李福偉 朱連勤 李安平 陳甫

摘? 要：本文旨在對疑似霉變飼料致蛋雞產(chǎn)蛋率下降的原因進(jìn)行診斷。通過臨床癥狀觀察和病理剖檢初步診斷疑似霉變飼料引起蛋雞產(chǎn)蛋率下降，應(yīng)用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對飼料中黃曲霉毒素B1（AFB1）、煙曲霉毒素B1（FB1）、嘔吐毒素（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）的含量進(jìn)行檢測，并通過細(xì)菌和霉菌培養(yǎng)檢測飼料中的大腸桿菌、沙門氏菌和霉菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蛋雞產(chǎn)蛋率下降約3%，口腔粘膜和眼睛周圍潰瘍，腹瀉;剖檢可見小腸點(diǎn)狀出血;飼料中AFB1、FB1、DON和ZEN含量依次為1.79μg/kg、1380μg/kg、3.08mg/kg和228μg/kg，DON高于國家限量標(biāo)準(zhǔn);每克飼料中霉菌含量為1.7×105個，高于國家限量標(biāo)準(zhǔn)2.8倍。因此，確診蛋雞產(chǎn)蛋率下降為飼料霉變引起。

關(guān)鍵詞：蛋雞;霉變飼料;霉菌毒素;霉菌;

中圖分類號：S858.31? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C? ? 文章編號：1673-1085（2019）11-0030-03

飼料中霉菌的大量生長繁殖會導(dǎo)致飼料發(fā)生霉變，影響飼料的適口性，降低飼料品質(zhì)、動物的采食量和生產(chǎn)性能[1～3]。畜禽霉變飼料中毒的癥狀往往不明顯，主要表現(xiàn)為皮膚和口腔潰瘍，外陰紅腫、乳頭腫大，不孕、假孕與流產(chǎn)，肺水腫和胸膜腔積水，腹瀉等[4～6]。然而，臨床上畜禽霉變飼料中毒往往難以診斷，且常被人們所忽視[7～9]。2019年，青島某蛋雞場蛋雞產(chǎn)蛋率下降，我們通過臨床癥狀觀察和病理剖檢初步診斷為飼料霉變引起，經(jīng)霉菌毒素檢測、霉菌培養(yǎng)和SPF雞飼喂試驗(yàn)確診?，F(xiàn)將診斷情況如下。

1? 基本情況

1.1? 發(fā)病情況? 2019年6月，青島某蛋雞場5000羽蛋雞，采食減少，產(chǎn)蛋率下降大約3%，零星死亡，蛋殼變薄。

1.2? 病史調(diào)查? 雞群飼養(yǎng)期間常規(guī)免疫，雞場新進(jìn)一批飼料飼喂后，雞群緩慢發(fā)病，采食減少，體重下降，產(chǎn)蛋率下降，啄肛;使用抗生素和抗病毒藥聯(lián)合治療后，并無明顯效果。

1.3? 臨床癥狀? 病雞雞冠、顏面皮膚潰瘍（圖1），比例大約占10%;輕度腹瀉，糞中含有不消化的飼料顆粒;打開口腔發(fā)現(xiàn)口腔粘膜潰瘍，表層覆蓋一層淡黃色痂膜，比例約20%，見圖2;蛋殼質(zhì)量下降，血斑蛋和沙殼蛋增多。

1.4? 病理剖檢? 挑選皮膚和口腔有潰瘍的蛋雞解剖發(fā)現(xiàn)，口腔中腭、舌和頰面部有潰瘍灶，表面有一層黃白色壞死性痂膜覆蓋;氣囊有淺黃色結(jié)節(jié);肝臟腫脹、發(fā)黃，質(zhì)脆易碎;腸道粘膜點(diǎn)狀出血，見圖3。

2? 飼料霉菌毒素檢測

采集飼料送至青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)代謝病與中毒病研究室，應(yīng)用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對飼料中黃曲霉毒素B1（AFB1）、煙曲霉毒素B1（FB1）、嘔吐毒素（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）的含量進(jìn)行檢測，結(jié)果如表1所示。與國家限量標(biāo)準(zhǔn)（GB13078-2017）對比，AFB1、 ZEN和FB1低于限量標(biāo)準(zhǔn)，接近限量標(biāo)準(zhǔn)，DON高于限量標(biāo)準(zhǔn)。

