吳勇 嚴偉益 潘傳豪 莫洋 謝又興 施鋼

摘 要 為研究水產(chǎn)麻醉藥品對珍珠龍膽石斑魚的麻醉效應，以苯唑卡因、丁香酚、MS-222為主麻醉藥品，以依托咪酯、2-苯氧乙醇為預麻醉藥品，對珍珠龍膽石斑魚在（20±0.5）℃、（25±0.5）℃水溫下進行了麻醉實驗，麻醉效果判定標準為同時滿足進入深度麻醉（IS3）的引導時間300 s以內(nèi)并且完成恢復時間300 s。結(jié)果表明：在實驗濃度下，單種和混合麻醉實驗中，各組實驗的珍珠龍膽石斑魚成活率均為100%;在單種麻醉實驗中，推薦水溫25 ℃，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作為麻醉劑，其推薦濃度分別為40 mg·L-1、20 mL·L-1、80 mL·L-1;混合麻醉組合中，推薦水溫25 ℃，依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作為預麻醉劑，其推薦濃度為3 mg·L-1、0.4 mL·L-1，

主麻醉藥為苯佐卡因或者MS-222，其推薦濃度為苯佐卡因40 mg·L-1或者60 mg·L-1，MS-222 80 mg·L-1。

關(guān)鍵詞 珍珠龍膽石斑魚;苯唑卡因;丁香酚;MS-222（間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽）;依托咪酯;2-苯氧乙醇;麻醉

中圖分類號：S965.334 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.20.072

龍虎斑為棕點石斑魚（E. fuscoguttatus♀）和鞍帶石斑魚（E. lanceolatus♂）的雜交品種，俗稱龍虎斑或珍珠斑，在臺灣、新加坡和馬來西亞被稱為珍珠龍膽或珍珠斑[1-3]。目前，國內(nèi)對珍珠龍膽石斑魚的相關(guān)研究報道較多，如珍珠龍膽石斑魚營養(yǎng)成分與品質(zhì)的研究[4]、溫度對于珍珠龍膽石斑魚呼吸與排泄的影響[5]、溫度和鹽度對龍虎斑存活和攝食的影響[6]、鹽度對龍虎斑的影響[7]等;Salim Farrakhan等[8]對珍珠龍膽的鹽度耐受性和滲透壓調(diào)節(jié)等進行了研究。但是，關(guān)于麻醉劑對珍珠龍膽石斑魚的麻醉效應研究尚無報道。

在魚類麻醉劑中，較為常用的為丁香酚（Eugenol，4-allyl-2-methyoxyphenol）、苯唑卡因（Benzocaine）、MS-222（Tricaine mesylate）、2-苯氧乙醇（2-phenoxyethanol）和依托咪酯（Etomidate）等。其中，丁香酚對魚類的麻醉研究目前已有丁香酚對于斑馬魚[9]、大黃魚[10]、鯔魚[11]多種魚類的麻醉作用研究。苯唑卡因與MS-222在挪威被批準應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)[12-13]。MS-222，又名間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽，F(xiàn)DA批準將MS-222作為魚用麻醉劑，用MS-222麻醉過的魚須在清水中飼養(yǎng)21 d后才能出售[14]。目前關(guān)于MS-222的研究有：任潔等[14]研究了MS-222對于活魚運輸?shù)男Ч顐I(yè)等[15]研究了MS-222對于東海帶魚幼魚麻醉效果。2-苯氧乙醇，又名乙二醇苯醚，目前關(guān)于2-苯氧乙醇應用于魚類麻醉的研究有其對于扁吻魚幼魚[16]、尼羅羅非魚[17]、許氏平鲉幼魚[18]的麻醉作用等。依托咪酯為咪唑類衍生物，系催眠性靜脈麻醉藥，其麻醉特點為短效而且速效，對呼吸、循環(huán)影響很小，誘導與蘇醒均較快，相對安全[19]。目前，對于依托咪酯的相關(guān)報道較少，有胡紅專等[20]報道依托咪酯的藥理特點和臨床應用，還有研究報道依托咪酯對斑馬魚的麻醉效果[21]。

為在捕捉等操作時降低魚體的應激反應和魚體的損傷，需對魚類進行麻醉，此外，麻醉還可有效降低其呼吸頻率與耗氧量，提高運輸密度與成活率[22]?；诖?，研究丁香酚、苯唑卡因、MS-222、2-苯氧乙醇和依托咪酯這5種麻醉藥品對大規(guī)格珍珠龍膽石斑魚的單獨或組合麻醉效應，以期為珍珠龍膽石斑魚捕撈作業(yè)、活魚運輸?shù)忍峁┞樽砝碚搮⒖家罁?jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

珍珠龍膽石斑魚來自廣東海洋大學東海島海洋生物研究基地，實驗選取了體長（22.68±1.24）cm，體重（355.03±44.32）g珍珠龍膽石斑魚720尾來進行。實驗前3 d停止投喂。

丁香酚、苯唑卡因、2-苯氧乙醇、MS-222和依托咪酯由上海麥克林生化科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

實驗用海水鹽度為30，pH為7.96～8.20，溫度17～23 ℃，水溫控制在20±0.5 ℃或25±0.5℃。

魚體麻醉狀態(tài)分析，參照Pawar的文獻[23]修改后的麻醉狀態(tài)判斷標準。

實驗濃度梯度設(shè)置如表1和表2所示，單種麻醉藥物采用苯唑卡因、丁香酚和MS-222，混合麻醉藥物采用2-苯氧乙醇和依托咪酯為預麻醉劑，苯唑卡因、丁香酚和MS-222為麻醉藥品。除麻醉實驗組外，另設(shè)對照組1組，加入等量水或無水乙醇，所有試驗組和對照組合記錄20尾魚的IS3（深度麻醉）和RS3（恢復期）時間數(shù)據(jù)及存活率。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

