肖金星 鐘志文 相興偉 鄭剛 邵慶均 周宇芳

摘要：為探究南極磷蝦（Euphausia superba）粉對(duì)黑鯛（Acanthopagrus schlegelii）幼魚生長(zhǎng)性能和魚體組織氟蓄積的影響，選用初始體質(zhì)量為（11.22±0.15） g的黑鯛幼魚隨機(jī)分為6組，投喂采用南極磷蝦粉分別替代基礎(chǔ)日糧中0%（對(duì)照組）、10%、20%、30%、40%、50%魚粉的6組試驗(yàn)飼料，開展8周的室內(nèi)微流水養(yǎng)殖。結(jié)果顯示，隨著飼料中南極磷蝦粉添加量的增加，黑鯛幼魚的增質(zhì)量率呈現(xiàn)先提高后下降趨勢(shì)，南極磷蝦粉的添加量為7.5%和11.2%的試驗(yàn)組的增質(zhì)量率顯著高于基礎(chǔ)日糧組（P<0.05）;各組織出現(xiàn)不同程度的氟蓄積：魚骨>魚鰓>鱗片>魚皮>肝臟>肌肉，肌肉中氟含量在各試驗(yàn)組之間沒有顯著差異（均低于2 mg/kg）。本研究表明，南極磷蝦粉能夠提高黑鯛幼魚的生長(zhǎng)性能，可作為黑鯛飼料的魚粉替代蛋白源。

關(guān)鍵詞：黑鯛幼魚;南極磷蝦粉;生長(zhǎng)性能;氟蓄積

中圖分類號(hào)：S963.73?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A?文章編號(hào)：1002-1302（2020）21-0202-05

南極磷蝦（Euphausia superba）是一種小型海洋浮游冷水性蝦類，主要分布在南極海域[1]，資源豐富，是世界海洋生物儲(chǔ)備量最大的生物之一，開發(fā)潛力巨大，被認(rèn)為是地球上最大的蛋白質(zhì)資源庫(kù)[2]。隨著世界海洋漁業(yè)資源的逐漸萎縮，開發(fā)和利用南極磷蝦資源是必然的選擇[3]。南極磷蝦粉富含多種不飽和脂肪酸、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和微量元素，且富含蝦青素和胡蘿卜素，對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)、免疫力和體色有積極的影響[4-6]，是一種良好的飼料蛋白源[7]。然而，南極磷蝦極易發(fā)生氟蓄積，其體內(nèi)氟含量可達(dá)到800～2 400 mg/kg，南極磷蝦粉氟含量可達(dá)到2 518 mg/kg[8-10]，限制了其在動(dòng)物飼料中的添加量。因此，研究水產(chǎn)動(dòng)物攝食南極磷蝦粉后，魚體內(nèi)氟蓄積和分布情況，對(duì)于南極磷蝦粉作為水產(chǎn)飼料蛋白源的安全性評(píng)估具有重要的意義。

黑鯛（Acanthopagrus schlegelii），具有廣溫廣鹽性、抗逆性強(qiáng)、生長(zhǎng)迅速、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，是海水增養(yǎng)殖和放流的優(yōu)良品種，市場(chǎng)前景廣闊[11-12]。王月研究表明，在大豆?jié)饪s蛋白為主要蛋白源的飼料中添加全磷蝦粉，可以顯著提高黑鯛幼魚的增質(zhì)量率和飼料效率，但是未開展黑鯛體內(nèi)氟蓄積研究[13]。本試驗(yàn)以黑鯛幼魚為研究對(duì)象，投喂以南極磷蝦粉替代部分魚粉的飼料，開展為期8周的養(yǎng)殖試驗(yàn)，研究飼料中南極磷蝦粉替代魚粉對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)性能和魚體氟蓄積的影響，為南極磷蝦粉在黑鯛等海水魚飼料中的應(yīng)用以及飼料蛋白源的開發(fā)提供基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 養(yǎng)殖試驗(yàn)

