王小燕，強(qiáng)新晨

（1.無(wú)錫市錫山醫(yī)院鵝湖分院檢驗(yàn)科；2.無(wú)錫市人民醫(yī)院輸血科，江蘇 無(wú)錫 214116）

輸血在臨床診療過(guò)程中較為常見,主要應(yīng)用于手術(shù)、低血容量休克以及貧血患者，能夠及時(shí)補(bǔ)充患者機(jī)體血容量,有助于維持機(jī)體正常的血氧供應(yīng),在臨床多種疾病診治過(guò)程中占有重要地位[1]。受到輸血技術(shù)操作不當(dāng)、血型不符以及血液制品出現(xiàn)問(wèn)題等多種因素影響,使得輸血反應(yīng)在臨床中較為常見，主要包括發(fā)熱反應(yīng)、過(guò)敏反應(yīng)，較嚴(yán)重的表現(xiàn)為溶血反應(yīng)，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，應(yīng)予以重視[2]。因此，采取適宜的手段，進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配曲，對(duì)降低輸血反應(yīng)，提高輸血安全性尤為重要。以往臨床常采用鹽水試管檢測(cè)技術(shù)及凝聚胺法進(jìn)行血型及交叉配血檢查,雖然具有一定的臨床診斷價(jià)值,但該種檢測(cè)技術(shù)不能夠敏感檢出不完全抗體情況,影響交叉配血檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度及輸血過(guò)程的安全性[3-4]。隨著臨床技術(shù)發(fā)展與創(chuàng)新，交叉配血方法研究也取得一定進(jìn)步，其中就包括微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù),該種檢測(cè)技術(shù)在臨床鑒定血型及輸血的過(guò)程中有一定的診斷價(jià)值，但目前臨床上在這方面研究尚少。本次實(shí)驗(yàn)特選擇經(jīng)本院診療需要進(jìn)行輸血治療的患者為研究對(duì)象，采用不同的交叉配血檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢查，意在研究微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)在鑒定血型及輸血的過(guò)程中的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2015年11月-2017年11月期間來(lái)我院診療需要進(jìn)行輸血的患者選為研究病例,隨機(jī)選取148例輸血患者分別采用不同的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血,根據(jù)檢測(cè)方法不同分成鹽水試管組及微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血。輸血患者納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴思維感受方面正常，簽署了知情同意書；⑵具備完善的臨床資料，其能夠較好的配合完成研究及相關(guān)檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴認(rèn)知功能障礙者及依存性差無(wú)法完成本研究者；⑵不能完成治療療程或不愿參加本研究者。供血者健康人群納入標(biāo)準(zhǔn)：近期未出現(xiàn)呼吸道或泌尿系統(tǒng)等感染情況，無(wú)藥物及食物等過(guò)敏史。輸血患者中，男性患者75例，女性患者73例；年齡24～68歲，平均年齡(36.83±3.67)歲；是否有過(guò)輸血史：有輸血史26例，無(wú)輸血史122例。供血者中，男性77例，女性71 例；年齡 19～41 歲，平均年齡(31.84±3.54)歲。 經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，本組研究開始實(shí)施，研究目的、治療方法均被患者及其家屬了解，臨床資料不公開,保證了其隱私性。兩組研究對(duì)象的基線資料比較均衡性較好,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。

