梅麗芳 劉盈君 謝新藝

（1.廣東省醫(yī)療器械質量監(jiān)督檢驗所包裝材料容器檢驗中心；2.廣東省醫(yī)療器械質量監(jiān)督檢驗所）

藥用復合材料是指各種塑料與紙、金屬或其他塑料通過粘合劑組合而成的用于包裝藥品的材料，可制成膜、袋、硬片。

目前，在復合軟包裝材料中，我國使用最多的粘合劑是雙組分聚氨酯粘合劑，其中絕大部分是以甲苯二異氰酸酯（Toluenediisocyanate, TDI）為主要原料聚合而成的，TDI 遇水后容易水解生成有致癌性的2,4-二氨基甲苯[1,2]。2,4-二氨基甲苯又名甲苯二胺，易溶于沸水、乙醇和乙醚，是染料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、聚氨酯合成中非常重要的有機化工原料[3]。2,4-二氨基甲苯會刺激人體的皮膚、粘膜等，可麻醉中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引發(fā)濕疹、類似丹毒的痂皮等，還可能產(chǎn)生氣管炎、支氣管炎、哮喘等中毒表現(xiàn)[4]，人體若長期接觸可能會出現(xiàn)頭痛、失眠、惡心、嘔吐以及溶血性貧血等多種癥狀。當這些復合包裝材料接觸藥品時，上面殘留的2,4-二氨基甲苯可能會遷移到藥物中，從而對人體造成危害。然而，我國藥包材標準暫未收錄對藥用復合材料中2,4-二氨基甲苯的含量測定方法及限度要求。

本研究擬采用HPLC-MS 法檢測常用藥用復合材料中的2,4-二氨基甲苯，對比不同規(guī)格、不同廠商生產(chǎn)的藥用復合材料在不同提取時間下溶出2,4-二氨基甲苯含量的差異和變化規(guī)律，可為各藥品包裝材料生產(chǎn)商對其生產(chǎn)的包裝材料溶出2,4-二氨基甲苯的風險以及藥品生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)選擇適宜的包裝材料包裝藥品提供參考依據(jù)，同時，為藥包材引入2,4-二氨基甲苯風險監(jiān)控點的檢測方法提供參考思路。

1. 儀器與試藥

LCMS-8040 日本島津公司三重四極桿液質聯(lián)用儀；安全智能型反壓高溫蒸煮鍋；普通型超純水機；電子天平；2,4-二氨基甲苯對照品（純度＞99.8%，德國Dr.Ehrenstorfer GmbH 公司，批號為G150549）；甲醇、甲酸為色譜純；去離子水。

2. 方法與結果

2.1 色譜-質譜條件

色譜柱：島津 Shim-packVP-ODS(150×2.0 mmI.D.,4.6 μ m)；流動相：甲醇—0.1%甲酸溶液(60:40)；柱溫：30℃；流速：0.4 mL/min；進樣量：5.0 μ L。離子源：電噴霧離子源（ESI），正離子模式；DL 溫度：200℃；霧化氣流量：3.0 L/min；干燥氣流量：15.0 L/min；加熱快溫度：400℃；DP 電壓：3.5 kV；監(jiān)測方式：多反應監(jiān)測模式（MRM）。經(jīng)三重四極桿液質聯(lián)用儀測定，通過駐留時間以及MRM 子離子相對豐度定性、標準曲線外標法定量[1]，可確定質荷比108 為定量離子，質荷比106 為定性離子。

2.2 供試品制備

取適量洗凈并晾干的藥用復合材料，裁取200 cm2，剪切成約3×0.3 cm 的條狀，放置于250mL 錐形瓶中，精密加入去離子水100 mL，用電子天平稱定重量。放入高壓滅菌鍋中，升溫至120℃，保持30 分鐘，停止加熱，待鍋內(nèi)與外界的壓差降至0 后，取出，冷卻至室溫，用去離子水補足減失的重量，用0.22 μm 水系微孔濾膜過濾后，即得。

2.3 對照品儲備液制備

精密稱定對照品2,4-二氨基甲苯適量，用去離子水配置成質量濃度為2667.5 μ g/L 的對照品儲備液，置于4℃冰箱備用。

2.4 專屬性試驗

精密吸取按照“2.2”方法制備的2,4-二氨基甲苯對照品溶液、供試液、加標供試液以及空白液各5.0 μL，依次注入高效液相色譜-質譜儀，得到相應的色譜圖。見圖1。由圖可知，2,4-二氨基甲苯的駐留時間為0.753 min，本方法對2,4-二氨基甲苯含量的測定有較強的專屬性。

