新冠肺炎疫情發(fā)生以來,關(guān)于核酸檢測假陰性率過高的話題,一直是各方關(guān)注的焦點(diǎn)。有報(bào)道稱,以熒光定量RT-PCR作為檢測手段的新冠病毒檢測的陽性率目前僅有30%~50%,導(dǎo)致奇高的假陰性率。
導(dǎo)致假陰性率發(fā)生的原因很多。2月22日,南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所發(fā)育生物學(xué)與遺傳學(xué)教授趙慶順接受記者獨(dú)家采訪時(shí)指出,依據(jù)有關(guān)機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南,核酸檢測前需將采集到的樣品進(jìn)行56℃滅活,這極有可能使新冠病毒核酸被降解,從而導(dǎo)致不能被正常檢出,最終提高了假陰性率。該研究成果《病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量》,已在中國科學(xué)院科技論文平臺(tái)預(yù)發(fā)布。
趙慶順在網(wǎng)絡(luò)上看到一個(gè)教學(xué)視頻。該視頻由北京協(xié)和醫(yī)院和北京市衛(wèi)健委聯(lián)合制作。視頻顯示:在制備核酸模板前,需將采集到的樣品在56℃條件下進(jìn)行30分鐘病毒滅活,然后才制備核酸模板。
記者通過采訪確認(rèn),絕大多數(shù)檢驗(yàn)醫(yī)師均按照上述規(guī)范,進(jìn)行56℃條件下時(shí)間不等的病毒滅活,然后才制備核酸模板。
這樣做帶來的問題是,病毒RNA極易被核糖核酸酶降解,因?yàn)檫@種酶在60℃時(shí)活性最高。
“進(jìn)行滅活處理是出于生物安全的考慮,保護(hù)從事檢測的工作人員不被病毒感染。”趙慶順說。正是出于這方面的考慮,國家衛(wèi)健委發(fā)布的相關(guān)文件中,明確要求對(duì)標(biāo)本進(jìn)行滅活處理。
但是,記者查詢了國家衛(wèi)健委相關(guān)文件,其對(duì)于病毒滅活的具體方法并未做出明確規(guī)定,只是籠統(tǒng)地要求:感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行核酸檢測。
“假陰性意味著漏檢,不僅會(huì)導(dǎo)致臨床中對(duì)疑似患者不能快速確診,而且會(huì)使漏檢者成為潛在的病毒傳染源。”趙慶順為此提出建議,一是盡量使用無核糖核酸酶污染的樣本采集管,二是將標(biāo)本放置在可保護(hù)病毒核酸免受高溫滅活損壞的樣品保存液中,從而確保樣品RNA從保存、運(yùn)輸?shù)礁邷販缁畹鹊玫饺瘫Wo(hù),盡最大可能保證用于臨床檢測的核酸質(zhì)量,減少病毒核酸可檢出模板在核酸提取前的人為損壞。