方 靜 王元霞 劉傳夢(mèng) 黃海濤 曾春暉 楊 柯

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧市 530001，電子郵箱：fangjing0828@126.com)

【提要】 藤茶主要分布于廣西、廣東、云南、貴州、湖北、湖南、江西、福建等地。雙氫楊梅樹(shù)皮素作為其主要活性成分，屬于黃酮類化合物，具有抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)、抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抑菌、調(diào)血脂及降血糖等多種藥理作用。本文就近年藤茶中雙氫楊梅樹(shù)皮素藥理作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

藤茶，又稱甜婆茶、甜茶藤、田婆茶、烏蘞、紅五爪金龍、大齒蛇葡萄，主要分布于廣西、廣東、云南、貴州、湖北、湖南、江西、福建等海拔200～1 300 m的山區(qū)中[1]。其味甘、淡，性涼，具有清熱解毒、祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋健骨、消腫止痛等功能，可用于治療發(fā)熱、咽喉痛、黃疸型肝炎等疾病[2]。雙氫楊梅樹(shù)皮素(dihydromyricetin，DMY)又稱雙氫楊梅素、二氫楊梅素、福建茶素、蛇葡萄、蛇床子素，是藤茶中的主要黃酮類化合物，其含量可達(dá)30%[3-4]。DMY具有抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)、抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抑菌、調(diào)血脂及降血糖等多種藥理活性。本文就近年藤茶中DMY藥理作用的研究進(jìn)展做一綜述。

1 藥理作用

1.1 抗腫瘤作用 DMY能通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、阻滯腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬及抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲等多種途徑，抑制肝癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和膀胱癌細(xì)胞的增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，達(dá)到抗腫瘤效果。

1.1.1 肝癌：肝癌是全球發(fā)病率第五位的惡性腫瘤，侵襲性強(qiáng)，死亡率高[5]。我國(guó)大多數(shù)肝癌患者在確診時(shí)已處于中晚期，同時(shí)伴有血行轉(zhuǎn)移和癌栓形成，其治療手段非常有限，這導(dǎo)致我國(guó)肝癌患者術(shù)后5年生存率低于發(fā)達(dá)國(guó)家[6]。鄭作文等[7-8]發(fā)現(xiàn)，DMY對(duì)體外人肝癌BEL-7404細(xì)胞、肝癌H22細(xì)胞及體內(nèi)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤均有明顯的抑制作用。李峰[9]采用Hoechst 33342染色、Annexin V/PI雙染、DCFH-DA探針、蛋白質(zhì)印跡法等方法，分析經(jīng)DMY作用后的肝癌HepG2腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞內(nèi)活性氧水平及凋亡蛋白表達(dá)水平等，結(jié)果表明DMY能通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡。

1.1.2 乳腺癌：乳腺癌作為我國(guó)最主要的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率位居城鄉(xiāng)女性惡性腫瘤首位，近年來(lái)呈上升趨勢(shì)[10]。DMY能抑制人雌激素受體陰性、高轉(zhuǎn)移型乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖，并通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞凋亡；另外，DMY可通過(guò)降低高轉(zhuǎn)移型乳腺癌4T1細(xì)胞荷瘤模型小鼠的瘤重、肺轉(zhuǎn)移灶數(shù)、血漿微轉(zhuǎn)移灶數(shù)以及血清乳酸脫氫酶、基質(zhì)金屬蛋白酶9和基質(zhì)金屬蛋白酶2水平來(lái)抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移[11]。

1.1.3 前列腺癌：前列腺癌發(fā)病率位居全球癌癥發(fā)病率的第5位，是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤[12]。近年來(lái)細(xì)胞試驗(yàn)表明，DMY可以抑制PC-3前列腺癌細(xì)胞的增殖，并且呈劑量依賴關(guān)系；通過(guò)流式細(xì)胞儀分析PC-3前列腺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期，發(fā)現(xiàn)DMY可將細(xì)胞周期阻滯于S期和G2/M期[13]。

