濕度40%～50%，保持良好通風(fēng)條件。每日稱量體重，并記錄數(shù)據(jù)。4周后高脂飼料組小鼠體重高于基礎(chǔ)飼料組小鼠體重的20%，則證明建模成功。

2.2 藏藥柳茶水提物的制備 取干燥藏藥柳茶，經(jīng)組織粉碎機(jī)粉碎，準(zhǔn)確稱取粉末20g，放入樣品瓶，按照料液比 1∶ 10 加入蒸餾水，搖勻，置于超聲提取儀中，40 ℃，300 W 超聲40 min，處理 2 次，加壓抽濾分離水溶液，合并提取液，減壓濃縮至20 mL，將上清液置于4 ℃冰箱中冷藏備用。

2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與給藥方法 實(shí)驗(yàn)設(shè)5組，上述基礎(chǔ)飼料組為對(duì)照組;采用隨機(jī)數(shù)字表將建模成功的小鼠分為4組，即模型組、高、中、低劑量組，每組5只。高、中、低劑量組采用灌胃給藥法，分別按相當(dāng)于生藥量 15、10、5 g/kg 劑量給藥，對(duì)照組和模型組灌服0. 9%氯化鈉溶液，每天1次，灌胃量為0.2 mL/10g·bw。給藥6周后禁食（不禁水）12 h。打開(kāi)腹腔取腎及脂肪組織，均用10% 福爾馬林溶液固定，-80℃保存。

2.4 脂肪細(xì)胞形態(tài)檢測(cè) 取10%福爾馬林溶液固定的脂肪組織進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋，切片，10×40倍全視野下觀察脂肪細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量。

2.5 體重及體脂含量 測(cè)量體重、體長(zhǎng)，計(jì)算 Lees指數(shù);解剖小鼠取其皮下脂肪及腎周全部脂肪稱重。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel 2010與SPSS 20.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析。數(shù)據(jù)以（x±s）表示，兩組間比較采用最小顯著差異法t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 藏藥柳茶水提物對(duì)試驗(yàn)小鼠體重的影響 建模4周后，高脂飼料組小鼠體重高于基礎(chǔ)飼料組小鼠體重的60%，表明建模成功。對(duì)各組小鼠體重進(jìn)行比較，高、中、低劑量組的小鼠造模期間體重有顯著的增加，經(jīng)過(guò)灌胃治療后，高、中、低劑量組的小鼠體重有顯著減少（P<0.05），其中中劑量組最為明顯。見(jiàn)表1。試驗(yàn)期間小鼠體重的變化如圖1所示。

3.1 藏藥柳茶水提物對(duì)試驗(yàn)小鼠體脂、脂肪量的影響 灌胃治療6周后，高、中、低劑量組的單純性肥胖小鼠體脂、腎周邊脂肪質(zhì)量和皮下脂肪質(zhì)量有明顯減少（P<0.05），其中柳茶中劑量組的降脂作用最為明顯。見(jiàn)表2。

3.3 藏藥柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響 灌胃6周后，高、中、低劑量組小鼠脂肪細(xì)胞的截面細(xì)胞數(shù)顯著高于模型組（P<0.05），高、中劑量組小鼠脂肪細(xì)胞的截面細(xì)胞數(shù)和半徑都顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表3和圖2。

4 討論

肥胖作為一種現(xiàn)今常見(jiàn)的營(yíng)養(yǎng)障礙性病，對(duì)人體存在諸多危害。不僅會(huì)降低患者的生活質(zhì)量，還會(huì)引發(fā)糖尿病、高血脂及心血管病等多種嚴(yán)重危害人體健康的疾病，進(jìn)而在一定程度上縮短患者的壽命[10-11]。目前柳茶的降脂研究多集中在細(xì)胞層面 [12]，本實(shí)驗(yàn)從藥效學(xué)角度研究表明，藏藥柳茶具有降脂功效。從宏觀角度進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果清晰直觀。柳茶的降脂功效的發(fā)現(xiàn)能夠幫助天然減肥藥的研發(fā)，幫助患者從傳統(tǒng)的減肥方法過(guò)渡到健康減肥。

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，通過(guò)參考相關(guān)文獻(xiàn)[13]與進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)逐漸摸索出高脂飼料最為適宜的配方。飼養(yǎng)4周后，喂養(yǎng)高脂飼料的小鼠體重高于喂養(yǎng)普通飼料的小鼠，的60%，說(shuō)明高脂飼料配方合理且成功建立小鼠單純性肥胖模型。本實(shí)驗(yàn)采用高脂飲食誘導(dǎo)小鼠肥胖，與人群肥胖機(jī)制極為類似。本實(shí)驗(yàn)采用單純性肥胖小鼠模型，以喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料的小鼠為水平對(duì)照，探討藏藥柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠體重、體脂和脂肪量的影響。結(jié)果表明，高、中、低劑量組與模型組比較，均可明顯降低單純性肥胖小鼠體重、體脂和脂肪量，其中中劑量組治療效果最好。

本實(shí)驗(yàn)初步探究了柳茶水提物對(duì)單純性肥胖小鼠各種指標(biāo)的影響，證明了柳茶的降脂作用，為西部民族地區(qū)特色植物藏藥柳茶的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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（收稿日期：2019-07-02 編輯：陶希睿）