陳明棠 李輝 黃健 譚正準(zhǔn) 趙朝步 鐘華配 覃廣勝

摘要?用“GnRH + PGc + GnRH”法同期化處理水牛，利用B超對(duì)多卵泡發(fā)育和排卵進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明，經(jīng)同期化處理的母水牛多卵泡發(fā)育發(fā)生率為6.43%（42/653），排卵率為72.73%（24/33）。母水牛多卵泡發(fā)育的發(fā)生與品種、年齡、季節(jié)等因素?zé)o關(guān)。

關(guān)鍵詞?水牛;同期發(fā)情;B超;多卵泡發(fā)育;排卵監(jiān)測(cè);影響因素

中圖分類(lèi)號(hào)?S823.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼?A

文章編號(hào)?0517-6611（2019）22-0083-02

Abstract?“GnRH + PGc + GnRH” treatment was used to make estrus synchronization on buffaloes. And the development of ovarian follicles were observed by ultra sound method. The results showed that the multifollicle growth rate of synchronized buffalo was 6.43%（42/653）， and the?ovulation rate was 72.73%（24/33）.?The development of multifollicle had no correlation with variety， age， season， etc.

Key words?Buffalo;Estrus synchronization;Ultra sound;Development of multifollicle;Ovulation monitoring;Influencing factors

水牛是單胎動(dòng)物，通常情況下母水牛一次發(fā)情只排1枚卵子，自然狀態(tài)下水牛的雙胎率極低，雙胎多出現(xiàn)在胚胎移植。隨著水牛同期發(fā)情技術(shù)的推廣應(yīng)用，常用的處理程序是否會(huì)增加多卵泡發(fā)育和多排卵的問(wèn)題尚未見(jiàn)報(bào)道。筆者用促黃體素釋放激素A3+氯前列醇同期化處理母水牛，使用便攜式獸用B超儀觀測(cè)卵泡發(fā)育和排卵情況，記錄其中多卵泡發(fā)育和多排卵現(xiàn)象，分析品種、年齡和季節(jié)等因素對(duì)母水牛多卵泡發(fā)育發(fā)生的影響。

1?材料與方法

1.1?材料

1.1.1?試驗(yàn)牛。廣西區(qū)內(nèi)飼養(yǎng)的摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、地中海水牛及其他雜交水牛。

1.1.2?試劑和器材。氯前列醇（PGc）、促黃體素釋放激素A3（哥娜、GnRH）為丹東市綠丹和華動(dòng)物藥有限公司生產(chǎn);便攜式獸用B超儀（HONDA，HS-101V），日本產(chǎn)。

1.2?方法

1.2.1?同期化發(fā)情處理。

試驗(yàn)?zāi)杆２捎谩按冱S體素釋放激素A3+氯前列醇”方法進(jìn)行同期化處理[1]。試驗(yàn)開(kāi)始當(dāng)天記為“0 d”，當(dāng)天肌肉注射GnRH 100 μg/頭，第7 天肌肉注射PGc 0.4 mg/頭，第9 天肌肉注射GnRH 100 μg/頭，此后24 h起開(kāi)始檢查發(fā)情和監(jiān)測(cè)排卵。

1.2.2?發(fā)情和排卵監(jiān)測(cè)。

全部試驗(yàn)?zāi)杆Ｔ诘? 天肌注GnRH后24 h進(jìn)行第一次發(fā)情和排卵監(jiān)測(cè)，記錄卵巢上直徑≥9 mm卵泡數(shù)目。監(jiān)測(cè)頻率為1～2次/d，使用B超儀經(jīng)直腸逐頭掃描母水牛卵巢，60 h內(nèi)不排卵的不再監(jiān)測(cè)并記為不排卵。

1.2.3?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯著性分析采用卡方檢驗(yàn)（χ2）分析，P<0.05表示差異顯著。

2?結(jié)果與分析

2.1?多卵泡發(fā)育和排卵的總體情況

試驗(yàn)監(jiān)測(cè)了母水牛多卵泡發(fā)育和排卵情況，總樣本653頭，一次發(fā)情優(yōu)勢(shì)卵泡數(shù)達(dá)到2個(gè)的母水牛有40頭，一次發(fā)情優(yōu)勢(shì)卵泡數(shù)達(dá)到3個(gè)的有2頭， 2個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡與3個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡的發(fā)生率差異顯著（P<0.05）。2個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡的母水牛排卵率為70.97%（22/31），但均為單排卵，無(wú)雙排卵現(xiàn)象，有3個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡的母水牛出現(xiàn)1頭多排卵。多卵泡發(fā)育和排卵情況具體見(jiàn)表1。

2.2?多卵泡發(fā)育與年齡的關(guān)系

將全部樣本按年齡段（青年、成年）進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)青年水牛和成年水牛多卵泡發(fā)育發(fā)生率差異不顯著（P>0.05）（表2）。

