顧文亮 莊輝發(fā) 王輝 張建禹 覃永蘭 張翠玲 秦曉威 譚樂(lè)和

摘 ?要 ?鷓鴣茶是具有海南地方和民族特色的代茶飲料植物和藥用植物，已開(kāi)發(fā)成為廣受歡迎的特色旅游產(chǎn)品，但大規(guī)模的人為無(wú)序開(kāi)發(fā)對(duì)野生資源造成了極大的破壞。通過(guò)對(duì)海南野生鷓鴣茶進(jìn)行資源調(diào)查、收集保存和保護(hù)利用等研究，結(jié)果表明：在海南全省10個(gè)市縣共13個(gè)調(diào)查地點(diǎn)中，僅2個(gè)地點(diǎn)的野生鷓鴣茶基本未受到人工影響，其余地點(diǎn)的野生植株長(zhǎng)勢(shì)較弱，人為破壞較嚴(yán)重，部分生境已受到人工開(kāi)墾的影響;先后收集保存285份鷓鴣茶種質(zhì)資源，并在異地建設(shè)種質(zhì)資源圃安全保存;對(duì)收集保存的285份資源進(jìn)行5個(gè)描述性狀和6個(gè)數(shù)值性狀的植物學(xué)鑒定評(píng)價(jià)，其中描述性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為0.69～1.74，數(shù)值性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為1.93～2.11，說(shuō)明收集保存的鷓鴣茶種質(zhì)具有豐富的遺傳多樣性。本研究可為人工培育優(yōu)良鷓鴣茶無(wú)性品系提供了資源基礎(chǔ)和評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞 ?鷓鴣茶;資源調(diào)查;收集保存;遺傳多樣性

中圖分類(lèi)號(hào) ?S326 ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ?A

Abstract ?Mallotus oblongifolius is a substitute tea beverage plant and medicinal plant with local and national characteristics in Hainan. It has been developed as a popular tourism product now. But large-scale development and utilization of wild Mallotus oblongifolius without plan has caused great damage to its germplasm resources. Wild resources investigation， collection and conservation as well as evaluation of M. oblongifolius were carried out in this research. The results showed that among the 13 survey locations in 10 cities of Hainan， wild M. oblongifolius grown in only 2 locations were not artificially affected. The growth of M. oblongifolius in the other sites were destructed artificially. Total 285 germplasm resources of M. oblongifolius were collected and safely preserved in different places. Botanical identification and evaluation of 5 descriptive traits and 6 numerical traits were carried out on these 285 germplasm resources. The variation range of diversity index of descriptive traits was 0.69～1.74 and the variation range of diversity index of numerical traits was 1.93～2.11， which indicating that the collected and preserved germplasms had rich genetic diversity. This research would provide resource basis and evaluation data for artificial breeding of excellent M. oblongifolius cultivars.

Keywords ?Mallotus oblongifolius （Miq.） Müll. Arg; resources investigation; collection and conservation; genetic diversity

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.11.023

鷓鴣茶[Mallotus oblongifolius （Miq.） Müll. Arg]是大戟科（Euphorbiaceae）野桐屬的多年生常綠灌木或小喬木[1]。鷓鴣茶又名山苦茶和五月茶，是深受海南當(dāng)?shù)匕傩障矏?ài)的特色地方茶，在?？?、文昌、瓊海、萬(wàn)寧、陵水、三亞、瓊中、保亭、五指山、樂(lè)東和東方等地均有野生植株分布[2]。據(jù)文獻(xiàn)記載，鷓鴣茶在我國(guó)廣東、廣西等?。ㄗ灾螀^(qū)），以及中印半島和蘇門(mén)答臘島等國(guó)也有分布，但未見(jiàn)有作為特色茶飲用的記錄[3]。鷓鴣茶葉片曬干或風(fēng)干后具有零陵香氣，沖泡飲用時(shí)有淡淡的藥香味[4]，海南當(dāng)?shù)厝顺⑵溆米鼋庥湍仭⒅?、清熱消暑和止渴生津的老爸茶。鷓鴣茶富含茶多糖、茶多酚、沒(méi)食子酸和多酚類(lèi)等多種有效成分[5]，具有清除氧自由基[6]、抗動(dòng)脈粥樣硬化[7]、促進(jìn)膽汁分泌[8]、抑制病菌活性[9]、抗疲勞衰老[10]與鎮(zhèn)靜止痛[11]等功效。當(dāng)前，海南地方企業(yè)將鷓鴣茶精深加工成復(fù)配茶[12]、涼茶飲料[13]或速溶茶粉[14]等產(chǎn)品，已成為廣受歡迎的海南特色旅游產(chǎn)品。

