李修政 董家瀟 許曉東

青藤堿(Sinomenine)是一種從防幾科植物青風(fēng)藤[Sinomenium acutum (Thunb.)Rehd.et Wils]的根和莖中提取分離出的生物堿，結(jié)構(gòu)上屬于嗎啡烷類，化學(xué)名稱為(9α，13α，14α)-7,8-二脫氫-4-羥基-3,7-二甲氧基-17-甲基嗎啡喃-6-酮。目前，青藤堿在中西醫(yī)臨床上應(yīng)用廣泛，中醫(yī)認(rèn)為，青風(fēng)藤有祛風(fēng)止痛、通絡(luò)活血的作用，常用水煎劑治療疼痛和風(fēng)濕及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[1]；西醫(yī)則通過青風(fēng)藤的提取物青藤堿來發(fā)揮作用，臨床上主要用于治療風(fēng)濕病及神經(jīng)痛等[2]，代表藥為正清風(fēng)痛寧緩釋片[3]。本文結(jié)合近年來的研究現(xiàn)狀，對青藤堿的抗炎鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 抗炎作用

1.1 按作用機(jī)制

1.1.1 青藤堿對核轉(zhuǎn)錄因子(NF-кB)的影響:藥理學(xué)顯示，NF-кB是一種典型的炎癥信號通路[4,5]，它能和基因片段上某些核苷酸序列相結(jié)合，從而發(fā)生基因轉(zhuǎn)錄的功能，是一類重要的轉(zhuǎn)錄激活因子，廣泛存在于各種真核細(xì)胞中，包括腫瘤壞死因子(TNF-α)，白細(xì)胞介素-1β(IL-β)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)等促炎癥細(xì)胞因子,而SIN通過抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-кB的結(jié)合活性來降低炎性因子在mRNA上的表達(dá)。彭玥等[6]發(fā)現(xiàn)100 μmol/L的SIN本身就有誘導(dǎo)血紅素氧合酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)的功能，在加用SIN處理后可以提高LPS誘導(dǎo)的HO-1水平，進(jìn)而使內(nèi)源性保護(hù)作用減弱，最終使TNF-α及IL-6表達(dá)與釋放進(jìn)一步增加，證實(shí)了SIN在參與炎性反應(yīng)過程中的重要作用。Wu等[7]發(fā)現(xiàn)SIN可以通過激活Nrf2/HO-1信號通路來抑制小鼠軟骨細(xì)胞中的NF-κB活性進(jìn)而抑制炎性反應(yīng)和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解。實(shí)驗(yàn)證明，聚集蛋白聚糖和Ⅱ型膠原蛋白作為ECM的重要成分，對關(guān)節(jié)軟骨具有潤滑和保護(hù)作用[8,9]，而IL-1β的分泌不僅導(dǎo)致ECM降解，還產(chǎn)生過量的促炎性因子和促分解物質(zhì)。

1.1.2 青藤堿對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的炎癥影響:LPS是一種革蘭氏陰性菌釋放的內(nèi)毒素，是引起發(fā)熱、炎癥、水腫、休克和其他革蘭氏菌感染有關(guān)的重要炎性因子，其致病機(jī)制是激活細(xì)胞中的一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，并引起病理效應(yīng)[10-12]，通過促進(jìn)免疫細(xì)胞相關(guān)因子的過度分泌來損害微循環(huán)和血管內(nèi)皮細(xì)胞，從而促成炎性反應(yīng)，最終引發(fā)多器官功能障礙綜合征[13]，筆者目前尚未發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素血癥的根治方法。研究表明，通過LPS處理的巨噬細(xì)胞在體外和體內(nèi)均可減少前列腺素E3，白三烯C4，NO和TNF-α的合成[12]。Yang等[13,14]首先將SIN分為高、中、低3個(gè)小組，然后對幼豬進(jìn)行腹腔注射LPS(1 mg/kg)，3 h后以10、5、1 mg/kg劑量給予青藤堿，而對照組在相同條件下注射0.9%氯化鈉溶液，分別記錄12、24和48 h時(shí)采集血液樣品，記錄臨床體征，采用ELISA試劑分析樣本。結(jié)果顯示，SIN能降低LPS誘導(dǎo)的炎癥發(fā)生程度，可以用作未來抗內(nèi)毒素療法的一部分。該小組近期對該發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，LPS攻擊的幼豬體溫在12 h內(nèi)達(dá)到峰值，推測SIN對LPS所致的體溫上升的降溫作用主要是由于抑制炎性因子產(chǎn)生的熱源和促進(jìn)血管擴(kuò)張，加速血液循環(huán)，加快汗液蒸發(fā)，并通過進(jìn)一步研究表明，中、高劑量的SIN分別對LPS參與的幼豬血清LBP、Mac-1、L-選擇素水平都有不同程度的影響，而低劑量SIN均未顯示明顯區(qū)別[14]。