1.1.4 其他腫瘤：研究顯示，DMY還對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞、人卵巢癌A2780細(xì)胞、人胃癌SGC-7901細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞、人惡性黑色素瘤A375細(xì)胞等具有明顯的抑制增殖作用[14-17]。

1.2 神經(jīng)保護(hù)作用

1.2.1 認(rèn)知障礙：認(rèn)知障礙又稱神經(jīng)認(rèn)知障礙，是一類主要影響認(rèn)知能力(包括學(xué)習(xí)、記憶、感知和問(wèn)題解決能力)的心理健康障礙。對(duì)于用高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周、然后用低劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠模型，分別給予125 mg/(kg·d)DMY(低劑量組)、250 mg/(kg·d)DMY(高劑量組) 、等量生理鹽水(模型組)16周后，測(cè)定小鼠的體重、空腹血糖、血脂、腹腔葡萄糖耐量和認(rèn)知功能，并觀察海馬中氧化應(yīng)激標(biāo)志物和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)的變化，結(jié)果表明，DMY可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激和增強(qiáng)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子介導(dǎo)的神經(jīng)保護(hù)，明顯改善2型糖尿病小鼠的認(rèn)知障礙，逆轉(zhuǎn)糖脂代謝異常[18]。

1.2.2 帕金森?。号两鹕∈且环N與年齡相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病，其病理特征是由于黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的選擇性喪失而導(dǎo)致多巴胺的逐漸損耗。目前導(dǎo)致帕金森病神經(jīng)變性的確切致病機(jī)制尚未清楚，但神經(jīng)炎癥、氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙作為可能導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)元損傷的機(jī)制已被業(yè)內(nèi)廣泛接受[19-21]。DMY可通過(guò)調(diào)節(jié)糖原合成酶激酶3β/蛋白激酶B通路，減輕由1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶誘導(dǎo)的帕金森病模型小鼠的行為障礙和多巴胺能神經(jīng)元丟失；此外，DMY以劑量依賴性的方式減弱1-甲基-4-苯基吡啶離子誘導(dǎo)的MES23.5細(xì)胞損傷和抑制活性氧的產(chǎn)生[22]。

1.2.3 阿爾茲海默癥：阿爾茲海默癥(Alzheimer′s disease，AD)是導(dǎo)致全球3 560萬(wàn)人患病的進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病[23]。目前尚無(wú)有效藥物可減緩或阻止AD的進(jìn)展。研究表明，除了認(rèn)知/學(xué)習(xí)能力喪失外，AD患者的神經(jīng)心理癥狀如焦慮和癲癇的發(fā)生率分別高達(dá)70%和17%，提示AD的發(fā)病機(jī)制與γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)能神經(jīng)傳遞功能障礙有關(guān)[24]。用DMY(2 mg/kg)處理Tg-SwDI轉(zhuǎn)基因AD小鼠3個(gè)月后，DMY可通過(guò)以下方面改善AD：在行為上，DMY可改善小鼠認(rèn)知功能障礙，降低焦慮水平和癲癇易感性；在病理學(xué)上，DMY可明顯降低小鼠腦中淀粉樣蛋白-β肽；在電生理上，DMY可調(diào)節(jié)小鼠腦中γ-氨基丁酸A受體(γ-aminobutyric acid A receptor，GABAAR)介導(dǎo)的電流變化；此外，橋尾蛋白是一種突觸后GABAAR錨定蛋白，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的形成和GABA能神經(jīng)突觸的可塑性，并改善Tg-SwDI小鼠腦中海馬和皮質(zhì)功能障礙，而DMY可提高橋尾蛋白的水平；這些結(jié)果表明，采用DMY治療不但可以改善AD癥狀，還可以逆轉(zhuǎn)AD的進(jìn)行性神經(jīng)病理學(xué)改變，包括降低淀粉樣蛋白-β肽水平，提高橋尾蛋白水平，恢復(fù)GABA能神經(jīng)傳遞和功能性突觸的可塑性[24]。

