崔銀 李明 杜道林
摘要:鄰苯二甲酸酯(PAEs)類化合物是一種被廣泛使用的環(huán)境激素類塑化劑,其對環(huán)境和人類健康的危害已經(jīng)引發(fā)多方關(guān)注,該類物質(zhì)的檢測,特別是簡便快速檢測對于保障環(huán)境食品安全及消費(fèi)者健康具有重要意義。目前,已有一系列免疫快速檢測技術(shù)以其簡單快速、低成本、高靈敏、高特異性、高通量的優(yōu)勢而被應(yīng)用于PAEs檢測,可以彌補(bǔ)色譜檢測技術(shù)設(shè)備昂貴、操作繁瑣、需要專業(yè)技術(shù)人員、難以實(shí)現(xiàn)大量樣品篩選目標(biāo)等不足。本文介紹了PAEs抗體及其免疫快速檢測技術(shù)的研究進(jìn)展,并進(jìn)行評價(jià)和展望,以期為PAEs快速檢測技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用提供指導(dǎo)和幫助。
關(guān)鍵詞:鄰苯二甲酸酯;塑化劑;免疫檢測;研究進(jìn)展
中圖分類號: X132;TS207文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A
文章編號:1002-1302(2020)04-0033-08
收稿日期:2019-01-09
基金項(xiàng)目:中國博士后基金(編號:2016M601745);江蘇大學(xué)高級人才啟動(dòng)基金(編號:16JDG035)。
作者簡介:崔?銀(1994—),女,江蘇鎮(zhèn)江人,碩士研究生,主要從事有毒有害物質(zhì)的快速分析研究。Tel:(0511)88790955;E-mail:candyminicy@163.com。
通信作者:杜道林,博士,教授,主要從事環(huán)境污染物的生態(tài)效應(yīng)和毒理研究。Tel:(0511)88790955;E-mail:ddl@ujs.edu.cn。
鄰苯二甲酸酯(phthalic acid esters,簡稱PAEs,別稱酞酸酯)類化合物是廣泛存在的一類環(huán)境激素類塑化劑,其作為增塑劑、軟化劑、載體及添加劑,被廣泛用于塑料、汽車、潤滑劑、化妝品、服裝、農(nóng)藥等行業(yè)[1-4]。PAEs具有很強(qiáng)的生物富集性和抗降解性,不僅對人體生殖、發(fā)育有很大影響,對神經(jīng)系統(tǒng)也有較大危害,此外還有致癌風(fēng)險(xiǎn)和環(huán)境生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)[5-8]。隨著長期使用和暴露,PAEs在環(huán)境介質(zhì)中釋放和進(jìn)入食物供應(yīng)鏈,導(dǎo)致其在大氣、水體、土壤和食品中均有不同程度的檢出,對環(huán)境和人體有極大的風(fēng)險(xiǎn)[9-11]。
2011年“中國臺灣塑化劑風(fēng)波”和2012年“大陸白酒塑化劑事件”使PAEs為廣大消費(fèi)者熟知并引起一定程度的恐慌[12-13]。近年來,PAEs的環(huán)境食品污染和毒理學(xué)研究已經(jīng)受到廣泛關(guān)注并成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。PAEs種類繁多,其20余種常見品種及其化學(xué)結(jié)構(gòu)式見表1,最常見的是DBP、DEHP,其中DEHP已經(jīng)被美國國家環(huán)境保護(hù)局(Environmental Protection Agency,簡稱USEPA)列為2B類致癌物[14]。許多國家已經(jīng)將多種PAEs確定為環(huán)境優(yōu)先控制的污染物,并制定限量或禁用標(biāo)準(zhǔn)。美國不允許在食品接觸材料中添加DBP、DIBP和DEHP,要求兒童玩具或兒童護(hù)理用品中6種PAEs(DEHP、DBP、BBP、DINP、DIDP、DnOP)的總含量不得超過0.1%[15]。歐盟指令2008/105/EC規(guī)定,地表水中DEHP的限值為1.3 μg/L。此外,歐盟不允許在食品接觸材料中添加DIBP,允許DBP、DEHP在非油脂食品接觸材料中使用,遷移限量為0.3 mg/kg[16]。原中國衛(wèi)生部規(guī)定(衛(wèi)辦監(jiān)督函[2011]551號),食品及食品添加劑中DBP、DEH、DINP的最大殘留量分別為0.3、1.5、9.0 mg/kg。GB 5749—2006《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中水質(zhì)參考指標(biāo)及限值規(guī)定,DEP的限值為0.3 mg/L,DBP的限值為0.003 mg/L,水質(zhì)非常規(guī)指標(biāo)及限值規(guī)定,DEHP的限值為0.008 mg/L[17]。