RAW264.7是常用的炎癥細(xì)胞模型之一，具有較強(qiáng)的細(xì)胞吞噬能力，而SIN能顯著降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞。彭玥等[6]通過研究表明SIN能顯著降低LPS誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞。該小組發(fā)現(xiàn)100 μmol/L的SIN本身就有誘導(dǎo)血紅素氧合酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)的功能，在加用SIN處理后可以提高LPS誘導(dǎo)的HO-1的水平，進(jìn)而使內(nèi)源性保護(hù)作用減弱，最終使TNF-α及IL-6表達(dá)與釋放進(jìn)一步增加，證實(shí)了SIN在參與炎性反應(yīng)過程中的重要作用。易浪等[15]以LPS誘導(dǎo)的炎癥為模型，以RAW264.7巨噬細(xì)胞為研究對象，研究SIN對糖皮質(zhì)激素受體(GR)的抗炎作用。該小組通過米非司酮(Ru486)對地塞米松(Dex)和SIN進(jìn)行干預(yù)，采用Western blot 法進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，SIN同樣可以發(fā)揮類皮質(zhì)激素樣功能，且副作用低于糖皮質(zhì)激素。

a7煙堿乙酰膽堿受體(a7nAChR)是膽堿能抗炎途徑(CAP)的關(guān)鍵受體，是通過迷走神經(jīng)興奮和乙酰膽堿(ACh)釋放調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的生理途徑[16]。Zhu等[17]通過SIN對a7nAChR抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥的細(xì)胞機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，LPS刺激會(huì)誘導(dǎo)NF-кB的活化，從而導(dǎo)致產(chǎn)生多種炎癥蛋白，該反應(yīng)過程需要在表面表達(dá)CD14/TLR-4信號通路(炎性反應(yīng)的重要通路)，而SIN抑制RAW中TNF-α，MCP-1，MIF和MMP-9的產(chǎn)生，降低CD14/TLR4的表達(dá)，并抑制細(xì)胞內(nèi)鈣的釋放，最終達(dá)到拮抗炎癥的目的。Yi等[18]同樣對a7nAChR的調(diào)節(jié)來抑制RA的表達(dá)，與Zhu等[17]不同的是，該小組是通過ERK/Egr-1信號通路調(diào)節(jié)a7nAChR，進(jìn)而抑制成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS)的增殖。FLS在RA的發(fā)病機(jī)制中至關(guān)重要，被認(rèn)為參與炎癥的發(fā)展和關(guān)節(jié)的破壞等。Yi等[18]發(fā)現(xiàn)，TNF-α可以誘導(dǎo)AIA大鼠中FLS增殖，增加a7nAChR的表達(dá)并激活ERK/Egr-1通路，而SIN可以抑制FLS的增殖，抑制a7nAChR的表達(dá)和ERK/Egr-1信號通路的激活。此外，SIN還可以逆轉(zhuǎn)增加FLS中ERK磷酸化和Egr-1表達(dá)的TNF-α效應(yīng)。 這表明SIN可以通過ERK/Egr-1途徑調(diào)節(jié)α7nAChR的表達(dá)，這有助于SIN對FLS增殖的抑制作用。

