顏運(yùn)秋，迂 斌，徐少勇,劉云鵬

（1.長(zhǎng)沙道勤生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410000；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院）

1 復(fù)養(yǎng)豬場(chǎng)洗消前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作

清洗前準(zhǔn)備：防護(hù)服、防護(hù)手套、眼鏡、面罩等；生石灰、燒堿、拳力巴斯德、凹凸巴斯德、過硫酸氫鉀、戊二醛類等消毒藥。

檢查豬場(chǎng)外部圍欄、圍墻，排水、糞污管線管道等，保證封閉運(yùn)行；洗消期間所有進(jìn)出豬場(chǎng)的人員務(wù)必通過檢查，執(zhí)行洗澡、消毒、更衣等程序；所有進(jìn)出豬場(chǎng)車輛務(wù)必徹底清洗、消毒，包括司機(jī)在內(nèi)的所有進(jìn)場(chǎng)人員更換場(chǎng)內(nèi)衣服、鞋，消毒液洗手，車內(nèi)腳墊、腳踏板等徹底洗消；所有的工作服當(dāng)天在場(chǎng)內(nèi)清洗，并在洗衣機(jī)內(nèi)加入消毒液。

2 復(fù)養(yǎng)場(chǎng)的消毒及清洗

對(duì)于復(fù)養(yǎng)場(chǎng)來說，豬舍及設(shè)施攜帶的病毒很多，如按正常洗消程序“清洗—消毒—干燥”的流程，很容易造成欄舍中檢不到病毒，復(fù)養(yǎng)很難成功的事實(shí)。因?yàn)樵谇逑催^程中，病毒就隨水流進(jìn)入并殘存于排污管道，而排污管道不可能做到全管道高濃度消毒水浸泡。所以對(duì)復(fù)養(yǎng)場(chǎng)必須進(jìn)行消洗而不是洗消。

實(shí)踐證明，3 次消洗法（消毒—清洗—干燥—再消毒—再清洗-再干燥—第3 次消毒—第3 次清洗—第3 次干燥）非常實(shí)用，可有效避免欄舍環(huán)境中病毒進(jìn)入污道等造成再次污染。

在消洗順序方面應(yīng)遵循水往低處流的原則，先消洗料線，水線，再欄舍，最后污道。最大程度避免了欄舍環(huán)境被病毒二次污染的風(fēng)險(xiǎn)。

2.1 料線、水線

拆卸所有料線，清潔后放置于2%燒堿中浸泡消毒24 h。拆卸所有飲水器和接頭等，放置于2%燒堿中浸泡消毒24 h。蓄水池或水塔維修、清洗、消毒。水線組裝好后，在蓄水池中添加敏感消毒劑，進(jìn)行在管道中浸泡，用水循環(huán)沖24 h。清空所有飼料庫存，用于喂魚、家禽，嚴(yán)禁復(fù)產(chǎn)再用。深度清洗料倉、料塔，之后用煙霧熏蒸產(chǎn)品進(jìn)行第一次處理，再拆除能拆卸的絞龍、管線等零件進(jìn)行消毒清理。間隔2周進(jìn)行第二次消毒處理。

2.2 水道

用敏感消毒劑如如意酸（1∶100倍稀釋），對(duì)所有水線、飲水器消毒24 h，然后放清水清洗。

2.3 通風(fēng)系統(tǒng)

風(fēng)機(jī)、水簾、控制器、傳感器等進(jìn)行消毒、洗刷干燥。

2.4 豬場(chǎng)全場(chǎng)消毒及清洗

豬場(chǎng)無害化清理完，必須對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)外、豬舍內(nèi)外的殘留垃圾及剩余物資清理、清場(chǎng)。徹底清理、清場(chǎng)后，對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)進(jìn)行全面、系統(tǒng)、不留死角的多種方式的清洗、消毒處理。場(chǎng)內(nèi)剩余原料、飼料、藥品、木制品、橡膠墊、工具、垃圾等進(jìn)行深埋或焚燒處理。然后再進(jìn)行豬舍內(nèi)外的消毒清洗。

