王飛，王永紅

子癇前期（pre-eclampsia，PE）發(fā)生在妊娠20周后，可以導(dǎo)致胎盤(pán)早剝、彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）、子癇、HELLP綜合征和心肝腎功能衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生，是威脅孕產(chǎn)婦及圍生兒生命的主要原因之一[1]。Kunder等[2]研究表明，與正常孕婦相比，PE患者中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（neutrophil elastase，NE）活性顯著升高，且NE的活性與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Regal等[3]研究表明，通過(guò)將含抗大鼠中性粒細(xì)胞的血清注入到妊娠大鼠胎盤(pán)缺血模型中，會(huì)減少循環(huán)中中性粒細(xì)胞，減弱大鼠胎盤(pán)缺血誘導(dǎo)的高血壓。Taylor等[4]研究發(fā)現(xiàn)，血清反應(yīng)因子（serum response factor，SRF）調(diào)節(jié)中性粒細(xì)胞遷移、整合素激活和販運(yùn)。中性粒細(xì)胞活化，加劇PE的全身小血管痙攣[5]。絲裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）通過(guò)調(diào)控SRF從而導(dǎo)致中性粒細(xì)胞聚集及過(guò)度活化釋放NE，可能與PE的發(fā)病有關(guān)。

1 MAPK1/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2（ERK2）與PE

MAPK也稱(chēng)為ERK，位于22q11.22，該激酶的活化需要其上游激酶的磷酸化。激活后該激酶易位至受刺激細(xì)胞的細(xì)胞核，使靶基因磷酸化[6]。該信號(hào)通路是一個(gè)高度保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶系統(tǒng)，參與了細(xì)胞增殖、分化、運(yùn)動(dòng)、應(yīng)激反應(yīng)等活動(dòng)，在細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)胞反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[7]。外源和內(nèi)源刺激（包括生長(zhǎng)因子、應(yīng)激和細(xì)胞因子）激活MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白重塑及內(nèi)皮細(xì)胞通透性改變，使內(nèi)皮細(xì)胞完整性的破壞以響應(yīng)氧化應(yīng)激[8]。

García-Hernández 等[9]研究表明，MAPK 通路特異性阻斷劑（SP600125、PD98059和 JNK、ERKβ 激活抑制劑）可阻斷中性粒細(xì)胞活化，抑制中性粒細(xì)胞活化導(dǎo)致的溶酶體釋放和脫顆粒過(guò)程，表明MAPK通路參與中性粒細(xì)胞活化過(guò)程。另有研究表明，在缺氧/復(fù)氧（H/R）的人絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞（HRT8/SVneo細(xì)胞）氧化應(yīng)激模型中，MAPK信號(hào)通路被激活，影響滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲，從而參與PE的發(fā)病機(jī)制[10]。Ding等[11]研究表明，在HTR8/Svneo細(xì)胞中，重塑相關(guān)蛋白5（MXRA5）表達(dá)較低，滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)不足。用特異性（重塑相關(guān)蛋白5小干擾RNA）MXRA5 siRNA使MXRA5過(guò)表達(dá)，通過(guò)p38 MAPK和ERK1/2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑減弱了胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，表明MXRA5可能通過(guò)調(diào)節(jié)MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)影響滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖和侵襲。Muley等[12]研究表明，小鼠膝關(guān)節(jié)局部注射N(xiāo)E，通過(guò)激活p44/42 MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，誘導(dǎo)炎癥，MAPK抑制劑U0126可阻斷嗜中性彈性蛋白酶誘發(fā)的炎癥，提示MAPK信號(hào)通路參與炎癥反應(yīng)。Dong等[13]研究表明，在脂多糖誘導(dǎo)的PE大鼠模型中，辛伐他汀通過(guò)ERK/MAPK途徑使PE大鼠恢復(fù)血管生成平衡，恢復(fù)正常螺旋動(dòng)脈重塑并改善炎癥和氧化應(yīng)激。提示ERK/MAPK參與PE大鼠螺旋動(dòng)脈的重塑。D′Oria等[14]研究表明，在人內(nèi)皮細(xì)胞中肌醇可誘導(dǎo)離體的蛋白激酶B（PKB/Akt）和MAPK/ERK磷酸化，從而使PE血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，提示MAPK/ERK信號(hào)通路的活化導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。