研究表明，CCAT1可以調(diào)節(jié)腸道上皮細(xì)胞的促炎反應(yīng)，在良性結(jié)腸疾病患者的結(jié)腸組織中CCAT1的水平較高，在炎癥性疾病或嚴(yán)重結(jié)腸炎癥的患者中的上調(diào)更為突出，這表明CCAT1可能是與炎性反應(yīng)有關(guān)[19,20]。這與Liu等[21]的發(fā)現(xiàn)一致，即CCAT1在HaCaT細(xì)胞中引發(fā)了炎癥性損傷。該小組將SIN預(yù)給藥后，用LPS刺激HaCaT細(xì)胞6 h，進(jìn)行轉(zhuǎn)染以誘導(dǎo)CCAT1的過度表達(dá)或使其在HaCaT細(xì)胞中不表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)LPS顯著降低了細(xì)胞活力，并隨著caspase-3/-9的裂解而加劇細(xì)胞凋亡，而SIN預(yù)給藥可維持細(xì)胞活力，阻斷細(xì)胞凋亡并減輕炎癥，促進(jìn)炎性因子的分泌，阻止LPS誘導(dǎo)的p65，IκBα和p38 MAPK磷酸化以及CCAT1的過度表達(dá)。另外，CCAT1的過度表達(dá)本身也會(huì)引起炎癥性病變，從而消除SIN對p65，IκBα和p38 MAPK磷酸化恢復(fù)的積極作用。

1.2 按藥理作用

1.2.1 青藤堿對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的作用:RA是一種常見的慢性自身免疫性疾病，其特征在于細(xì)胞因子介導(dǎo)的關(guān)節(jié)滑膜炎癥和對軟骨、骨骼的破壞，該病病因尚不明確，普遍認(rèn)為感染、長期風(fēng)寒、自身代謝紊亂、退行性病變是發(fā)病的主要原因，目前，通過增加T細(xì)胞的數(shù)量來重建Th17/Treg細(xì)胞的平衡，減少Th17細(xì)胞數(shù)量可能是RA干預(yù)最有效的策略之一[22,23]。Feng等[24]通過研究青藤堿對膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)小鼠模型中血管生成的抑制作用，發(fā)現(xiàn)SIN可以明顯改善關(guān)節(jié)腫脹和紅斑的擴(kuò)展，降低關(guān)節(jié)炎指數(shù)，減少軟骨損傷和骨侵蝕的發(fā)生，并降低滑膜上血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1/CD31)的數(shù)量，為SIN治療RA提供了可參考的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。Tong等[25]研究膠原誘導(dǎo)的大鼠CIA的機(jī)制，結(jié)合CIA大鼠的臨床體征發(fā)現(xiàn)，SIN可以降低CIA大鼠的足爪體積和關(guān)節(jié)炎程度，并且使調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的頻率增加和Th17細(xì)胞的頻率減少。該小組推測可能是通過調(diào)節(jié)腸淋巴結(jié)中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和輔助性T 細(xì)胞17(Th17)的頻率并產(chǎn)生從腸道到關(guān)節(jié)的淋巴細(xì)胞(特別是T細(xì)胞)運(yùn)輸來發(fā)揮抗關(guān)節(jié)炎作用。

