張小慢，郭鵬波

(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院/鄭州兒童醫(yī)院 河南省兒童遺傳代謝性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 鄭州 450018)

支原體是一類已知介于細(xì)菌和病毒間的能獨(dú)立生存的最小微生物，其中肺炎支原體(myoplasma pneumoniae，MP)是引起人類呼吸系統(tǒng)感染的一種常見病原體。MP感染會引起肺炎、咽炎、哮喘、支氣管炎、慢性咳嗽等，小兒發(fā)病率最高，主要通過呼吸道傳播，潛伏期2～3周，MP感染的患兒臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、厭食、咳嗽、畏寒、頭疼、咽痛、胸骨下疼痛等。MP感染引發(fā)的肺炎初期臨床特征往往不明顯，若不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)容易造成治療延誤。近年來，由于混合感染、對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥和MP定植造成的重癥和難治性支原體肺炎日趨增多[1]。因此，掌握MP感染的流行病學(xué)特征對疾病預(yù)防和臨床診治具有重要意義。目前，對于MP感染的診斷方法有臨床診斷、影像學(xué)診斷、培養(yǎng)法、血清學(xué)檢查、PCR-DNA和MP-RNA恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(MP-RNA isothermal amplification，MP-SAT)，其中MP-SAT具有檢測時(shí)間短、病程早期敏感度及特異度高的特點(diǎn)，陽性結(jié)果能反映MP在患兒體內(nèi)的存活情況。本研究選取2016年1月至2018年12月就診于鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院的25 007例MP感染患兒，采用MP-SAT進(jìn)行檢測，統(tǒng)計(jì)并分析其發(fā)病季節(jié)、發(fā)病年齡以及與患兒性別的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取河南地區(qū)2016年1月至2018年12月就診于鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院的25 007例患兒，其中男14 767例，女10 240例。就診患兒無明顯地區(qū)差異性，分布在河南省各個(gè)市縣；包含各年齡段兒童，年齡22 d～16歲，中位年齡2.42歲。

1.2 試劑和方法試劑使用上海仁度生物科技有限公司的MP核酸檢測試劑盒(RNA恒溫?cái)U(kuò)增)，儀器使用StepOnePlus熒光定量PCR儀。采集所有患兒咽拭子或痰液或肺泡灌洗液，通過核酸提取和MP-SAT檢測分析MP在患兒體內(nèi)的存活情況。

1.3 陽性判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)實(shí)時(shí)熒光信號的出現(xiàn)時(shí)間和強(qiáng)度，結(jié)合陽性對照、陰性對照、內(nèi)標(biāo)信號和熔解曲線，樣品曲線起峰高度高于內(nèi)參，且呈現(xiàn)典型的“S”曲線，可確診為MP感染陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。MP感染陽性率組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2016—2018年兒童MP感染陽性率2016年和2017年MP感染陽性率均高于2018年，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。2016年和2017年MP感染陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2016—2018年各年份MP-RNA檢測陽性率比較(n，%)

注：與2018年MP感染陽性率比較，aP<0.05。

2.2 不同季節(jié)兒童MP感染分布情況夏季和秋季MP感染陽性率均高于春季和冬季，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。春季和冬季MP感染陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，夏季和秋季MP感染陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同季節(jié)兒童MP-RNA檢測陽性率比較(n，%)

注：與春季和冬季MP感染陽性率比較，aP<0.05。

2.3 不同年齡段兒童MP感染分布情況3～<7歲學(xué)齡前兒童MP感染陽性率高于<1、1～<3歲嬰幼兒，7～<16歲學(xué)齡期兒童MP感染陽性率高于<1、1～<3歲嬰幼兒和3～<7歲學(xué)齡前兒童，1～<3歲幼兒MP感染陽性率高于<1歲嬰兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表3。

表3 不同年齡段兒童MP-RNA檢測陽性率比較(n，%)

注：與<1、1～<3歲嬰幼兒MP感染陽性率比較，aP<0.05；與<1、1～<3歲嬰幼兒和3～<7歲學(xué)齡前兒童MP感染陽性率比較，bP<0.05；與<1歲嬰兒MP感染陽性率比較，cP<0.05。

2.4 不同性別兒童MP感染分布情況女性兒童MP感染陽性率高于男性兒童，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同性別兒童MP-RNA檢測陽性率比較(n，%)