2.5 豬欄：三消洗熏法

①拳力巴斯德泡洗（1∶200稀釋）→沖洗→拳力巴斯德泡洗（1∶200稀釋）→沖洗→ATP檢測(cè)（合格）→干燥（凹凸巴斯德干粉消毒（20 g/m2））→空置→熏蒸（高錳酸鉀32 g+福爾馬林64 ml/m3）→qPCR 檢測(cè)；②拳力巴斯德泡洗（1∶200稀釋）→沖洗→拳力巴斯德泡洗（1∶200 稀釋）→沖洗→ATP檢測(cè)（不合格）→泡洗→沖洗→ATP檢測(cè)→干燥（凹凸巴斯德干粉消毒（20 g/m2））→空置→熏蒸（高錳酸鉀32 g+福爾馬林64 ml/m3）→qPCR 檢測(cè)；③沖洗時(shí)建議按照1：5 000倍稀釋比例添加如意酸，以達(dá)到更徹底的清洗消毒效果；④熏蒸消毒：高錳酸鉀+福爾馬林，環(huán)境溫度應(yīng)保持20 ℃以上、相對(duì)濕度達(dá)到80%～90%，消毒作用才得以發(fā)揮。使用方法：比例為1∶2，先放入高錳酸鉀，高錳酸鉀16 g+福爾馬林32 ml/m3，放入瓷鍋中加熱煮沸24h直至將水蒸發(fā)耗干→密封72 h→然后開窗+風(fēng)機(jī)通風(fēng)48h；⑤路面白化配比：通常用其20%乳劑。具體配制方法是：取1 kg 石灰加1L 水生成熟石灰，將所得的熟石灰再加8L 水即成20%石灰乳。每平方米用1L石灰乳刷1～3次；具體推薦按照：2.5 kg火堿+10 kg生石灰+50 kg溫水，就可以配成20%生石灰乳+5%燒堿的成品，每平方米用1L 石灰乳刷1～3次；周圍50 m和道路全部噴白。每7 d噴白一次；⑥糞溝：用2.5 kg 火堿+50 kg 水,配成5%比例的溶液,進(jìn)行浸泡,每天添加1次，連用3 d。

2.6 豬舍內(nèi)設(shè)備、器具

清潔和消毒所有設(shè)備。豬欄等鐵制品進(jìn)行火焰消毒。對(duì)可浸泡的器具采用戊二醛等浸泡24 h消毒。將所有能拆卸的設(shè)備，如：豬欄、漏縫地板、產(chǎn)床隔離板、保溫箱、手推車、柜子、架子、門窗、燈具移至室外消毒清洗后置于室外晾曬。

2.7 豬舍內(nèi)外墻及通道、地面

先噴灑復(fù)合戊二醛，之后大掃除，之后涂抹上石灰漿，復(fù)產(chǎn)前重復(fù)兩次。干燥后將所有小設(shè)備、門窗、地板、擋板、漏縫板移走，在地面噴撒300 g/m2的生石灰（可用專門的粉末噴撒設(shè)備提高噴撒均勻度），也可以換成燒堿。

2.8 糞污及其管道也是重中之重

豬舍內(nèi)外糞溝和舍內(nèi)漏糞板下的糞尿都要進(jìn)行消毒處理后清理，清空糞水池后進(jìn)行消毒清洗，并對(duì)糞便等進(jìn)行無害化處理。對(duì)所有糞污痕跡或糞污堆積物，都必須噴撒生石灰，并攪拌（每平方米500 g，混合均勻）。清理所有排糞管道及蓄糞池，然后消洗。所有漏縫地板、糞池、糞溝，徹底先用3%燒堿浸泡消毒后再清洗。