近年來，研究人員發(fā)現(xiàn)受體相互作用蛋白(RIP140)是與多種配體結(jié)合的核受體，主要調(diào)節(jié)脂肪組織，骨骼肌，肝臟和其他代謝組織。然而，很少報(bào)道RIP140在滑膜組織中的作用。Lan等[26]對弗氏完全佐劑(CFA)刺激的大鼠進(jìn)行試驗(yàn)并探索相應(yīng)的潛在分子機(jī)制，分別在0、7、14、21、28 d觀察注射CFA后的關(guān)節(jié)腫脹程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在第21天時(shí)小鼠足腫脹到達(dá)峰值，并在此峰值注射不同濃度的青藤堿，當(dāng)青藤堿的濃度為10 mg/kg和20 mg/kg時(shí)，小鼠足腫脹程度明顯減輕，該小組繼續(xù)進(jìn)行蛋白印跡分析顯示TNF-α，IL-1b和IL-6等異常變化，這與NF-κB轉(zhuǎn)錄活性變化和豐富的RIP140一致。Zhang等[27]同樣對SIN作用的關(guān)節(jié)滑膜組織進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)SIN對Toll樣受體(TLR)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及MyD88和腫瘤壞死因子(TNF)受體相關(guān)因子6(TRAF6)有抑制作用，并推測這可能是RA治療以及預(yù)防軟骨和軟骨下骨破壞的重要分子機(jī)制之一。

眾所周知，前列腺素(PGE 2)是一種重要的炎性介質(zhì)，而環(huán)氧合酶(COX)是PGE 2 合成過程中一個(gè)重要的限速酶。Zhou等[28]報(bào)道SIN通過選擇性抑制膜結(jié)合型前列腺素E2合酶-1(mPGES-1)的表達(dá)來降低PG水平并且不影響其合成代謝。另外，mPGES-1可以下調(diào)大鼠角叉菜膠誘導(dǎo)的水腫模型和DBA小鼠Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的CIA模型發(fā)炎的程度。牟慧等[29]發(fā)現(xiàn)髓樣分化因子(myeloid differen tiation factor 88,MyD88)在炎性細(xì)胞因子(TNF-α、IL-β、IL-6)中發(fā)揮重要作用，通過佐劑性關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)得以證明，該小組采用與Lan等[26]類似的方法，最后使用Western Blot法分析MyD88在佐劑大鼠關(guān)節(jié)炎中蛋白的分布與表達(dá)情況。結(jié)果表明，青藤堿可以顯著降低MyD88在大鼠關(guān)節(jié)炎中的表達(dá)。

1.2.2 青藤堿對器官損傷所致炎癥的作用:細(xì)菌性肺炎是世界上引起死亡的第三大疾病，它可以誘發(fā)急性肺損傷(ALI)，從而導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)，全球之一公共衛(wèi)生問題，而ALI的特征是內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞的破壞，導(dǎo)致肺部炎性反應(yīng)，包括中性粒細(xì)胞炎癥，血管周圍和間質(zhì)水腫，氣體交換障礙和表面活性劑功能障礙等[30]。Liu等[31]在探索大腸桿菌誘導(dǎo)的ALI時(shí)發(fā)現(xiàn)，刺激巨噬細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞時(shí)會(huì)導(dǎo)致促炎性因子的釋放，如TNF-α，IL-6和IL-1β等，而SIN 通過抑制氧化應(yīng)激和炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)可以顯著減弱大腸桿菌誘導(dǎo)的ALI，該小組推測SIN減輕ALI的機(jī)制與Nrf2-Keap1和NF-κB核轉(zhuǎn)錄因子有密切聯(lián)系，是治療大腸桿菌誘導(dǎo)的ALI和其他炎性因子參與的疾病的潛在藥物。楊友慶[32]對此做了類似的研究，與Liu等[31]不同的是，該小組對創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)中的繼發(fā)性病因進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SIN處理后的小鼠模型中，腦組織中的丙二醛(MDA)、神經(jīng)元凋亡指數(shù)(P<0.001)和腦水含量(P<0.001)明顯降低，并證明該結(jié)果與Nrf2-ARE信號通路有關(guān)。除此之外，SIN對大鼠腎缺血再灌注損傷也有保護(hù)作用，對照試驗(yàn)顯示，加用SIN組可以降低受損傷大鼠的血肌酐和尿素氮水平，該過程可能是通過調(diào)節(jié)腎臟 Bcl-2、Bax 蛋白的表達(dá)，最終抑制損傷細(xì)胞凋亡，達(dá)到保護(hù)腎臟器官的作用[33]。