2.3?多卵泡發(fā)育與品種的關(guān)系

將全部樣本按品種進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)各品種水牛多卵泡發(fā)育的發(fā)生率差異不顯著（P>0.05）（表3）。

2.4?多卵泡發(fā)育與季節(jié)的關(guān)系

將樣本按開(kāi)展試驗(yàn)的季節(jié)進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)夏季多卵泡發(fā)育發(fā)生率最高，而冬季最低，但各季節(jié)間差異不顯著（P>0.05）（表4）。

3?討論

在牛的直腸檢查操作中，有一些關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)只能依靠操作者的經(jīng)驗(yàn)和感覺(jué)來(lái)完成，不同操作者間會(huì)存在判斷誤差。該試驗(yàn)采用B超技術(shù)來(lái)解決這些問(wèn)題具有很強(qiáng)的特異性和實(shí)用性[2-3]。

水牛是單胎動(dòng)物，一次發(fā)情只排出1枚卵子。該試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)6.43%（42/653）的母水牛在同期發(fā)情處理后出現(xiàn)多卵泡發(fā)育現(xiàn)象（Φ≥9 mm），排卵率為69.70%（24/33），與陳明棠等[4]、馬會(huì)明[5]報(bào)道的同期發(fā)情試驗(yàn)的排卵率（72.88%、75%）差異不顯著（P<0.05）。該試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多排卵率為0.26%（1/384），出現(xiàn)概率極低，說(shuō)明“促黃體素釋放激素A3+氯前列醇”處理方案沒(méi)有造成母水牛排卵異常，表明水牛的雙胎現(xiàn)象與同期發(fā)情處理沒(méi)有必然關(guān)聯(lián)。

姚曉磊等[6]研究了卵泡發(fā)育相關(guān)基因在牛發(fā)情周期內(nèi)第一卵泡波中優(yōu)勢(shì)卵泡（dominant follicles，DF）和從屬卵泡（subordinate follicles，SF）顆粒細(xì)胞中的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)與卵泡發(fā)育相關(guān)基因（SFRP2、CPEB1、PRKAG2、MAPK8、PPP2R2A和PRSS23）在DF和SF中都有不同程度表達(dá)，其中CPEB1和PRKAG2對(duì)卵泡的發(fā)育可能有促進(jìn)作用，SFRP2和MAPK8對(duì)卵泡的發(fā)育可能有抑制作用。

Messer等[7]報(bào)道了視黃酸受體（rretinoic acid receptor，RAR）基因在法國(guó)超高產(chǎn)仔大白豬中窩產(chǎn)仔數(shù)平均加性效應(yīng)是每窩增加0.21頭，在法國(guó)對(duì)照大白豬中則是每窩增加0.14頭。郭曉紅等[8]發(fā)現(xiàn)RARG基因CC基因型小尾寒羊平均產(chǎn)羔數(shù)比CD基因型多0.55只（P<0.05）。張路培等[9]研究了生長(zhǎng)分化因子 9（growth differentiation factor 9，GDF9）基因的遺傳變異與牛雙胎性狀的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)在魯西牛中GDF9基因的3UTR出現(xiàn)缺失突變，單胎牛群體與雙胎牛群體基因型分布有極顯著差異（P=0.006），雙胎牛群體的B等位基因頻率明顯大于單胎牛群體。黃萌等[10]將魯西牛群體的視黃素X受體基因（retinoid X receptorgamma，RXRG）A1941G位點(diǎn)的基因型效應(yīng)與雙胎性狀進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)基因型分布在魯西單、雙胎牛群體上存在極顯著差異（P<0.01），表明基因型對(duì)牛雙胎現(xiàn)象有較大影響，但并未發(fā)現(xiàn)基因型效應(yīng)與雙胎性狀相關(guān)，且在其他品種群體中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)類(lèi)似現(xiàn)象。

該研究試驗(yàn)對(duì)象來(lái)自廣西區(qū)內(nèi)數(shù)個(gè)奶水牛場(chǎng)牛群，經(jīng)同期化處理后有0.26%（1/384）的多排卵現(xiàn)象，但沒(méi)有出現(xiàn)雙胎，而水牛雙胎性狀是否存在關(guān)聯(lián)基因型則有待進(jìn)一步研究。

4?結(jié)論

奶水牛經(jīng)同期化處理后出現(xiàn)6.43%的多卵泡發(fā)育現(xiàn)象，但只有0.26%形成多排卵，多卵泡發(fā)育水牛的排卵率與單優(yōu)勢(shì)卵泡發(fā)育水牛的排卵率差異不顯著，沒(méi)有出現(xiàn)多胎情況。多卵泡發(fā)育與品種、季節(jié)、年齡等因素?zé)o關(guān)。

參考文獻(xiàn)

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