2 MAPK與SRF

SRF 屬于 MADS（MCM1，Agamous，Deficiens和SRF）轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一，位于染色體6p21.1上，是普遍表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的主要調(diào)節(jié)因子，其與靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域中的血清反應(yīng)元件（SRE）結(jié)合，該蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)許多直接早期基因（例如原癌基因c-fos）的活性，從而參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞分化。該基因是許多途徑的下游靶標(biāo)，通過(guò)三元復(fù)合因子（TCF）在MAPK途徑中發(fā)揮作用[7]。ERK、MAPK，通過(guò)向相鄰蛋白質(zhì)添加磷酸基團(tuán)使信號(hào)級(jí)聯(lián)傳遞，將轉(zhuǎn)錄因子[包括 SRF，核因子 κB（NF-kB）和環(huán) AMP 反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）結(jié)合位點(diǎn)]激活并轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，誘導(dǎo)靶基因表達(dá)[15]。

Kim等[16]研究表明，甲基汞通過(guò)增強(qiáng)MAPK信號(hào)通路（p38和ERK）的磷酸化水平，使SRF依賴(lài)性基因CC基序趨化因子配體4（CCL4）的表達(dá)水平升高。MAPK（p38，ERK）抑制劑使CCL4的表達(dá)水平下降，提示MAPK信號(hào)通路的磷酸化可激活下游的SRF。Mihara等[17]研究表明，ERK和p38分別通過(guò)不同的輔助因子調(diào)節(jié)SRF的活性。Newaz等[18]研究表明，在動(dòng)脈粥樣硬化的大鼠模型中，ERK1/2抑制劑僅使SRF表達(dá)減弱。SRF抑制劑使NF-κB表達(dá)減弱，但不影響ERK1/2的表達(dá)，提示ERK1/2通過(guò)激活SRF使血管平滑肌細(xì)胞中蛋白NF-κB表達(dá)水平升高進(jìn)而引起炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。

外源和內(nèi)源刺激激活MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白重塑及內(nèi)皮細(xì)胞通透性改變，使內(nèi)皮細(xì)胞完整性的破壞以響應(yīng)氧化應(yīng)激。賈彥如等[19]研究表明，PE患者胎盤(pán)組織MAPK1表達(dá)水平上調(diào)。SRF是MAPK信號(hào)通路的下游靶標(biāo)，MAPK可能通過(guò)激活SRF使中性粒細(xì)胞活化及遷移，參與PE的發(fā)病。

3 SRF與NE

SRF是造血系統(tǒng)中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子以及肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的主要調(diào)節(jié)因子[4]。肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架不僅在細(xì)胞的“機(jī)械”前向推進(jìn)中起作用，而且還作為細(xì)胞外刺激的傳感器和調(diào)節(jié)效應(yīng)子的轉(zhuǎn)錄激活的調(diào)節(jié)劑。因此，SRF通過(guò)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞表面表達(dá)（例如CD14、整聯(lián)蛋白激活和運(yùn)輸）以及最終的細(xì)胞極化和遷移來(lái)控制先天免疫應(yīng)答。