鷓鴣茶在海南已有悠久的飲用歷史，傳統(tǒng)上用來(lái)制茶的原料均是取自野生植株，鮮有人工種植，海南地方企業(yè)加工鷓鴣茶產(chǎn)品的原料亦是完全依賴(lài)野生資源。近年來(lái)，隨著海南自由貿(mào)易區(qū)（港）的持續(xù)建設(shè)和鷓鴣茶加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展壯大，長(zhǎng)期的人工無(wú)序采摘對(duì)野生鷓鴣茶資源造成了嚴(yán)重的破壞，大規(guī)模的山林地開(kāi)發(fā)也對(duì)其生境產(chǎn)生了較大的影響，對(duì)鷓鴣茶種質(zhì)資源進(jìn)行收集保存和創(chuàng)新利用是解決當(dāng)前問(wèn)題的唯一途徑。本研究旨在通過(guò)對(duì)海南野生鷓鴣茶開(kāi)展資源調(diào)查、收集保存和保護(hù)利用等方面的工作，摸清野生鷓鴣茶的生長(zhǎng)狀況，同時(shí)在異地建設(shè)種質(zhì)資源圃保存野生鷓鴣茶資源，并對(duì)收集保存的野生鷓鴣茶資源進(jìn)行植物學(xué)性狀的鑒定評(píng)價(jià)，為人工培育優(yōu)良鷓鴣茶無(wú)性品系提供了資源基礎(chǔ)和評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

供試鷓鴣茶來(lái)源于海南全島各市縣資源調(diào)查中發(fā)現(xiàn)的野生植株，收集的枝條通過(guò)扦插繁育成苗[15]，經(jīng)統(tǒng)一編號(hào)后定植于種質(zhì)資源圃中，用于植物學(xué)鑒定評(píng)價(jià)的試驗(yàn)材料均采自種質(zhì)資源圃?xún)?nèi)收集保存的種質(zhì)。

1.2 ?方法

1.2.1 ?資源調(diào)查方法 ?對(duì)海南多個(gè)市縣進(jìn)行野生鷓鴣茶的資源調(diào)查，拍照記錄野生植株，并詳細(xì)記錄其生長(zhǎng)情況、生物學(xué)特征和生態(tài)習(xí)性。同時(shí)，詳細(xì)記錄調(diào)查地點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)植物種類(lèi)、生長(zhǎng)情況和分布類(lèi)別，并拍照記錄植株主要特征。優(yōu)勢(shì)植物種類(lèi)鑒定為利用照片對(duì)比等方法，參考相關(guān)資料對(duì)植物種類(lèi)進(jìn)行鑒定和歸屬[16]。

1.2.2 ?種質(zhì)保存方法 ?將采集鷓鴣茶植株的健康枝條經(jīng)扦插繁育后成苗，成苗的植株經(jīng)統(tǒng)一編號(hào)后定植于中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院香料飲料研究所高龍?jiān)囼?yàn)示范基地內(nèi)的鷓鴣茶種質(zhì)資源圃中。野生鷓鴣茶資源在種質(zhì)資源圃中存活后，分別對(duì)每份資源編號(hào)并繪制田間分布圖，同時(shí)對(duì)每份資源的成熟葉片進(jìn)行圖像采集。

1.2.3 ?資源評(píng)價(jià)方法 ?對(duì)鷓鴣茶資源的葉片形狀、葉片顏色、葉柄顏色、葉片鋸齒和植株性別等描述性狀和葉柄長(zhǎng)、葉片長(zhǎng)、葉片寬、葉片長(zhǎng)寬比、葉片周長(zhǎng)和葉片面積等數(shù)值性狀進(jìn)行植物學(xué)的多樣性評(píng)價(jià)。每份鷓鴣茶資源隨機(jī)取3個(gè)植株，每個(gè)植株按照統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)至少取10片成熟葉片，利用LA-S植物圖像分析儀對(duì)葉片進(jìn)行數(shù)值性狀的測(cè)量;并對(duì)葉片顏色、葉片形狀和植株性別等描述性狀進(jìn)行觀(guān)察記錄。

1.2.4 ?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法 ?根據(jù)香農(nóng)多樣性指數(shù)（Shannon's diversity index）的分析方法，人為將描述性狀按照1～6級(jí)賦值進(jìn)行記錄，描述性狀根據(jù)平均值（X）和標(biāo)準(zhǔn)差（δ）分為10級(jí)，1級(jí)

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?資源調(diào)查

2.1.1 ?野生資源調(diào)查 ?從2015年1月至2018年1月，前往海南省海口、瓊中、萬(wàn)寧、保亭、定安、瓊海、東方、白沙、樂(lè)東和陵水等10個(gè)市縣進(jìn)行野生鷓鴣茶的資源調(diào)查，每個(gè)調(diào)查地點(diǎn)至少考察2個(gè)以上野生居群，共計(jì)在10個(gè)市縣的不同