關(guān)于PAEs檢測方法的報(bào)道以氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS)等色譜檢測技術(shù)和一系列免疫快速檢測技術(shù)為主。加強(qiáng)PAEs檢測技術(shù),特別是高靈敏、簡便快速、高通量篩選、現(xiàn)場檢測方法的應(yīng)用,對于保障環(huán)境生態(tài)安全和食品消費(fèi)安全尤為重要。本文重點(diǎn)闡述國內(nèi)外廣泛關(guān)注的PAEs免疫快速檢測技術(shù)的研究進(jìn)展,以期為PAEs快速檢測技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用提供研究思路和方向。
免疫快速檢測方法的靈敏度和特異性與抗體的質(zhì)量和分析方法的類型密切相關(guān)。半抗原、人工抗原、抗體、標(biāo)記物是免疫分析的基本要素,其中抗體是免疫分析的核心試劑,半抗原、抗原的合成是小分子化合物抗體制備和分析方法建立的關(guān)鍵步驟[18]。研究表明,半抗原的結(jié)構(gòu)、連接臂的長度和結(jié)構(gòu)及其活性基團(tuán)的連接位點(diǎn)、抗體獲得途徑對抗體的特異性識別和靈敏度具有不同程度的影響。
1.1?抗原
對PAEs類塑化劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)式進(jìn)行分析可知,該類化合物擁有1個(gè)相同剛性平面芳烴-鄰苯二甲酸酯基團(tuán),區(qū)別在于2個(gè)可塑的非線性脂肪側(cè)鏈基團(tuán)。因此,PAEs半抗原化學(xué)合成改造也具有相似的途徑。分析當(dāng)前的報(bào)道可知,目前主要采用3種策略合成PAEs半抗原。第1種策略如Ius等以4- 羥基鄰苯二甲酸、甲醇為原料,合成4-羥基DMP后,與羧甲基羥胺半鹽酸鹽進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),獲得帶有—COOH間隔臂的DMP目標(biāo)半抗原[19]。第2種策略如Yanaihara等以4-硝基鄰苯二甲酸和甲醇為原料,從DMP分子苯環(huán)的酯基間位引入—NO2,合成4-硝基DMP,酯化反應(yīng)和還原反應(yīng)后獲得4-氨基DMP半抗原[20]。第3種策略如Tang等在DMP的苯環(huán)酯基間位引入—NH2后,通過縮合反應(yīng)與羧甲基羥胺半鹽酸鹽、丁二酸酐分別合成了2種長度—COOH間隔臂的DMP半抗原[21]。在PAEs免疫分析研究中,研究人員主要采用上述第2種策略,即從PAEs分子苯環(huán)酯基間位引入—NH2活性基團(tuán)的策略化學(xué)合成半抗原。在隨后的研究中,研究人員同樣采用第2種策略分別合成DCHP、DMP、DPrP、DIBP、DEP和DBP的4-氨基半抗原[22-31]。
在PAEs半抗原合成的基礎(chǔ)上,研究人員通常采用重氮法將—NH2化半抗原與牛血清白蛋白(BSA)或雞卵清蛋白(OVA)分別偶聯(lián)獲得免疫抗原和包被抗原,采用碳二亞胺法將—COOH半抗原與載體蛋白偶聯(lián)制備人工抗原。
1.2?抗體
研究人員用制備獲得的人工免疫抗原免疫新西蘭大白兔,從兔血清中分別純化獲得DCHP多克隆抗體、DPrP多克隆抗體、DIBP多克隆抗體、DEP多克隆抗體、DBP多克隆抗體和DMP多克隆抗體[22,24-26,28,30,32-33]。Wei等通過小白鼠免疫、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞篩選和抗體生產(chǎn)等流程,獲得DBP單克隆抗體[29,31]。Ius等用連接臂較長的DMP半抗原偶聯(lián)蛋白制備抗原后免疫新西蘭大白兔,獲得的多克隆抗體對DMP和其他多種PAEs均表現(xiàn)出較高程度的親和力,可以作為廣譜抗體對多種PAEs塑化劑進(jìn)行多組分檢測,表明較長的間隔臂有利于制備廣譜PAEs抗體[19,21]。
2?PAEs免疫的快速分析檢測
根據(jù)檢測模式、載體和標(biāo)記物的不同,多種免疫快速檢測技術(shù)被開發(fā)用于PAEs的分析檢測。研究人員將各種免疫分析模式和標(biāo)記物質(zhì)用于PAEs的快速分析檢測,開發(fā)獲得一系列免疫分析方法,并對方法的性能開展詳細(xì)的評估,使PAEs分析檢測技術(shù)得到極大的豐富,可以為PAEs安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)控儲備關(guān)鍵技術(shù)和重要生化材料。
2.1?微孔免疫分析檢測