圖1-1 2,4-二氨基甲苯對照液色譜圖

圖1-2 供試液色譜圖

圖1-3 加標供試液色譜圖

圖1-4 空白液色譜圖

2.5 線性關系

精密量取不同體積的對照品儲備液，配置成6 個不同質量濃度的對照溶液，注入高效液相色譜-質譜儀，以2,4-二氨基甲苯峰面積為縱坐標，進樣量為橫坐標，進行線性回歸，得到回歸方程Y=8457.10X+1383.63，相關系數(shù)r=0.9991。結果表明，2,4-二氨基甲苯含量在1.067~53.35 μ g/L的濃度范圍內(nèi)線性關系良好。

2.6 精密度試驗

平行制備的6 份加標供試液，加標濃度均為5.335 μ g/L 的2,4-二氨基甲苯對照液，連續(xù)測定，計算2,4-二氨基甲苯測得量的RSD 為3.40%。于24 h 后再制備6 份進行測定，計算得24h 后的RSD 為3.10%，12 份樣品中的RSD 值為3.67%，精密度良好。

2.7 檢測限和定量限試驗

精密量取對照品儲備液，按濃度稀釋法進行分析，信噪比3:1 時測得的量為檢測限，本方法的檢測限為0.213 μ g/L；以信噪比10:1 時測得的量為定量限，本方法的定量限為1.067 μ g/L。

2.8 加樣回收率試驗

取已測定濃度的樣品9 份，分別精密加入5.335 μ g/L、10.67 μ g/L 和16.005 μ g/L 三個加標對照濃度，每種加標濃度平行制備3 份，注入高效液相色譜-質譜儀，得到平均回收率為99.16%，回收率的RSD 為5.31%。方法具有良好的精密度和回收率。

2.9 不同樣品的測定

收集5 種不同材質、不同規(guī)格、不同廠商生產(chǎn)的常用藥用復合材料，按照2.2 的方法進行前處理，注入HPLC-MS 進行分析，每種樣品各測三份，得到各樣品在120℃加熱30 min 時溶出2,4-二氨基甲苯的濃度結果。同時，為了對比研究不同規(guī)格、不同廠商生產(chǎn)的藥用復合材料在不同提取時間下溶出2,4-二氨基甲苯的含量的差異和變化情況，本試驗在保持其他樣品前處理方法及條件不變的情況下，增加兩個加熱時間點，分別為保持15 min 和45 min。結果見表1。

表1 試驗結果

表1 試驗結果（續(xù)表）

3. 討論

由表1 中結果可得出以下幾個結論：同一規(guī)格、同一廠商生產(chǎn)的藥用復合材料隨著前處理過程中加熱提取時間的增加，所溶出的2,4-二氨基甲苯的含量也隨之不斷增加且溶出2,4-二氨基甲苯的速度各有不同；在相同的加熱提取時間下，不同規(guī)格的復合藥品包裝材料所提取溶出的2,4-二氨基甲苯的含量各不相同，比較幾種材質的樣品，PVC/PVDC 這一材質的兩種樣品所溶出的2,4-二氨基甲苯的含量低于定量限；同一規(guī)格、不同廠商生產(chǎn)的復合藥品包裝材料所提取出的2,4-二氨基甲苯的量也有較大差異。

綜合上述，常用藥用復合材料普遍存在2,4-二氨基甲苯的溶出，且不同的規(guī)格、生產(chǎn)廠商以及加熱提取時間均會對溶出2,4-二氨基甲苯的含量產(chǎn)生不同程度的影響。

4. 結論

本研究建立了三重四極桿液質聯(lián)用儀測定藥用復合材料中2,4-二氨基甲苯含量的檢測方法，該方法簡單便捷、靈敏，能夠準確的定性、定量，有良好的精密度和準確度，適用于常用藥用復合材料中2,4-二氨基甲苯含量的檢測。

常用藥用復合材料因其工藝及國內(nèi)普遍使用雙組分聚氨酯粘合劑，普遍存在危害人體健康的2,4-二氨基甲苯溶出，應引起國家及行業(yè)的重視，目前我國藥包材標準暫未收錄對藥用復合材料中2,4-二氨基甲苯的含量測定方法及限度要求，我國可綜合考慮2,4-二氨基甲苯的風險，引入相應的藥包材標準。

對于各藥品包裝材料生產(chǎn)商來說，應有意識地針對自己不同規(guī)格產(chǎn)品中2,4-二氨基甲苯的含量進行風險監(jiān)測；對于藥品生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)來說，在選擇藥品包裝材料時，可關注各生產(chǎn)廠商是否對材料中2,4-二氨基甲苯的含量進行了監(jiān)控并提供相關檢測數(shù)據(jù)，再綜合考慮選擇最適合自己藥品的包裝材料。