1.2.4 抑郁癥：全世界抑郁癥患者人數(shù)高達(dá)3.22億，患病率達(dá)4.4%，我國(guó)抑郁癥患病率約為 4.2%[25]。研究表明，神經(jīng)炎癥和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平與抑郁癥發(fā)病密切相關(guān)[26]。有學(xué)者通過(guò)尾部懸吊試驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)、運(yùn)動(dòng)活動(dòng)和蔗糖偏好試驗(yàn)，評(píng)估DMY對(duì)內(nèi)毒素及慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁癥模型小鼠的快速抗抑郁作用，結(jié)果表明DMY減少了小鼠尾部懸吊試驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)的不動(dòng)時(shí)間和抑郁癥相關(guān)行為；另外，在海馬組織和體外培養(yǎng)的海馬細(xì)胞中，DMY通過(guò)激活調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2-環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)單元結(jié)合蛋白途徑并增加糖原合成酶激酶-3β磷酸化，上調(diào)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)，從而起到快速抗抑郁的作用[26]。

1.2.5 其他：氧化應(yīng)激與神經(jīng)退行性疾病發(fā)病密切相關(guān)[27]。Mu等[28]通過(guò)行為、影像學(xué)、生物化學(xué)、組織化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)，探討DMY對(duì)3-硝基丙酸誘導(dǎo)大鼠的行為缺陷及紋狀體組織病理?yè)p傷的影響，結(jié)果表明DMY可通過(guò)調(diào)節(jié)葡萄糖代謝、丙二醛、超氧化物歧化酶活性及凋亡相關(guān)基因B淋巴細(xì)胞瘤-2、 B淋巴細(xì)胞瘤-2相關(guān)X蛋白和半胱氨酸蛋白酶3的表達(dá)，明顯減輕3-硝基丙酸誘導(dǎo)大鼠的運(yùn)動(dòng)功能障礙和學(xué)習(xí)記憶障礙，并改善紋狀體代謝異常。另有報(bào)道稱，攝入DMY可以防止成年大鼠在7天低氣壓缺氧狀態(tài)下的記憶損傷(相當(dāng)于海拔5 000 m引起的海馬神經(jīng)變形和記憶障礙)；此外，DMY可改善線粒體形態(tài)和功能，抑制活性氧的產(chǎn)生，降低海馬脂質(zhì)過(guò)氧化；在暴露于缺氧條件下的小鼠海馬HT-22細(xì)胞中，DMY通過(guò)去乙酰化酶3誘導(dǎo)叉頭盒O類轉(zhuǎn)錄因子-3去乙?；瘉?lái)減弱氧化應(yīng)激損傷，從而起到神經(jīng)保護(hù)作用[29]。

1.3 抗氧化作用 自由基是外層軌道含有未配對(duì)電子的基團(tuán)，其化學(xué)性質(zhì)活潑，可以攻擊幾乎所有的生物分子，包括DNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物、有機(jī)酸等，極具破壞性[30]。正常情況下人體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除處于平衡狀態(tài)，但在某些病理情況下或人體抗氧化體系出現(xiàn)障礙時(shí)，體內(nèi)過(guò)量的氧自由基會(huì)引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，影響人體健康。DMY具有較強(qiáng)的抗氧化活性，與其多種藥理作用有關(guān)。

1.3.1 抗脂質(zhì)過(guò)氧化：脂質(zhì)過(guò)氧化是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，受到多種因素的干擾。何桂霞等[31]觀察到DMY對(duì)心、肝、腦、組織勻漿及線粒體脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛的產(chǎn)生有較強(qiáng)的抑制作用，并且對(duì)肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制作用最強(qiáng)；另外，DMY對(duì)亞鐵離子-半胱氨酸體系和過(guò)氧化氫-亞鐵離子體系誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用有較強(qiáng)的抑制作用。

1.3.2 清除自由基：體內(nèi)過(guò)量的自由基會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害。Hou等[32]發(fā)現(xiàn)DMY可明顯降低過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激模型中的活性氧和丙二醛水平，表明DMY通過(guò)改善細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)，從而起到對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。