2.9 藥房庫房

燒掉或無害化處理所有沒有用完的獸藥、物品外包裝。庫房密閉臭氧消毒，庫房?jī)?nèi)所有備用器材、設(shè)備、工具等，消毒液浸泡或高壓噴洗消毒。

2.10 辦公室、食堂和宿舍、生產(chǎn)線洗澡間更衣室

消毒干燥后進(jìn)行粉刷。使用過硫酸氫鉀溶液進(jìn)行消毒，后使用高錳酸鉀和甲醛熏蒸48 h。無害化銷毀剩余所有衣服和鞋子、雜物。對(duì)豬舍外、生活區(qū)、宿舍、食堂、辦公區(qū)域消毒。

2.11 防鳥、防鼠、驅(qū)蠅、驅(qū)蟲

對(duì)場(chǎng)內(nèi)蚊、蠅、蜱、老鼠、鳥類等進(jìn)行殺滅，處理場(chǎng)內(nèi)貓、狗等其他動(dòng)物。給飼料塔裝上驅(qū)鳥器。在豬場(chǎng)圍墻四周建立“生石灰+碎石”的隔離帶，阻止老鼠進(jìn)入豬場(chǎng)。將室內(nèi)風(fēng)機(jī)開至最大功率檢測(cè)，對(duì)所有通道及角落清洗、消毒、驅(qū)蠅、驅(qū)蟲。入口處安裝防蚊網(wǎng)，室內(nèi)安裝電子滅蚊蠅燈，除主水管道外，其他管道系統(tǒng)使用酸化劑（pH值＜2.0）沖洗后拆除封頭以將存水徹底放空，該區(qū)域也不能有任何明水存在，撒布滅鼠藥并封閉該區(qū)域，避免人員物資進(jìn)入。

2.12 樹木雜草垃圾

清除豬場(chǎng)內(nèi)及圍墻外10 m內(nèi)樹木、雜草及垃圾。帶根除草、帶根除樹，不便砍伐的樹木使用落葉劑清除枯葉落葉。燒掉所有的草、樹和所有廢棄的雜物、垃圾等。在豬場(chǎng)內(nèi)外草叢中，噴灑環(huán)境生態(tài)修復(fù)劑，清除蜱蟲卵，控制非洲豬瘟傳播媒介，控制蚊蠅卵。每周噴灑一次環(huán)境生態(tài)修復(fù)劑，除臭、降氨、控制蟲卵和創(chuàng)造不利于病原菌生存的環(huán)境。

采用多種消毒方式消毒：清洗消毒、粉刷消毒、噴霧消毒、熏蒸消毒、火焰消毒。只要允許，如豬欄、豬舍地面盡量采用一次火焰消毒。

3 復(fù)產(chǎn)前消洗后的空欄檢測(cè)評(píng)估

第二輪消洗后可采用ATP 生物熒光檢測(cè)儀（檢測(cè)儀10～15 s 出結(jié)果）或簡(jiǎn)易熒光PCR 法對(duì)不同區(qū)域進(jìn)行采樣檢測(cè)，不合格立即進(jìn)行再次清洗。當(dāng)豬場(chǎng)最后一個(gè)合格區(qū)域自然干燥封閉2周后，正常進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)的作業(yè)流程時(shí)再次分段以實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)（3～4 h），要求對(duì)重點(diǎn)部位進(jìn)行采樣檢測(cè)，整場(chǎng)內(nèi)外合格為終極目標(biāo)。樣品的采集應(yīng)根據(jù)每個(gè)豬場(chǎng)的實(shí)際情況而定，豬場(chǎng)大，采集的樣品自然多，基本原則是采樣所覆蓋的環(huán)節(jié)要夠多、夠細(xì)，但所采集的樣本并不代表100%對(duì)應(yīng)豬場(chǎng)的實(shí)際情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)上講，樣本量越多，檢測(cè)后的效果越能夠反映豬場(chǎng)的實(shí)際情況。