本試驗(yàn)于2017年7月28日至2017年9月23日在浙江省海洋水產(chǎn)研究所西軒島試驗(yàn)基地開展，試驗(yàn)用黑鯛幼魚由試驗(yàn)基地提供。挑選初始體質(zhì)量為（11.22±0.15） g的黑鯛幼魚隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25尾魚，放入容積為 310 L、玻璃纖維缸內(nèi)微流水式養(yǎng)殖56 d。養(yǎng)殖試驗(yàn)期間，試驗(yàn)黑鯛分別投喂6組試驗(yàn)飼料（D1～D6），每天飽食投餌2次（08：00 和16：00）[14]。

1.2 飼料配方

根據(jù)黑鯛營(yíng)養(yǎng)需求研究，設(shè)計(jì)了基礎(chǔ)飼料配方，采用南極磷蝦粉（氟含量為1 200 mg/kg）分別替代基礎(chǔ)飼料中0%、10%、20%、30%、40%、50%的魚粉，制成6組等能等氮的試驗(yàn)飼料（D1～D6），各組試驗(yàn)飼料組分及營(yíng)養(yǎng)組成見表1。飼料原料在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)加工成粒徑為2.5 mm的顆粒飼料，干燥后，保存于-20 ℃冰柜中備用[14]。

1.3 樣品采集及分析測(cè)定

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，將試驗(yàn)魚饑餓24 h后，用 MS-222（60 mg/L）麻醉，計(jì)數(shù)并稱質(zhì)量、測(cè)體長(zhǎng)。試驗(yàn)魚尾靜脈取血后，取魚皮、鱗片、鰓、背部肌肉、肝臟、脊椎骨，采用超純水清洗，濾紙吸干，105 ℃烘干并研碎，-20 ℃保存?zhèn)溆肹14]。

飼料中氟含量采用GB/T 13083—2002標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè);其他樣品中氟含量采用GB/T 5009.18—2003第三法檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

本試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，SPSS 16.0軟件進(jìn)行單因素方差分析后，采用Tukey's多重比較檢驗(yàn)組間差異，顯著水平P取0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 南極磷蝦粉對(duì)黑鯛幼魚增質(zhì)量率的影響

由圖1可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚的增質(zhì)量率先增高后降低。飼料中南極磷蝦粉的添加量為7.5%和11.2%試驗(yàn)組的增質(zhì)量率顯著高于對(duì)照組（P<0.05），其余各試驗(yàn)組的增質(zhì)量率與對(duì)照組無明顯差異（P>0.05）。

2.2 南極磷蝦粉對(duì)黑鯛幼魚組織氟含量的影響

2.2.1 肌肉 由圖2可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，各試驗(yàn)組黑鯛幼魚肌肉中氟含量沒有顯著差異（P>0.05），且均低于2 mg/kg。

2.2.2 肝臟 由圖3可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚肝臟中氟含量顯著升高（P<0.05），當(dāng)飼料中南極磷蝦粉添加量達(dá)到18.7%時(shí)，黑鯛幼魚肝臟中氟含量最高達(dá)到 42.33 mg/kg。

2.2.3 魚皮 由圖4可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚魚皮中氟含量顯著升高（P<0.05），當(dāng)飼料中南極磷蝦粉添加量達(dá)到18.7%時(shí)，黑鯛幼魚魚皮中氟含量最高，達(dá) 73.67 mg/kg。

2.2.4 鱗片 由圖5可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚鱗片中氟含量顯著升高（P<0.05），當(dāng)飼料中南極磷蝦粉添加量達(dá)到18.7%時(shí)，黑鯛幼魚鱗片中氟含量最高，達(dá)到 803.33 mg/kg。

2.2.5 魚鰓 由圖6可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚魚鰓中氟含量顯著升高（P<0.05），當(dāng)飼料中南極磷蝦粉添加量達(dá)到18.7%時(shí)，黑鯛幼魚魚鰓中氟含量最高，達(dá)到 925.00 mg/kg。

2.2.6 魚骨 由圖7可知，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的提高，黑鯛幼魚魚骨中氟含量顯著升高（P<0.05），當(dāng)飼料中南極磷蝦粉添加量達(dá)到18.7%時(shí)，黑鯛幼魚魚骨中氟含量最高，達(dá)978.33 mg/kg。