創(chuàng)傷性脊髓損傷(SCI)是一種可增加殘疾率的嚴(yán)重中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病[34]，原發(fā)性損傷發(fā)生后的繼發(fā)性病變增加了疾病的復(fù)雜性，包括局部缺血，局灶性出血，自由基應(yīng)激和炎性反應(yīng)等，都阻礙了SCI的恢復(fù)[35]。目前對繼發(fā)性損傷的分子機(jī)制仍不清楚，但已知氧化應(yīng)激和炎癥在細(xì)胞死亡和病變擴(kuò)展中起著至關(guān)重要的作用，并普遍認(rèn)為繼發(fā)性損傷階段保存存活細(xì)胞是SCI的主要治療靶點(diǎn)之一[36]。大量實(shí)驗(yàn)證明，SN具有明顯的炎癥抑制作用，例如SN可抑制視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物中炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生、SN介導(dǎo)的Nrf2激活可通過巨噬細(xì)胞中NF-kB信號在炎性反應(yīng)中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用等。Zhang等[37]發(fā)現(xiàn)SN可以減輕神經(jīng)系統(tǒng)缺陷，并增強(qiáng)對神經(jīng)元的保存，同時(shí)減少了細(xì)胞凋亡。此外，青藤堿還顯著降低炎癥細(xì)胞因子和氧化應(yīng)激因子，從而減輕SCI的程度。該小組為了證實(shí)這一點(diǎn)，將H2O2加入到PC12細(xì)胞中來模擬氧化損傷，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SN可以保護(hù)PC12細(xì)胞免受H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷，并且Nrf2途徑被SN激活。總之，SN對創(chuàng)傷性脊髓損傷后的功能恢復(fù)，細(xì)胞 凋亡，氧化應(yīng)激和炎癥都有密切關(guān)系，可以提供潛在的治療干預(yù)措施，以預(yù)防氧化應(yīng)激和炎癥達(dá)到減輕SCI的目的。

2 鎮(zhèn)痛作用

疼痛是最常見的臨床表現(xiàn)，常給患者帶來巨大的身體和心理痛苦，目前常用的鎮(zhèn)痛藥主要有非甾體抗炎藥、阿片類等，但其不良反應(yīng)明顯，大大降低了患者的依從性，而天然產(chǎn)物所表現(xiàn)出的極佳潛力引起研究人員的廣泛關(guān)注。SIN的中等鎮(zhèn)痛作用主要?dú)w因于其化學(xué)結(jié)構(gòu)與嗎啡相似[38]，但其作用機(jī)制尚不清楚。

2.1 對神經(jīng)痛的影響 SIN可以顯著抑制動(dòng)物的自發(fā)和被動(dòng)行為，具有影響中神經(jīng)系統(tǒng)的潛在作用。研究表明，SIN對納洛酮誘導(dǎo)的嗎啡依賴型豚鼠攣縮行為具有明顯的抑制和阻斷作用，并對阿片類藥物產(chǎn)生的身體依賴性行為具有預(yù)防和治療作用[39]。SIN在對消除嗎啡產(chǎn)生的位置偏愛效應(yīng)(CPP)也有一定效果，推測其潛在的作用機(jī)制與降低中央cAMP水平有關(guān)[40]。吳英等[41]為探索SIN對大鼠神經(jīng)痛的影響，將81只大鼠隨機(jī)分為3組，其中模型組和實(shí)驗(yàn)組對大鼠實(shí)施手術(shù)，不切斷血管與神經(jīng)并輕度結(jié)扎，而假手術(shù)組則游離神經(jīng)不進(jìn)行結(jié)扎。術(shù)后對實(shí)驗(yàn)組注射SIN，其他組注射0.9%氯化鈉溶液參考，持續(xù)2周后發(fā)現(xiàn)SIN可以有效減少神經(jīng)元凋亡。