研究表明，敲除SRF的中性粒細(xì)胞對(duì)趨化因子的趨化作用減弱并且細(xì)胞黏附能力下降，在體內(nèi)和體外都不能遷移至炎癥部位[20]。Filippi等[21]研究表明，SRF對(duì)中性粒細(xì)胞的功能具有特異性，表現(xiàn)為SRF通過(guò)控制整合素聚集和運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程，導(dǎo)致活化的中性粒細(xì)胞黏附和遷移。Dai等[22]研究表明，肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架結(jié)合蛋白22（SM22）的過(guò)表達(dá)，可抑制細(xì)胞核中SRF調(diào)節(jié)的NF-κB誘導(dǎo)激酶（Nik）的轉(zhuǎn)錄，從而抑制NF-κB介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。提示SRF參與NF-κB介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。Xu等[23]研究表明，通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)到SRF是miR-22的直接靶標(biāo)，miR-22的過(guò)表達(dá)和SRF的降低引起人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡和炎癥，證實(shí)miR-22通過(guò)SRF誘導(dǎo)內(nèi)皮功能障礙。Chen等[24]研究表明，體外腫瘤壞死因子α（TNF-α）和體內(nèi)脂多糖通過(guò)激活SRF和NF-κB，增強(qiáng)mCD59b表達(dá)水平，通過(guò)限制膜攻擊復(fù)合物組裝來(lái)保護(hù)宿主細(xì)胞免受補(bǔ)體攻擊。Xia等[25]研究表明，在心肌細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞中，SRF以心肌素-CArG-SRF的形式，使炎性細(xì)胞因子的表達(dá)增加和單核細(xì)胞積聚，引起血管的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。

PE的發(fā)病機(jī)制之一是炎癥免疫過(guò)度激活、中性粒細(xì)胞過(guò)度活化。SRF是肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的主要調(diào)節(jié)因子，使中性粒細(xì)胞的遷移至炎癥部位，并且SRF對(duì)中性粒細(xì)胞的功能具有特異性，表現(xiàn)為SRF通過(guò)控制整合素聚集和運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程，導(dǎo)致活化的中性粒細(xì)胞黏附。SRF可能通過(guò)影響中性粒細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞聚集和活化，參與PE的發(fā)病。

4 NE與內(nèi)皮損傷

NE是一種存儲(chǔ)在中性粒細(xì)胞初級(jí)顆粒中的絲氨酸蛋白酶，可以導(dǎo)致血管基底膜損傷并且可以促進(jìn)中性粒細(xì)胞的組織浸潤(rùn)。中性粒細(xì)胞活化并黏附到血管內(nèi)皮細(xì)胞激發(fā)炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是PE患者血管內(nèi)皮損傷的重要原因[26]。Regal等[3]研究表明，PE患者的中性粒細(xì)胞及NE與正常孕婦相比濃度及活性均增加，中性粒細(xì)胞的過(guò)度活化和氧化應(yīng)激可能導(dǎo)致許多不利的妊娠結(jié)局。Kunder等[2]研究表明，PE患者的中性粒細(xì)胞過(guò)度活化，釋放大量彈性蛋白酶，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞完整性破壞，且PE患者血清中尿酸、CRP的水平顯著增加，表明PE是一種全身性炎癥疾病。Mihara等[17]研究表明，PE患者外周血中中性粒細(xì)胞的過(guò)度活化，表現(xiàn)為呼吸爆發(fā)和脫顆粒，繼而釋放大量的彈性蛋白酶和細(xì)胞因子等，直接或者間接導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。

5 結(jié)語(yǔ)

目前研究認(rèn)為，血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷是PE的主要病理生理學(xué)改變，中性粒細(xì)胞活化并黏附到血管內(nèi)皮細(xì)胞激發(fā)炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是PE患者血管內(nèi)皮損傷的重要原因。MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑的激活，使內(nèi)皮細(xì)胞完整性破壞以響應(yīng)氧化應(yīng)激，SRF通過(guò)控制整合素聚集和運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程，導(dǎo)致活化的中性粒細(xì)胞黏附和遷移至炎癥部位釋放NE。NE可以導(dǎo)致血管基底膜損傷并且可以促進(jìn)中性粒細(xì)胞的組織浸潤(rùn)。因此，MAPK1可能通過(guò)調(diào)控SRF從而導(dǎo)致中性粒細(xì)胞過(guò)度活化釋放NE從而參與PE的發(fā)病。