3 討論與結(jié)論

3.1 南極磷蝦粉對(duì)黑鯛幼魚生長(zhǎng)性能的影響

目前，有關(guān)南極磷蝦粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)的影響已有較多研究，有報(bào)道指出在飼料中添加適量的南極磷蝦粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用[15]，但是飼料中添加過量的南極磷蝦粉則可能導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能降低[16]。Suontama等研究發(fā)現(xiàn)，采用南極磷蝦粉替代飼料中40%的魚粉，可顯著提高大西洋鮭（Salmo salar）的特定生長(zhǎng)率，可能是由于與魚粉相比，南極磷蝦粉營(yíng)養(yǎng)組成更適合于大西洋鮭的生長(zhǎng)需求，進(jìn)而促進(jìn)其特定生長(zhǎng)率的提高[17]。Gaber研究發(fā)現(xiàn)，添加1.5%的南極磷蝦粉可以提高尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）的攝食率、增質(zhì)量率和生長(zhǎng)速度，可能是由于南極磷蝦粉具有誘食效果，可以提高尼羅羅非魚的攝食量，進(jìn)而提升其增質(zhì)量率[15]。Hansen等采用磷蝦粉完全替代飼料中魚粉，得到氟含量分別為470、640 mg/kg 的試驗(yàn)飼料，投喂大西洋鮭100 d后，發(fā)現(xiàn)前者大西洋鮭的生長(zhǎng)性能與對(duì)照組無顯著差異，而后者大西洋鮭的增質(zhì)量率明顯降低[16]。Yoshitomi等研究發(fā)現(xiàn)，采用全磷蝦粉替代飼料中的魚粉，虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的生長(zhǎng)性能顯著低于對(duì)照組，推測(cè)可能是因?yàn)楣趋乐蟹男罘e對(duì)虹鱒的生長(zhǎng)具有抑制作用[17]。上述研究表明，南極磷蝦粉對(duì)不同水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響差異明顯，這可能與水產(chǎn)動(dòng)物的品種、生長(zhǎng)階段和生活環(huán)境等有關(guān)，其機(jī)制還需進(jìn)一步深入研究。

本研究中，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的增加，黑鯛幼魚的增質(zhì)量率先增高后降低，南極磷蝦粉的添加量為7.5%和11.2%試驗(yàn)組的增質(zhì)量率顯著高于基礎(chǔ)日糧組（P<0.05），表明南極磷蝦粉替代適當(dāng)比例的魚粉可以提高黑鯛幼魚的生長(zhǎng)性能;其余各試驗(yàn)組的增質(zhì)量率與對(duì)照組無明顯差異（P>0.05），飼料中添加18.7%的南極磷蝦粉對(duì)黑鯛幼魚的生長(zhǎng)未產(chǎn)生不利影響。以生長(zhǎng)性能為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黑鯛幼魚飼料中南極磷蝦粉的最適添加量為11.2%。

3.2 南極磷蝦粉對(duì)黑鯛幼魚組織氟蓄積的影響

目前，關(guān)于南極磷蝦粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物組織氟蓄積的影響已有大量研究，有研究表明水產(chǎn)動(dòng)物攝食添加南極磷蝦粉的飼料后，魚體組織通常發(fā)生氟蓄積[18-19]，但也有研究發(fā)現(xiàn)魚體組織氟含量未產(chǎn)生明顯變化[20-21]。本研究對(duì)攝食添加南極磷蝦粉的飼料后黑鯛幼魚組織中氟含量進(jìn)行測(cè)定發(fā)現(xiàn)，氟在黑鯛幼魚組織中的分布程度，以魚鰓、魚骨和鱗片中的氟含量最高，其次是魚皮和肝臟組織，肌肉中氟含量最低，各組織按照氟含量排序?yàn)椋呼~骨>魚鰓>鱗片>魚皮>肝臟>肌肉，這與黃艷青等在點(diǎn)帶石斑魚上的研究結(jié)果[22]相似。