1.3.3 增強(qiáng)抗氧化酶活性：機(jī)體內(nèi)清除自由基的酶系統(tǒng)主要由超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶等組成。它們都是鐵卟啉蛋白酶，能夠催化體內(nèi)氧化酶的毒性產(chǎn)物過(guò)氧化氫分解。在正常條件下，細(xì)胞的超氧化物歧化酶將機(jī)體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基歧化為過(guò)氧化氫，后者再經(jīng)由過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶催化降解為水和氧。有學(xué)者分析了DMY對(duì)D-半乳糖致衰老模型小鼠體內(nèi)抗氧化活性酶表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DMY可增加衰老小鼠各臟器指數(shù)，提高各抗氧化酶表達(dá)水平，降低脂質(zhì)過(guò)氧化水平[9]。

1.4 抗炎、調(diào)節(jié)免疫作用 藤茶作為人們的日常飲用茶，在《草本便方》中有記錄：“藤茶葉甘溫消渴，諸氣鼓脹月活，丹停氣腫下盅毒，利便通腸代茶喝”[33]?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)藤茶中的DMY具有抗炎作用[34-36]。高濃度(460 mg/kg)DMY可明顯降低脂多糖致急性炎癥小鼠血清中腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素1β和白細(xì)胞介素6水平，提高血清抗炎因子白細(xì)胞介素10水平[35]。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型中，DMY能降低環(huán)氧化酶2水平，并通過(guò)激活核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2通路，抑制促炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素6、腫瘤壞死因子α的表達(dá)[37]。另外，Wang等[38]發(fā)現(xiàn)，DMY可能通過(guò)激活絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路，減輕脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠肺部水腫情況，降低支氣管肺泡灌洗液中促炎癥因子的表達(dá)水平。

曾春暉等[39]發(fā)現(xiàn)DMY能顯著促進(jìn)刀豆蛋白誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng)小鼠的免疫應(yīng)答。DMY也可通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體氧自由基清除酶系統(tǒng)的活性，降低一氧化氮產(chǎn)生酶系統(tǒng)的活性，抑制體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的產(chǎn)生，從而對(duì)免疫性慢性胃炎大鼠胃黏膜有明顯的保護(hù)作用[40]。

1.5 抑菌作用 DMY抗菌譜廣，有學(xué)者通過(guò)采用濾紙片抑菌圈法對(duì)DMY及其衍生物進(jìn)行了抑菌活性篩選，結(jié)果表明DMY及其衍生物對(duì)真菌白色念珠菌、酵母菌無(wú)明顯抑制效果，但對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌、沙門氏菌等細(xì)菌活性均有明顯抑制作用[41]。傅若秋等[42]通過(guò)測(cè)定31種中藥單體對(duì)11株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的體外抑菌活性，發(fā)現(xiàn)DMY、花旗松素、沒(méi)食子酸等9種中藥單體對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抗菌活性，其中DMY在質(zhì)量濃度為100 μg/mL時(shí)抑菌率高達(dá)73%，僅次于花旗松素。

1.6 降血糖、調(diào)血脂作用 糖尿病能夠增加心血管疾病、腎衰竭和失明的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，近幾十年來(lái)全球糖尿病患病率持續(xù)上升[43]。槲皮素、蘆丁、黃芩苷、木犀草素等黃酮類化合物可提高胰島素敏感性，而不促進(jìn)脂肪生成[44-45]。DMY作為藤茶的主要黃酮類成分，同樣具有調(diào)節(jié)血糖血脂的作用。覃潔萍等[46]發(fā)現(xiàn)DMY對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠及由葡萄糖、腎上腺素引起的高血糖模型小鼠均有明顯的降血糖作用，但對(duì)正常小鼠血糖無(wú)明顯影響。也有報(bào)道稱，用DMY或羅格列酮治療Zucker糖尿病大鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DMY能降低大鼠空腹血糖，并將高血糖發(fā)作延遲4周，與羅格列酮相比，DMY能更有效地維持胰腺B細(xì)胞功能、提高脂聯(lián)素水平和調(diào)節(jié)血脂，而且DMY不會(huì)引起體重增加和肝臟中的脂肪堆積[47]。