地域采集285份鷓鴣茶資源（表1）。在13個(gè)調(diào)查地點(diǎn)中，僅2個(gè)地點(diǎn)的野生鷓鴣茶植株健壯，生長(zhǎng)良好，基本未受到人工影響，占比15.38%;8個(gè)地點(diǎn)的野生鷓鴣茶植株瘦弱矮小，有枯枝葉，長(zhǎng)勢(shì)較弱，受到較嚴(yán)重的人為采摘影響，占比61.54%;3個(gè)地點(diǎn)的野生鷓鴣茶植株?duì)I養(yǎng)狀態(tài)較差，少有綠葉，人為破壞嚴(yán)重，占比23.08%。

2.1.2 ?野生生境調(diào)查 ?資源調(diào)查的野生鷓鴣茶分布在海拔50～500 m之間的生境中，野生生境中以巖石居多，土壤以砂壤土和黃壤土為主。低海拔的野生生境中，鷓鴣茶多生長(zhǎng)在山林緩坡地帶或溝谷巖石灘邊緣，植被較少，人為開(kāi)墾較嚴(yán)重，在調(diào)查中可見(jiàn)檳榔（Areca catechu）、椰子（Cocos nucifera）、巴西橡膠（Hevea brasiliensis）和柊葉（Phrynium capitatum）等人工種植作物。高海拔的野生生境中，鷓鴣茶多生長(zhǎng)在山林溝谷或叢林小溪的兩岸，生境的腐殖質(zhì)積累較多，環(huán)境潮濕，植被較茂盛，生境植被多為熱帶低地雨林。根據(jù)調(diào)查，鷓鴣茶野生生境中的優(yōu)勢(shì)植物共有16個(gè)科，涉及29種植物，植物名錄詳見(jiàn)表2。

2.2 ?異地建圃保存資源

將在10個(gè)市縣采集的285份鷓鴣茶資源的健康枝條，扦插繁育成苗后分別編號(hào)進(jìn)行野生資源的異地保存，分批定植在中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院香料飲料研究所六甲基地?；匚挥诤Ｄ鲜∪f(wàn)寧市南橋鎮(zhèn)高龍村，內(nèi)部建設(shè)有鷓鴣茶種質(zhì)資源圃，種質(zhì)圃主要用于開(kāi)展鷓鴣茶種質(zhì)資源的收集保存、鑒定評(píng)價(jià)、創(chuàng)新利用和種苗繁育等方面研究，見(jiàn)圖1。鷓鴣茶種質(zhì)資源圃占地約0.35 hm2，每份資源定植5株，截至2018年12月，鷓鴣茶種質(zhì)資源圃已保存資源285份。

2.3 ?資源的植物學(xué)性狀評(píng)價(jià)

根據(jù)對(duì)鷓鴣茶種質(zhì)資源成熟葉片的圖像采集（圖2），可見(jiàn)在葉片的形狀、大小和顏色等方面有著較為豐富的多樣性，為便于對(duì)鷓鴣茶種質(zhì)資源進(jìn)行植物學(xué)性狀的鑒定評(píng)價(jià)，在描述性狀中選擇葉片顏色、葉柄顏色、植株性別、葉片鋸齒和葉片形狀等5個(gè)性狀進(jìn)行評(píng)價(jià)，在數(shù)值性狀中選擇葉柄長(zhǎng)、葉片長(zhǎng)、葉片寬、葉片長(zhǎng)寬比、葉片周長(zhǎng)和葉片面積等6個(gè)性狀進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2.3.1 ?描述性狀多樣性分析 ?對(duì)285份鷓鴣茶資源的5個(gè)描述性狀進(jìn)行分級(jí)和賦值，統(tǒng)計(jì)各個(gè)性狀的頻率并分別計(jì)算多樣性指數(shù)（表3）。根據(jù)表4可知，鷓鴣茶資源的描述性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為0.69～1.74，其中植株性別的多樣性指數(shù)最低（0.69），葉片顏色的多樣性指數(shù)最高（1.74）。收集保存的鷓鴣茶資源中葉片顏色、葉柄顏色和葉片鋸齒等3個(gè)性狀的多樣性指數(shù)大于1，而植株性別和葉片形狀等2個(gè)性狀的多樣性指數(shù)小于1。

根據(jù)表4可知，在收集保存的鷓鴣茶資源中，葉片顏色多為淺綠色（26.11%）、深綠色（19.87%）和綠色（18.37%）;葉柄顏色多為深綠色（29.39%）和綠色（26.63%）;葉片鋸齒多為稀（58.43%）和中（20.15%）;葉片形狀多為長(zhǎng)圓形（67.46%）和橢圓倒卵形（19.47%）;植株性別則是雄性（56.24%）多于雌性（43.76%）。