3.1 采樣點(diǎn)的描述

道路或通道采樣：路面表層（土壤）取6個(gè)；車輛：分別在后車輪里側(cè)2 個(gè)；每層廂板5個(gè)；前臉1個(gè)；后門1個(gè)；駕駛室腳踏板1個(gè)，方向盤1個(gè)；人員衣物（司機(jī)、入場(chǎng)人員）：上衣衣袖2個(gè)，背部1個(gè)，褲子膝蓋2個(gè)；鞋子前幫圍2個(gè)，中底2個(gè)，幫面2個(gè)；工具：鐵鍬和掃帚兩端各采2個(gè)；病死豬處理區(qū)：1 m以內(nèi)地表6個(gè)；場(chǎng)區(qū)大門口：道路6個(gè)，門把手2個(gè)；門衛(wèi)室：地面均勻分散（4個(gè)角，中心）采5個(gè)點(diǎn)；內(nèi)、外門把手各1；豬舍內(nèi)（床位）設(shè)施：產(chǎn)房10個(gè)點(diǎn)（隨機(jī)5個(gè)產(chǎn)床，每個(gè)床采縫條中間及橫欄2 個(gè)點(diǎn)）；妊娠舍10 個(gè)點(diǎn)（隨機(jī)5個(gè)欄位，每欄位后欄、橫欄2個(gè)點(diǎn)）；保育舍10個(gè)點(diǎn)（隨機(jī)5個(gè)床，每個(gè)床采縫條中間及地面2個(gè)點(diǎn)）；育肥舍10個(gè)點(diǎn)（隨機(jī)5個(gè)欄，每個(gè)欄2個(gè)點(diǎn)）；廚房：冷凍肉1個(gè)；餐廳：門口地面內(nèi)外各3 個(gè)，門把手2 個(gè)；污水：蓄水池表面水1個(gè)；飲用水：發(fā)病畜舍遠(yuǎn)端出水口3個(gè)（不足3個(gè)隨機(jī)選擇母豬舍和妊娠舍）；場(chǎng)區(qū)大門口：地表6個(gè)，門把手2個(gè)；豬區(qū)或售豬中轉(zhuǎn)站：地磅5個(gè)點(diǎn)（地磅欄條2個(gè)，地面3個(gè)）；地磅下地面4個(gè)點(diǎn)；附近地面上選5個(gè)點(diǎn)；員工進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)通道：地面和附屬設(shè)施衣服存放區(qū)各取6個(gè)點(diǎn)；風(fēng)機(jī)和風(fēng)道：出風(fēng)口內(nèi)側(cè)壁和扇葉各取3個(gè)點(diǎn)，風(fēng)道隨機(jī)取3個(gè)點(diǎn)；發(fā)病舍（任選2棟）糞溝或出糞口：糞溝3 2個(gè)，出糞口3 2個(gè)。

3.2 樣品采集工具和保存運(yùn)輸

物體表面取樣時(shí)用蘸取適量滅菌生理鹽水或PBS 緩沖液的棉拭子在采樣點(diǎn)5 DN 5 cm的區(qū)域內(nèi)涂擦表面（一個(gè)采樣點(diǎn)使用一個(gè)棉試子），手持部分丟棄，剩余部分無菌操作放入裝有5 mL 含適宜中和劑的滅菌生理鹽水EP 管中，塞緊試管，標(biāo)記并記錄。運(yùn)輸過程中，請(qǐng)?jiān)诶洳貤l件下運(yùn)輸，可在泡沫箱中放置冰袋或干冰。

3.3 結(jié)果評(píng)估

所有待檢樣品必須檢測(cè)全部為陰性，否則從頭再來。因?yàn)闃悠分痪哂写硇?，并不具備代表所有環(huán)節(jié)的全部細(xì)節(jié)，而非洲豬瘟病毒恰恰是存在于每個(gè)細(xì)節(jié)之處。因此，我們要求空欄檢測(cè)的所有樣品檢測(cè)結(jié)果必須為陰性方可進(jìn)入下一階段——哨兵豬的引入。

復(fù)產(chǎn)前最后一次消毒工作由里向外即生產(chǎn)線、附屬生產(chǎn)區(qū)、生活區(qū)、辦公區(qū)的順序進(jìn)行。所有上述場(chǎng)地的門口、室外噴撒生石灰，最后設(shè)置警戒標(biāo)志，不允許任何人員再進(jìn)入，直至復(fù)產(chǎn)?！?/p>