注：與男性兒童MP感染陽性率比較，aP<0.05。

3 討論

MP肺炎占兒童社區(qū)獲得性肺炎的10%～40%，流行年份可達(dá)50%左右[2]。MP感染是一種傳染性呼吸道感染疾病，患者和隱形感染者為主要的傳染源，通過飛沫經(jīng)呼吸道傳播，好發(fā)于學(xué)齡前和學(xué)齡期兒童。MP感染與年齡、性別和季節(jié)有一定的關(guān)系，不同性別和年齡患兒的MP發(fā)病率在不同地區(qū)具有相似性，而不同地區(qū)不同季節(jié)患兒的MP檢出率有一定差異[3]。

近年來，分子生物學(xué)DNA檢測和分子生物學(xué)RNA檢測的分子診斷技術(shù)廣泛應(yīng)用于MP診斷領(lǐng)域，包括常規(guī)PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等[4-5]。2019年中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會臨床檢驗(yàn)組學(xué)制訂的兒童MP呼吸道感染實(shí)驗(yàn)室診斷專家共識[6]，將分子生物學(xué)RNA檢測納入臨床診斷MP的一級推薦方法。本研究采用MP-SAT檢測MP特異性RNA，陽性結(jié)果可以反映MP在患者體內(nèi)的存活情況，該檢測方法具有檢測時(shí)間短、病程早期敏感度及特異性高的特點(diǎn)。相比于抗體檢測法，由于在MP感染早期MP-Ab抗體滴度較低，用此種檢測容易出現(xiàn)假陰性而造成漏診，而MP-SAT檢測可有效彌補(bǔ)此“窗口期”，提高陽性檢出率。且在MP感染患病不同時(shí)期，隨著用藥療程進(jìn)展，MP-SAT檢測陽性率逐漸降低，因此該方法在MP肺炎后期可輔助評估治療效果，為疾病分期提供有效參考。

本研究檢測出MP感染陽性例數(shù)共3 957例，總陽性率為15.82%，低于高孟娜等[7]報(bào)道的山東泰安地區(qū)MP感染率(30.03%)，與何雯等[8]報(bào)道2009—2014年7 934例就診于安徽省兒童醫(yī)院的兒童呼吸道MP感染的發(fā)病率(17.4%)相近。本研究中2016—2018年各年份MP感染陽性率分別為25.40%、27.60%、10.61%，2018年較前兩年MP感染陽性率顯著降低，與高孟娜等[7]報(bào)道的MP感染陽性率逐年增高的趨勢不相符，可能與不同的地區(qū)、環(huán)境、生活方式和檢測方法等因素有關(guān)，且本研究中2018年檢測MP感染的例數(shù)顯著多于2017年和2016年，這也是導(dǎo)致2018年總陽性率較低的一個(gè)原因。MP感染廣泛存在于世界各地，以散在性發(fā)病為主，每隔3～8 a出現(xiàn)1次地區(qū)流行，每次流行持續(xù)1～2 a。本研究結(jié)果顯示，MP感染春夏秋冬四季均可發(fā)生，春季陽性率為13.22%，夏季為17.94%，秋季為19.06%，冬季為13.04%，其中秋季(9—11月)和夏季(6—8月)相對較多，可認(rèn)為秋季和夏季為流行季，這與Kaluzewski等[9]報(bào)道的波蘭地區(qū)、胡雨生等[10]報(bào)道的安徽鹽城地區(qū)和Ma等[11]報(bào)道的臺灣地區(qū)MP肺炎多在秋冬季節(jié)好發(fā)略有差異，可能與地理、地域、氣候、環(huán)境不同有關(guān)，導(dǎo)致流行特點(diǎn)有所不同。

本研究結(jié)果顯示，<1歲嬰兒MP感染陽性率為6.32%，1～<3歲幼兒MP感染陽性率為11.86%，3～<7歲學(xué)齡前兒童MP感染陽性率為32.29%，7～<16 歲學(xué)齡期兒童MP感染陽性率為38.78%，4～16歲(學(xué)齡前和學(xué)齡兒童)MP感染陽性率最高，與大多數(shù)研究結(jié)果相符。表明該年齡段兒童為易感人群，可能與該年齡段兒童的生活環(huán)境和聚集場所有關(guān)，如人口密集的幼兒園、學(xué)校等，0～3歲嬰幼兒MP感染陽性率相對較低，可能是由于該年齡段MP感染癥狀不典型而被漏診或誤診。女性兒童MP感染陽性率高于男性兒童，說明女性兒童有較高的MP感染陽性率。

綜上所述，2016年和2017年為兒童MP感染流行年，夏季和秋季是MP感染的高發(fā)季節(jié)，3～<7歲學(xué)齡前和7～<16歲學(xué)齡期兒童是MP感染的易感人群，女性兒童有較高的MP感染率，掌握MP在本地區(qū)的感染現(xiàn)狀及流行病學(xué)特征，為臨床防治工作提供一定的參考價(jià)值。