1.7 解酒護(hù)肝作用 Hampton等[48]通過(guò)實(shí)驗(yàn)反復(fù)證實(shí)了多種藥物(例如巴氯芬和羥丁酸鈉)可用于治療動(dòng)物模型的酒精中毒或酒精使用障礙，然而這些藥物的臨床應(yīng)用都受限于患者極快地產(chǎn)生抗藥性及其嚴(yán)重的副作用。國(guó)內(nèi)有報(bào)道稱，DMY預(yù)防給藥可延長(zhǎng)小鼠翻正反射消失時(shí)間，縮短維持時(shí)間；給予醉酒小鼠DMY后，醒酒時(shí)間縮短，說(shuō)明DMY具有一定的防醉解酒作用[49]。另有報(bào)道稱，GABAAR是急慢性酒精中毒在大腦中的主要靶點(diǎn)，DMY可通過(guò)調(diào)節(jié)海馬功能和GABAAR α4亞基的表達(dá)水平，中和急性酒精中毒，對(duì)抗大鼠因酒精暴露或戒斷而引起的興奮性亢進(jìn)和癲癇敏感性增加[50]。

此外，DMY還可以通過(guò)調(diào)節(jié)p62和自噬串?dāng)_Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1/核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2通路，降低慢性酒精暴露引起的肝酶釋放、肝脂過(guò)氧化和甘油三酯沉積，從而起到護(hù)肝作用，并且DMY顯著抑制了由酒精引起的炎癥細(xì)胞因子白細(xì)胞介素1β和白細(xì)胞介素6水平升高，可改善酒精性肝病小鼠模型肝臟病理變化[51]。閻莉等[52]建立撤除苯巴比妥鈉致肝細(xì)胞凋亡的小鼠模型，采用流式細(xì)胞術(shù)及細(xì)胞原位缺口末端標(biāo)記法檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡率，結(jié)果表明，DMY可明顯抑制苯巴比妥鈉撤除誘導(dǎo)的小鼠肝細(xì)胞凋亡，提示抑制肝細(xì)胞凋亡可能是DMY護(hù)肝作用的機(jī)制之一。

1.8 其他作用 DMY除了具有抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)、抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)免疫等藥理作用外，還能發(fā)揮抗疲勞、防治腎結(jié)石以及降尿酸等作用。DMY能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，增加肝糖原在體內(nèi)儲(chǔ)備量，降低血乳酸、尿素氮、丙二醛水平，提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性，升高過(guò)氧化物酶增殖物活化受體γ輔激活因子1α、過(guò)氧化物增殖物活化受體α的表達(dá)水平，從而提高小鼠的運(yùn)動(dòng)能力，發(fā)揮抗疲勞作用[53]。DMY可通過(guò)降低腎結(jié)石大鼠模型血清尿素氮、肌酐和尿中鈣、尿酸含量，增加腎組織超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量，改善腎結(jié)石小鼠腎組織中草酸鈣結(jié)晶情況，對(duì)大鼠腎結(jié)石有一定的防治作用[54]。李廣枝等[55]采用腺嘌呤聯(lián)合乙胺丁醇建立小鼠高尿酸血癥模型，給予小鼠不同劑量(0.752 g/kg、0.376 g/kg、0.187 g/kg)DMY灌胃給藥，通過(guò)檢測(cè)小鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐的含量，發(fā)現(xiàn)中、高劑量DMY均具有明顯的降低血清尿酸作用。

2 小 結(jié)

DMY作為藤茶中黃酮類物質(zhì)的主要有效成分，具有抗炎、抗氧化、抑菌、抗腫瘤、調(diào)血脂、降血糖等藥理作用。盡管其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥動(dòng)學(xué)研究資料、藥理作用機(jī)制、臨床研究等方面還需要進(jìn)一步研究和確證，但隨著DMY分子水平研究、細(xì)胞水平研究、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用研究的不斷開(kāi)展，進(jìn)一步顯示出DMY的潛在藥用價(jià)值，為臨床應(yīng)用提供了廣闊的發(fā)展前景。