2.3.2 ?數(shù)值性狀多樣性分析 ?對(duì)285份鷓鴣茶資源的6個(gè)數(shù)值性狀進(jìn)行多樣性指數(shù)分析，根據(jù)表5可知，鷓鴣茶資源在數(shù)值性狀上存在不同的遺傳變異，變異系數(shù)介于13.04%～45.00%，其中變異系數(shù)最大的為葉片周長(zhǎng)（45.00%），變異系數(shù)最小的為葉片長(zhǎng)/寬（13.04%）。鷓鴣茶資源的數(shù)值性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為1.93～2.11，其中葉片周長(zhǎng)的多樣性指數(shù)最低（1.93），葉片長(zhǎng)的多樣性指數(shù)最高（2.11）。收集保存的鷓鴣茶資源中，葉片長(zhǎng)、葉片寬、葉片長(zhǎng)寬比和葉片面積等4個(gè)性狀的多樣性指數(shù)大于2，而葉柄長(zhǎng)和葉片周長(zhǎng)等2個(gè)性狀的多樣性指數(shù)小于2。

3 ?討論

鷓鴣茶是助推海南島區(qū)域經(jīng)濟(jì)發(fā)展的特色飲料植物，已經(jīng)被加工企業(yè)開(kāi)發(fā)成為多種特色旅游產(chǎn)品，鷓鴣茶產(chǎn)業(yè)也發(fā)展成為帶動(dòng)海南農(nóng)民脫貧致富的特色產(chǎn)業(yè)之一。但長(zhǎng)期以來(lái)，對(duì)鷓鴣茶野生資源的過(guò)度利用導(dǎo)致其種質(zhì)資源受到嚴(yán)重破壞，林海等[18]在1992年指出海南沿海山丘野生鷓鴣茶資源破壞十分嚴(yán)重，數(shù)量急劇減少;劉國(guó)民等[19]在2007年發(fā)現(xiàn)野生鷓鴣茶資源日趨減少的局面非但沒(méi)有得到緩解，反而有所加劇;楊虎彪等[20]在2017年對(duì)鷓鴣茶的生態(tài)學(xué)特性研究中亦指出海南東部沿海的野生鷓鴣茶居群退化十分嚴(yán)重，過(guò)度采摘導(dǎo)致自然居群快速衰退。這說(shuō)明對(duì)鷓鴣茶資源的全面保護(hù)已經(jīng)到了刻不容緩的程度，如不采取有效措施對(duì)野生資源進(jìn)行保護(hù)，部分性狀優(yōu)良的資源一旦消失將使得珍稀的遺傳資源無(wú)法復(fù)原。

針對(duì)鷓鴣茶種質(zhì)資源急劇減少、許多優(yōu)異種質(zhì)瀕臨消失的問(wèn)題，國(guó)內(nèi)有關(guān)科研人員開(kāi)展了鷓鴣茶種質(zhì)資源保存和人工馴化等方面的研究。李娟玲等[21]在2010年以保存在海南大學(xué)苦丁茶研究所內(nèi)的10個(gè)鷓鴣茶居群的種質(zhì)材料進(jìn)行ISSR標(biāo)記的引物篩選，供試的種質(zhì)材料主要來(lái)自于萬(wàn)寧、三亞、文昌和保亭等4個(gè)市縣;楊虎彪等[22]在2017年對(duì)幼齡期鷓鴣茶的需光生理特性進(jìn)行研究，以期為人工馴化栽培奠定基礎(chǔ)。本研究始于2015年，先后在3年多的時(shí)間內(nèi)對(duì)?？?、瓊中、萬(wàn)寧、保亭、定安、瓊海、東方、白沙、樂(lè)東和陵水等全省10個(gè)市縣共13個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行系統(tǒng)的鷓鴣茶野外資源調(diào)查，同時(shí)將收集285份種質(zhì)資源安全保存在鷓鴣茶種質(zhì)資源圃中。同時(shí)，本研究還對(duì)285份鷓鴣茶種質(zhì)資源開(kāi)展了5個(gè)描述性狀和6個(gè)數(shù)值性狀的植物學(xué)鑒定評(píng)價(jià)，其中描述性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為0.69～1.74，數(shù)值性狀的多樣性指數(shù)的變化范圍為1.93～2.11，這說(shuō)明本研究收集保存的鷓鴣茶種質(zhì)具有豐富的遺傳多樣性。筆者認(rèn)為下一步應(yīng)當(dāng)實(shí)施鷓鴣茶資源的異地保存和原生境保護(hù)相結(jié)合的策略，并進(jìn)一步加快種質(zhì)資源的收集保存、鑒定評(píng)價(jià)與開(kāi)發(fā)利用研究，選育出優(yōu)良鷓鴣茶無(wú)性品系并進(jìn)行規(guī)?；纳虡I(yè)種植，從而使得海南鷓鴣茶產(chǎn)業(yè)真正實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展。

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