實驗數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2010和IBM SPSS 19.0 STATISTICS軟件進行統(tǒng)計學分析，先做方差分析，再進行多重比較[24-25]。

2 結(jié)果與分析

2.1 單種麻醉實驗結(jié)果

2.1.1 成活率

1～12組的實驗組所有麻醉和恢復成活率均為100%。

2.1.2 魚體進入深度麻醉時間

表3數(shù)據(jù)表明，第4組（170.05 s）最快由正常進入IS3，且與其他各組入麻時間差異顯著（p<0.05）;第9組（746.25 s）最遲由正常狀態(tài)進入IS3，且入麻時間與其他各組差異顯著（p<0.05）。

2.1.3 魚體由深度麻醉進入恢復期時長

由表4得出，第5組（140.25 s）的魚最快由IS3進入RS3，第4組（425.80 s）最遲由IS3進入RS3，并且與其他各組差異顯著（p<0.05）。

綜合入麻時間和恢復時間，第2組、第8組、第12組比較適合用來麻醉此規(guī)格的珍珠龍膽石斑魚。單種麻醉實驗中，推薦水溫25℃，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作為麻醉劑，其推薦濃度分別為40 mg·L-1、

20 mL·L-1和80 mL·L-1。

2.2 混合麻醉實驗結(jié)果

2.2.1 成活率

13～36組的實驗組所有實驗魚麻醉和恢復成活率均為100%。

2.2.2 魚體進入深度麻醉（IS3）時長

如表5所示，第36組的魚最快由正常狀態(tài)進入IS3（223.85 s），其入麻時間與其他所有組差異均顯著

（p<0.05）;由正常狀態(tài)進入IS3時間跨度最長的是第21組，其平均入麻時間長達581.20 s，其他所有各組之間差異均顯著（p<0.05）。入麻時間合適的混合麻醉組合為第16組、第18組、第20組、第28組、第32組和第36組。

2.2.3 魚體由深度麻醉狀態(tài)（IS3）進入恢復期（RS3）時長

如表6所示，第22組（105.45 s）的魚最快由IS3進入RS3，其恢復時間與第13組、21組、25組恢復時間無統(tǒng)計學差異（p>0.05），而與其他各組恢復時間差異極顯著（p<0.05）;第28組由IS3進入RS3時間最長，其恢復時間與其他組間兩兩比較差異均極顯著。單純考慮恢復時間，除了第20組、第28組恢復時間超過300 s，其他各組的恢復時間均在300 s以內(nèi)，均可以作為麻醉應用中的麻醉組合。

綜合入麻時間和恢復時間，第16組、第18組、第32組和第36組比較適合用來麻醉此規(guī)格的珍珠龍膽石斑魚?；旌下樽斫M合中，推薦水溫25 ℃;依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作為預麻醉劑，其預麻醉濃度分別為3.0 mg·L-1、0.4 mL·L-1;主麻醉藥品為苯佐卡因或MS-222，其麻醉濃度為苯佐卡因40 mg·L-1或者60 mg·L-1，MS-222 80 mg·L-1。

3 討論

3.1 麻醉藥品濃度對麻醉效應的影響

麻醉劑作用機制為：先抑制了魚類的腦皮質(zhì)使其喪失觸覺，再作用在魚類的基底神經(jīng)節(jié)和小腦，使其興奮，最后作用在脊髓，過大劑量、過長時間接觸可深及髓質(zhì)，使呼吸和血管舒縮中樞呈麻痹狀態(tài)，最終致死[19]。處于麻醉狀態(tài)之中的魚可通過自身的新陳代謝，解除麻醉狀態(tài)，從而進入恢復期[26]。單種麻醉實驗結(jié)果中，丁香酚、苯佐卡因、MS-222三者的入麻時間都隨著麻醉濃度的升高而顯著加快，這與李靖等[27]的丁香酚對大西洋鮭的麻醉效果的實驗研究結(jié)果一致;苯佐卡因和丁香酚的恢復時間隨著麻醉濃度的升高而顯著變慢，但是MS-222的兩種設(shè)計濃度下，恢復時間隨著麻醉濃度的升高，變化無統(tǒng)計差異。這可能是藥品的濃度不同或者MS-222濃度設(shè)計的梯度差異較小導致的，不同麻醉藥物對珍珠龍膽石斑魚產(chǎn)生麻醉作用的生理過程不一樣，可能是受魚體內(nèi)部對藥品的吸收和代謝的影響。

3.2 溫度對單種麻醉實驗麻醉效應的影響

在單種麻醉實驗中，苯佐卡因和MS-222的入麻時間都隨著溫度的升高而加快，丁香酚入麻時間僅在

20 mg·L-1隨著溫度的升高而變長，且差異顯著（p<0.05）。這一結(jié)果與張麗等[28]關(guān)于MS-222對大黃魚的麻醉效果的研究結(jié)果部分相似：在16 ℃時，大黃魚的入麻所需時間是最長且最穩(wěn)定的，隨著溫度改變，入麻時間遞減且趨于不穩(wěn)定。這可能是水溫不同，珍珠龍膽石斑魚生理狀態(tài)不一樣而導致的。

4 結(jié)論

麻醉實驗中，各組實驗的珍珠龍膽石斑魚成活率均為100%;無論是單種、混合麻醉實驗，對于此規(guī)格珍珠龍膽石斑魚更合適的麻醉水溫均是25 ℃。單種麻醉實驗中，苯佐卡因、丁香酚、MS-222均可作為麻醉劑;混合麻醉組合中，依托咪酯、2-苯氧乙醇均可作為預麻醉劑，主麻醉藥品為苯佐卡因或者MS-222。

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（責任編輯：劉昀）