水產(chǎn)動(dòng)物攝入的氟主要在骨骼、魚鰓、鱗片等[17]的硬組織器官發(fā)生沉積，這可能是水產(chǎn)動(dòng)物預(yù)防氟損傷的一種保護(hù)機(jī)制[18]，以免高濃度的氟進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)。研究發(fā)現(xiàn)，部分魚類骨骼中的氟含量與南極磷蝦粉在飼料中的添加量呈正相關(guān)，例如虹鱒[17]、珍珠龍膽石斑魚（Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂）[23]和黃尾（Seriola lalandi）[24]等。然而，對(duì)凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）[20]、虹鱒[21]、大西洋鮭[25]等的研究發(fā)現(xiàn)，南極磷蝦粉對(duì)魚骨中的氟含量沒有顯著影響。上述的研究表明，攝食添加南極磷蝦粉的飼料后，水產(chǎn)動(dòng)物組織氟蓄積的情況受到水產(chǎn)動(dòng)物品種的影響。本研究中，黑鯛幼魚攝食添加南極磷蝦粉的飼料8周后，黑鯛幼魚各組織中以脊椎骨的氟含量最高，達(dá)到978 mg/kg，這與Yoshitomi等[17]和Grave[19]的研究結(jié)果相一致。本研究中，添加7.5%和11.2%的南極磷蝦粉替代飼料中魚粉，黑鯛幼魚的增質(zhì)量率呈現(xiàn)顯著的提高，繼續(xù)增加南極磷蝦粉的用量，黑鯛幼魚的增質(zhì)量率出現(xiàn)一定的下降，可能是因?yàn)楹邗犛佐~魚骨中氟的蓄積，影響了骨骼的發(fā)育，導(dǎo)致了黑鯛幼魚生長(zhǎng)速度變慢。另外，黑鯛幼魚魚鰓、鱗片中的氟含量均高于800 mg/kg，鱗片是外骨骼，魚鰓是軟骨組織，進(jìn)一步印證了氟在黑鯛幼魚硬組織和軟骨組織中發(fā)生明顯的蓄積現(xiàn)象，符合氟在生物體內(nèi)的分布規(guī)律，這與Shi等給西伯利亞鱘（Acipenser baerii）幼魚投喂氟含量75.2～1 478.3 mg/kg 飼料，經(jīng)12周養(yǎng)殖，發(fā)現(xiàn)其鱗片、軟骨和鰓等組織發(fā)生顯著氟蓄積的研究結(jié)果[26]一致。

本研究中，黑鯛幼魚攝食南極磷蝦粉替代部分魚粉的飼料后，氟在魚皮和肝臟中出現(xiàn)蓄積現(xiàn)象，并且氟含量隨著南極磷蝦粉添加量的增加呈現(xiàn)正相關(guān)的效應(yīng)，而黃艷青等采用添加0%～6%的南極大磷蝦粉飼料投喂點(diǎn)帶石斑魚100 d，發(fā)現(xiàn)肝臟中氟含量在各組間無顯著差異[22];Shi等給西伯利亞鱘幼魚投喂氟含量為75.2～1 478.3 mg/kg的飼料（以氟化鈉形式添加）養(yǎng)殖12周，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間和飼料氟含量增加，對(duì)肝臟中氟含量無顯著影響[26]，本研究結(jié)果與之不一致，這可能是因?yàn)椴煌贩N的水產(chǎn)動(dòng)物肝臟對(duì)氟離子代謝的能力不一致，有待進(jìn)一步研究確認(rèn)。

本研究中，隨著南極磷蝦粉在飼料中用量的增加，各試驗(yàn)組黑鯛幼魚肌肉中氟含量與對(duì)照組相比沒有顯著差異（P>0.05），黑鯛幼魚肌肉未出現(xiàn)氟蓄積，這也表明肌肉并非食源氟蓄積的靶器官，這與虹鱒[8，17]、大西洋鱈魚[21]、大西洋鮭[21]、西伯利亞鱘[26]等的研究結(jié)果相類似。黑鯛幼魚肌肉中氟的含量均<2 mg/kg，符合食品中氟的限量標(biāo)準(zhǔn)（GB 4809—1984）[27]。

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