有關(guān)報(bào)道指出，谷氨酸(glutamate，Glu)是存在于哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)內(nèi)的一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，主要對大腦皮層產(chǎn)生強(qiáng)烈的興奮作用。興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(EAATs)可以快速攔截Glu信號，使其子突觸間隙保持較低濃度，而谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(GLT-1)mRNA和谷氨酸-天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(GLAST)mRNA是EAATs的主要表達(dá)形式。于潔[42]在探討SIN對坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型(CCI)的作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，與神經(jīng)病理性疼痛組相比，SIN組在14 d后的CCI大鼠機(jī)械縮足反應(yīng)閾(MWT)和熱縮足潛伏期(TWL)明顯延長，GLT-1和GLAST的mRNA水平明顯升高(P<0.05),表明SIN可以通過調(diào)節(jié)GLT-1和GLAST mRNA水平來減輕CCI大鼠的神經(jīng)性疼痛。李鵬等[43]同樣對腦內(nèi)興奮Glu進(jìn)行探討，該小組利用部分坐骨神經(jīng)損傷(SSNI)大鼠模型為研究對象，以加吧噴丁作對照試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)SIN在40 mg/kg時(shí)的鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于對照組(100 mg/kg)，效應(yīng)-時(shí)間曲線在 120 min內(nèi)青藤堿組達(dá)到81.28%，而對照組僅有50.56%，并且在相同的時(shí)間范圍內(nèi)Glu的紋狀體細(xì)胞外液與被干預(yù)后的形態(tài)學(xué)變化相一致，說明SIN與加吧噴丁有類似作用機(jī)制的可能。

SIN除了對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有鎮(zhèn)痛作用外，還可作用于外周系統(tǒng)。Lee等[44]利用甲醛誘導(dǎo)的小鼠炎癥疼痛來探討SIN是否具有外周鎮(zhèn)痛作用，該小組將實(shí)驗(yàn)分為2個(gè)階段，通過構(gòu)建疼痛模型可以發(fā)現(xiàn)SIN能降低對神經(jīng)元的興奮性，產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用，但僅用于第一階段，對第二階段無效。

2.2 對炎性疼痛的影響 疼痛是炎癥發(fā)生時(shí)最常見的臨床特征，研究表明，抑制炎癥的發(fā)生發(fā)展可以有效緩解機(jī)體疼痛。Yuan等[45]建立炎癥疼痛(IP)小鼠模型，并用SIN(30 mg/kg)處理小鼠，通過小鼠的行為測試和ELISA法檢測炎癥細(xì)胞因子的水平發(fā)現(xiàn)，SIN可以降低TNF-α，IL-1b和IL-6的水平，抑制IP小鼠的Cox-2和PGE2表達(dá)，對炎癥疼痛具有明顯保護(hù)作用。Gao等[46]在正常大鼠和小鼠的甩尾實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)SIN具有中等程度的鎮(zhèn)痛作用，并且發(fā)現(xiàn)在角叉菜膠誘發(fā)炎癥后，SIN對小鼠的機(jī)械和熱敏反應(yīng)有抑制作用，該小組表明，SIN的鎮(zhèn)痛作用與其不良反應(yīng)無關(guān)，并且阿片受體拮抗劑納洛酮無逆轉(zhuǎn)作用。揭金階等[47]在探討丙酰基青藤堿對炎癥的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，4位引入丙?；那嗵賶A對經(jīng)過小鼠扭體法、小鼠耳腫脹法和大鼠足趾腫脹法等所致的炎癥疼痛具有抑制作用，對SIN的結(jié)構(gòu)修飾提供參考。