1.2 方法 所有血液標(biāo)本分別給予微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)及鹽水試管法檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血檢查。微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢查，血型鑒定方法：醫(yī)務(wù)人員采取靜脈血后，常規(guī)分離輸血患者的血液樣本，在4攝氏度環(huán)境下保存血清，立即送檢，取6支分別標(biāo)注 A、B、C、D、E、F 的凝膠微管,完成后將 0.5%紅細(xì)胞懸液分別滴入A～D管，并將血清以及已知血型的A型及B型的0.5%紅細(xì)胞懸液分別滴入E、F管，采用3000r/min離心5min，由醫(yī)務(wù)人員根據(jù)檢查結(jié)果進(jìn)行肉眼比對(duì)。交叉配血方法：醫(yī)務(wù)人員常規(guī)分離供血者及受血者的血液標(biāo)本,完成后并配置成1%紅細(xì)胞懸液，取2支分別標(biāo)注主側(cè)以及次側(cè)的凝膠微管,將50μl供血者紅細(xì)胞懸液及受血者樣本滴入主側(cè)凝膠微管,并將50μl受血者紅細(xì)胞懸液及供血者樣本滴入次側(cè)凝膠微管，在37℃孵育15min，采用3000r/min離心5min離心，醫(yī)務(wù)人員采用肉眼對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。鹽水試管組采用鹽水試管檢測(cè)技術(shù)及凝聚胺法進(jìn)行檢查。血型鑒定方法：參照鹽水試管法檢測(cè)操作規(guī)程進(jìn)行血型鑒定，同時(shí)給予陰性對(duì)照管，以便能夠排除冷凝集。交叉配血方法：采用凝聚胺法進(jìn)行檢測(cè)，常規(guī)分離供血者及受血者的血液標(biāo)本,完成后并配置成5%紅細(xì)胞懸液,進(jìn)行凝集主次側(cè)凝集試驗(yàn)，采用肉眼對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察兩組不同檢查方法的檢測(cè)結(jié)果,計(jì)算血型鑒定正反定型相符的符合率和交叉配血相合成功率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用spss20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)表中數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用表示計(jì)量資料，用檢驗(yàn)比較計(jì)數(shù)資料，采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，采用雙側(cè)檢驗(yàn)所有統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血型鑒定檢驗(yàn)結(jié)果的差異 微柱凝膠免疫組微住凝膠免疫檢測(cè)血型鑒定檢查結(jié)果的正反定型符合率與鹽水試管組鹽水試管法正反定型符合率結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 觀察兩組患者交叉配血檢驗(yàn)結(jié)果的差異 微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫法檢測(cè)的交叉配血不合率高于鹽水試管組凝聚胺法檢測(cè)的交叉配血不合率，差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 兩組血型鑒定檢驗(yàn)結(jié)果的差異[n（%）]

表2 觀察兩組交叉配血檢驗(yàn)結(jié)果的差異[n（%）]

3 討論

輸血治療是臨床常見治療手段，受患者體質(zhì)、多次輸血以及輸血操作等多種因素影響，輸血反應(yīng)較為常見，患者會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、過(guò)敏以及溶血等不良反應(yīng)。因此，為了降低輸液反應(yīng)發(fā)生情況，進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血顯得尤為重要。

以往臨床常采用鹽水試管檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血型鑒定,該種檢測(cè)方法對(duì)血型鑒定檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性較高,但隨著鹽水試管檢測(cè)技術(shù)在臨床中廣泛應(yīng)用，其不足之處也逐漸體現(xiàn)出來(lái)[5]。主要表現(xiàn)在鹽水試管檢測(cè)技術(shù)操作步驟簡(jiǎn)單,能夠較快速出結(jié)果，不影響臨床輸血治療進(jìn)行,但相關(guān)研究顯示，將其應(yīng)用于IgM抗體引起的價(jià)差配血不合準(zhǔn)確率尚可,而對(duì)IgG抗體引起的較差配血不合會(huì)漏診，影響臨床工作效率[6-7]。隨著臨床技術(shù)的快速進(jìn)步，血型鑒定的檢測(cè)方法也有一定發(fā)展,微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)引起醫(yī)務(wù)人員的廣泛關(guān)注,該種檢測(cè)方法利用凝膠微柱分子層析原理,使得體積較小的紅細(xì)胞先通過(guò)凝膠間隙,并與不規(guī)則的抗體進(jìn)行有效結(jié)合,得以完成血型鑒定[8-9]。微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)能夠有效提高紅細(xì)胞與不規(guī)則抗體的結(jié)合情況，有較好的敏感度,使得血型鑒定結(jié)果的正反定型符合率較高，可以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[10]。本次研究結(jié)果顯示,微柱凝膠免疫組患者檢查結(jié)果的正反定型符合率與鹽水試管組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果說(shuō)明，微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)對(duì)血型鑒定的檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性與鹽水試管法的準(zhǔn)確度，大致相同，但相關(guān)調(diào)查研究顯示[11]，與鹽水試管檢查技術(shù)相比,微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)整個(gè)流程操作標(biāo)準(zhǔn)化，需要樣本量較少，應(yīng)用于血型鑒定的臨床應(yīng)用價(jià)值較優(yōu)。