3? 細(xì)菌與霉菌培養(yǎng)

取霉變飼料5g，加無菌生理鹽水至50mL，充分振搖混合，制成1：10懸液，取0.1mL接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，分別于28℃和37℃的恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上無大腸桿菌和沙門氏菌生長，在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生成大量白色表面粗糙且菌絲呈白色棉絮狀的大菌落和白色透明表面光滑的小菌落，見圖4;挑取菌落鏡檢鑒定，結(jié)合菌落形態(tài)初步判定大菌落為曲霉菌，小菌落為芽孢桿菌。每克飼料中曲霉菌含量為1.7×105個，高于國家限量標(biāo)準(zhǔn)（GB13078-2017）2.8倍。

4? 診斷與治療

經(jīng)臨床癥狀、剖檢變化、飼料霉菌毒素和霉菌檢測的結(jié)果，確診為飼料霉變導(dǎo)致的蛋雞產(chǎn)蛋率下降。建議蛋雞養(yǎng)殖戶立即更換飼料，多維素添加加倍，1周后回訪，蛋雞采食量、蛋殼質(zhì)量和產(chǎn)蛋率回升，腹瀉減少。

5? 討論

本文通過臨床癥狀觀察、病理剖檢、霉變飼料檢測，最終確診了這例蛋雞產(chǎn)蛋率下降的原因是由于飼料霉變導(dǎo)致。首先，病例出現(xiàn)了眼部周圍和冠等無毛區(qū)的潰瘍、口腔潰瘍、腹瀉等;其次，蛋雞霉變飼料中毒剖檢病變主要表現(xiàn)為腸道和肝臟出血，其他的臟器并無明顯變化;通過飼喂蛋雞霉變飼料后，蛋雞也表現(xiàn)出肝臟變性出血和腸道點(diǎn)狀出血;第三，飼料中霉菌的含量發(fā)現(xiàn)曲霉菌超標(biāo)2.8倍，而飼料中ZEN的含量接近限量標(biāo)準(zhǔn)，DON的含量高于限量標(biāo)準(zhǔn)。通過以上診斷，我們認(rèn)為飼料霉變導(dǎo)致了霉菌含量超標(biāo)，引起了蛋雞采食下降，腹瀉，產(chǎn)蛋率下降;而較高的霉菌毒素會對粘膜產(chǎn)生損傷，導(dǎo)致皮膚和口腔粘膜潰瘍的發(fā)生，同時與霉菌共同作用引起霉菌性口炎。因此，我們認(rèn)為本病例中蛋雞出現(xiàn)的皮膚和口腔粘膜的潰瘍是霉菌及嘔吐毒素超量共同作用的結(jié)果。

總之，霉變飼料中毒是霉菌及其毒素共同作用的結(jié)果，在臨床上缺乏典型的癥狀和病變，診斷起來較困難;把好飼料質(zhì)量關(guān)和在飼料中添加吸附劑是防治本病的主要措施。

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Diagnosis of Feed Mildew Resulting in Decline of Laying Rate

LI Fuwei1，ZHU Lianqin2，LI Anping， CHEN Fu2

（1.Institute of Poultry Research，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan 250023，China;

2.College of Animal Science and Veterinary Medicine， Qingdao Agricultural University， Qingdao 266109， China;3.Baiaoming feed additive （Shanghai） Co.， Ltd，Shanghai 201800，China）

Abstract：To diagnose the declined reasons of laying rate caused by mildew poisoning in laying hens.By observing the clinical symptoms and the anatomy，the decline of laying rate in laying hens were initially diagnosed as the mildew poisoning; aflatoxin B1 （AFB1）， zearalenone （ZEN）， fumonisin B1 （FB1） and deoxynivalenol （DON） were determined by HPLC-MS/MS， E.coli， salmonella and mould were determined by cultivating methods，the clinical symptoms and the anatomy were observed. The results showed that the major symptoms of the laying hens included the laying rate declined by 3%，ulcer in oral mucosa and around the eyes，diarrhea，and the dotted hemorrhage in intestine. Concentrations of AFB1， FUMB1，DON and ZEN were 1.79，1380，3.08 and 228 μg/kg in feed， which were lower than the national limits;The fungus content was 1.7×105 per gram， which was 2.8 times higher than the national standard.It is concluded that the decline of laying rate in hens were diagnosed as the feed mildew.

Key words： laying hens; mildew feed; mycotoxins□