3 聯(lián)合用藥抗炎鎮(zhèn)痛研究

3.1 與抗炎藥合用 近年來，隨著各種炎性因子被不斷發(fā)現(xiàn)，人們對于炎癥的作用機(jī)制也越來越清楚，RA的傳統(tǒng)治療方案眾多[48]，其中以非甾體抗炎藥(NSAIDs)合用抗風(fēng)濕藥(DMARDs)為典型代表，但由于其具有明顯的不良反應(yīng)，使科研人員致力于尋找高效低毒的代替品。與NSAIDs 相比，SIN有更少的不良反應(yīng)，且具備以上兩種抗炎藥共同優(yōu)點(diǎn)，但是其半衰期短，不穩(wěn)定等缺點(diǎn)限制了臨床應(yīng)用，目前，研究聯(lián)合用藥是解決臨床應(yīng)用問題的主要方案。蔡強(qiáng)等[49]通過SIN與甲氨蝶呤(MTX)合用時(shí)發(fā)現(xiàn)，二者合用可明顯降低血清中MMP-3水平，改善破骨細(xì)胞因子(RANKL和OPG)的表達(dá)，最終起到保護(hù)軟骨，延緩病情的目的。戴璐等[50]同樣對SIN合用MTX后的RA患者血清中的炎性因子含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果表明聯(lián)合用藥組比SIN和MTX單用組的炎性因子水平和臨床體征具有明顯改善。Xu等[51]對SIN和NSAIDs治療RA的療效和安全性等方面進(jìn)行一項(xiàng)Meta分析，發(fā)現(xiàn)43個(gè)數(shù)據(jù)庫中的1 185名患者符合統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，與NSAIDs相比，SIN在改善晨僵(P<0.00001)，關(guān)節(jié)疼痛(P=0.03)和紅細(xì)胞沉降率(P<0.00001)方面更有效，但兩種療法之間沒有顯著差異。SIN在消化系統(tǒng)中的不良反應(yīng)發(fā)生率較低(P=0.0003)，但在皮膚粘膜系統(tǒng)中的發(fā)生率較高(P=0.03)，兩種治療方法對神經(jīng)系統(tǒng)的不良反應(yīng)相似(P=0.31)，更多研究表明SIN可能是臨床上治療RA的有價(jià)值藥物。

除了與NSAIDs合用外，SIN還可以與其他抗關(guān)節(jié)炎藥合用。羅慧臣等[52]隨機(jī)抽選98例RA患者，隨機(jī)分為2組，對照組給予鹽酸氨基葡萄糖，觀察組在此基礎(chǔ)上家用SIN，觀察12周后發(fā)現(xiàn)，加用SIN組抗炎效果優(yōu)于對照組，且未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。李德明[53]為了探討SIN與異惡唑類化合物來氟米特的聯(lián)合抗風(fēng)濕作用，取某院收治的80例RA患者，隨機(jī)均勻分為2組，對照組患者采用20 mg/d來氟米特常規(guī)治療，治療組在此基礎(chǔ)上加用60 mg/bid，以24周為一療程，結(jié)果表明，治療組患者的臨床表征，檢驗(yàn)學(xué)數(shù)據(jù)均優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2 與鎮(zhèn)痛藥合用 臨床上常用的鎮(zhèn)痛藥主要分為阿片生物堿類、人工合成類鎮(zhèn)痛藥和鎮(zhèn)痛中草藥等。阿片類和合成類鎮(zhèn)痛藥效果明顯，長期服用易產(chǎn)生依賴性，戒斷癥狀明顯，而SIN作為天然生物堿，獨(dú)特的性質(zhì)可以在一定程度上緩解臨床應(yīng)用鎮(zhèn)痛藥的弊端。Gao等[54]證實(shí)了SIN聯(lián)合加巴噴丁或鹽酸川芎嗪在治療周圍和中樞慢性神經(jīng)性疼痛中的療效，值得注意的是，在預(yù)先服用SIN 1h后加用加巴噴丁或鹽酸川芎嗪能起到明顯的鎮(zhèn)痛作用，而先服用加巴噴丁或鹽酸川芎嗪則無效，并且不受阿片受體的影響，經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)證明，二者聯(lián)用不會(huì)引起耐受性或其他明顯的不良反應(yīng)。Komatsu等[55]通過甲醛誘導(dǎo)的小鼠傷害性行為發(fā)現(xiàn)，μ阿片受體可能參與SIN的鎮(zhèn)痛作用，該小組發(fā)現(xiàn)口服單一劑量的SIN能以劑量依賴性方式抑制甲醛誘導(dǎo)的小鼠舔趾反應(yīng)，而腹腔內(nèi)使用阿片受體拮抗劑鹽酸納洛酮和選擇性μ-阿片受體拮抗劑β-氟納曲胺鹽酸鹽(β-FNA)進(jìn)行腹膜內(nèi)預(yù)處理可顯著減輕青藤堿誘導(dǎo)的鎮(zhèn)痛作用。蛋白質(zhì)印跡分析顯示，青藤堿的口服給藥導(dǎo)致福爾馬林誘導(dǎo)的脊髓細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)活化受到顯著阻礙。鹽酸納洛酮和β-FNA可明顯逆轉(zhuǎn)青藤堿誘導(dǎo)的脊髓ERK1/2活化的阻滯。這些結(jié)果表明，μ-阿片受體的激活可能觸發(fā)青藤堿誘導(dǎo)的抗傷害作用和脊髓ERK1/2激活的阻滯。