以往臨床常采用凝聚胺法進(jìn)行交叉配血檢測(cè)，雖然該種檢測(cè)手段可以快速檢測(cè)出配血結(jié)果，但操作步驟也相對(duì)較多,需要添加的溶液種類也較多，使得檢測(cè)手段相對(duì)復(fù)雜[12]。凝聚胺溶液釋放大量正電荷,使得紅細(xì)胞下降進(jìn)而發(fā)生非特異性凝集，再滴入枸緣酸鈉，觀察凝集是否散開，對(duì)配血結(jié)果進(jìn)行判斷[13]。凝聚胺法檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性較好,特別是對(duì)于IgM和IgG抗體引起的配血不合的檢測(cè)，可以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[10]。但該種檢測(cè)方法也存在一定問(wèn)題,主要表現(xiàn)在凝聚胺法需要較好的操作技能,需要操作人員不僅嚴(yán)格按照流程進(jìn)行操作,同時(shí)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)要有較好的把握能力。同時(shí)，相關(guān)結(jié)果顯示[14]，凝聚胺法進(jìn)行交叉配血檢測(cè)的檢查結(jié)果易受到多種藥物以及肝素等影響，使得凝集的紅細(xì)胞散開，使其檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性而不準(zhǔn)確,不利于臨床診斷及緊急救治輸血。鹽水法及凝聚胺法檢測(cè)技術(shù)的檢查結(jié)果不易保存，也不易通過(guò)圖片保存，不利于臨床工作的記錄,在一定程度上會(huì)造成血液樣本不必要的浪費(fèi)。微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)利用生物凝膠過(guò)濾原理，使紅細(xì)胞表現(xiàn)發(fā)生抗原抗體結(jié)合,從而增大紅細(xì)胞體積,讓配對(duì)血型凝集的紅細(xì)胞不能夠通過(guò)凝膠間隙，留在凝膠微管中上部，反之配型不符的紅細(xì)胞沉積于凝膠微管底部[15-16]。微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)不受藥物、低濃度抗體等因素影響，而是通過(guò)抗體球蛋白與試劑中抗體特異性結(jié)合的生物學(xué)原理進(jìn)行檢查，該種檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，流程標(biāo)準(zhǔn)化，能夠減少血液樣本被污染，安全性較好，同時(shí)該種檢測(cè)手段特異性較好，檢測(cè)結(jié)果較為穩(wěn)定，準(zhǔn)確率較高[17]。本次結(jié)果顯示,微柱凝膠免疫組交叉配血成功率高于鹽水試管組,差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果說(shuō)明，與凝聚胺檢測(cè)方法相比，采用微住凝膠免疫法檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行交叉配血檢查，檢測(cè)結(jié)果交叉配血成功率較高,說(shuō)明檢查結(jié)果的穩(wěn)定性較好,不會(huì)受到藥物及其他物質(zhì)影響而出現(xiàn)假陽(yáng)性，有較優(yōu)的參考意義。與鹽水試管法及凝聚胺法相比，采用微柱凝膠免疫法檢測(cè)技術(shù)能夠同時(shí)進(jìn)行血型鑒定及交叉配血檢查，操作步驟簡(jiǎn)單，需要血液樣本相對(duì)較少；能夠有效檢測(cè)出是否存在不規(guī)則抗體，有較好的血型鑒定結(jié)果準(zhǔn)確性[18-19]；同時(shí),微柱凝膠免疫法檢測(cè)技術(shù)能夠更加準(zhǔn)確的檢查出供血者與受血者配血不合情況,有助于減少溶血反應(yīng)的不良輸液反應(yīng)，提高輸液過(guò)程的安全性，提高臨床工作質(zhì)量[20]。本次實(shí)驗(yàn)受到研究時(shí)間以及研究對(duì)象的限制，存在一定局限性，同時(shí)，血型鑒定及交叉配血等各項(xiàng)檢查操作技術(shù)存在細(xì)致差異，對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生一定的影響,需要增加研究樣本數(shù)量，對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步補(bǔ)充及完善。

綜上所述,采用微柱凝膠免疫法檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血型鑒定及交叉配血檢查，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性較好，有較高的準(zhǔn)確性，有助于提高臨床輸血的安全性，對(duì)臨床診斷有較優(yōu)的應(yīng)用價(jià)值。