3.3 與直接作用于發(fā)病部位藥物合用 SIN除與抗炎鎮(zhèn)痛藥合用外，還可以根據(jù)中醫(yī)理論，對疼痛部位進(jìn)行直接注射給藥，該方法可以明顯降低SIN的全身不良反應(yīng)，適用于關(guān)節(jié)炎大范圍發(fā)作患者。Liang等[56]將SIN與原位六角相液晶(ISH2)混合，可以在一定程度上延長SIN半衰期，提高生物利用度，經(jīng)研究人員不斷優(yōu)化，最終確定ISH2在植物三醇(PT)：醋酸維生素E(VEA)∶乙醇(ET)∶水為60.8∶3.2∶16.0∶20.0時(shí)，SIN的釋放度最優(yōu)。Liu等[57]同樣采取關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射SIN-透明質(zhì)酸(HA)綴合物的方式來提高SIN的生物利用度，并且通過HPLC-MS/MS測定大鼠滑膜中的SIN含量。結(jié)果表明，與HA共軛后，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性，特異性等相比單體SIN得到了明顯的升高，這為SIN的局部給藥提供了強(qiáng)有力的證據(jù)。除此之外，朱滿華等[58]還通過新型微創(chuàng)手段(微針定點(diǎn)松解)結(jié)合SIN的介入，以達(dá)到解除關(guān)節(jié)粘連的效果，使用該技術(shù)可以有效減少新的粘連生成，降低RA患者二次手術(shù)的風(fēng)險(xiǎn)。

4 總結(jié)與展望

許多抗炎鎮(zhèn)痛藥物都有局限性，包括為胃腸道反應(yīng)、免疫抑制和生長抑制等。因此，尋找新的抗炎鎮(zhèn)痛藥物是目前的研究熱點(diǎn)。青藤堿是傳統(tǒng)的中藥材，其豐富的資源和低廉的價(jià)格使它受到廣泛關(guān)注。國內(nèi)外的研究表明，青藤堿在多領(lǐng)域具有確切的生物學(xué)作用，包括抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)作用等，并且明確SIN參與多種疾病的細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)，但是對于疾病的具體作用機(jī)制尚不能完全清楚，需要進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)。本文結(jié)合國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，對青藤堿在炎癥的不同作用途徑進(jìn)行綜述，以期尋找到某一確切的作用機(jī)制，使這一傳統(tǒng)藥得到廣泛應(yīng)用，對我國傳統(tǒng)中藥材的利用和開發(fā)具有重要意義。