2.1.1?酶免疫分析檢測?作為免疫分析方法的經(jīng)典方法和基礎(chǔ)方法,酶聯(lián)免疫吸附分析方法(ELISA)被廣泛用于PAEs分析方法的開發(fā)和應(yīng)用中,其中針對DMP、DBP的ELISA研究最多,也最深入。Zhang等將DMP多克隆抗體和辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)獲得酶標(biāo)記抗體,建立直接競爭ELISA(dc-ELISA)檢測DMP,線性范圍為0.1~2 000 ng/mL,檢測限為0.09 ng/mL,與其他結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)很低(<8.8%)[23]。Sun等在將DMP抗體生物化的基礎(chǔ)上,建立生物素-鏈霉親和素放大ELISA方法檢測DMP,檢測范圍為24~6 027 ng/mL,IC50為356 ng/mL,檢測限(LOD)為8.2 ng/mL,特異性較高,與類似物的交叉率低于10%,在檢測實(shí)際牛奶和奶制樣品中表現(xiàn)出很高的準(zhǔn)確度和精密度,并用GC-MS驗(yàn)證其檢測結(jié)果[27]。Wei等采用聚乙烯微孔表面羧基化和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)偶聯(lián)反應(yīng)將半抗原4-氨基DBP直接固定,建立基于單克隆抗體DBP的間接競爭ELISA(ic-ELISA)方法,相比于將包被抗原固定在微孔表面(IC50為106 ng/mL),這種直接固定半抗原的策略使靈敏度得到很大提高(IC50為14.6 ng/mL)。在特異性方面,除了對BBP的交叉率為21.3%外,其余的均低于7.98%,在食品樣品檢測中也表現(xiàn)出良好的準(zhǔn)確性和精確性,并通過GC-MS驗(yàn)證[29]。萬宇平等建立白酒中DBP檢測的ELISA方法,并研制成功試劑盒應(yīng)用于白酒樣品的檢測,方法檢測IC50為86.5 ng/mL,檢測范圍為0~1 620 ng/mL,在特異性方面對DIBP有45%的交叉率,對其他的交叉率均較低[34]。Xu等建立ic-ELISA檢測白酒中的DBP,檢測限達(dá)到64.5 ng/mL,檢測范圍為64.5~1 606.2 ng/mL,并與GC-MS進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)其相關(guān)系數(shù)為0.928[30]。Sun等將DBP多克隆抗體生物素化,建立生物素-親和素系統(tǒng)放大的ELISA檢測方法,檢測限達(dá)到5 pg/mL,IC50為0.36 ng/mL,檢測范圍為0.45~7.06 ng/mL,具有很高的特異性(<3.8%),在飲料和應(yīng)用水檢測中發(fā)現(xiàn)0.45~7.06 ng/mL的DBP被檢出[35]。Zhou等設(shè)計(jì)合成DBP半抗原和人工抗原,制備獲得單克隆抗體,建立的ELISA的最低檢測限為0.06 ng/mL,IC50為7.34 ng/mL,具有很高的特異性(<1.25%),該方法比多克隆抗體提高了1 000 倍的靈敏度,比其他報(bào)道的單抗靈敏度高5倍,并被應(yīng)用于人類尿液中DBP含量的分析檢測。結(jié)果表明,在1 246份尿液樣本中,有72.87%的檢出率,濃度為0~42.98 ng/mL,年輕人體內(nèi)的濃度低于年長者體內(nèi)的濃度[31]。
關(guān)于其他幾種PAEs的ELISA報(bào)道主要有DPrP、DEP、DEHP。Zhang等將DPrP包被抗原和HRP偶聯(lián)作為標(biāo)記物,建立直接競爭化學(xué)發(fā)光ELISA(CL-ELISA)用于水樣、牛奶樣品中DPrP的檢測,IC50為0.19 ng/mL,LOD為0.03 ng/mL,交叉反應(yīng)率低于9%,樣品未經(jīng)凈化處理和濃縮,表現(xiàn)出很小的基質(zhì)影響,很好地展示出該免疫分析方法的簡便性[24]。Zhang等建立DEP的ic-ELISA,檢 測 范 圍為0.005~18.6 ng/mL,檢測限為0.004 9 ng/mL,與其他結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)率很低(<9%),在果汁、奶茶、純奶和酸奶樣品中的添加回收率在91.1%~109.3%之間[26]。Zhang等制備獲得DEHP多克隆抗體并與HRP偶聯(lián)作為檢測探針建立了dc-ELISA方法,最低檢測限為0.004 2 ng/mL,檢測范圍為0.001~1 000 ng/mL,與結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)率低于1%,并且被成功應(yīng)用于嬰兒用品中DEHP的檢測[36]。
2.1.2?熒光免疫分析檢測?熒光免疫分析方法(FIA)以熒光物質(zhì)作為標(biāo)記物,熒光信號賦予該分析方法更高的特異性和更高的光量子效率,使檢測準(zhǔn)確性和靈敏度獲得進(jìn)一步提高。Zhang等建立了基于多克隆抗體的DBP間接競爭FIA,方法檢測限為0.02 ng/mL,IC50為10.53 ng/mL,檢測范圍為0.1~300 ng/mL,與其他PAEs塑化劑的交叉率低于9.6%,并對稻田水、河水、自來水、礦泉水進(jìn)行了添加檢測[28]。Zhang等將異硫氰酸熒光素(FITC)和羊抗兔二抗偶聯(lián)制備熒光標(biāo)記二抗,結(jié)合制備的DCHP兔源多克隆抗體建立了FIA,DCHP檢測范圍為0.1~200 ng/mL,檢測限為0.05 ng/mL,特異性較高[交叉反應(yīng)率(CR)<8.7%],在多種水樣檢測中均表現(xiàn)出良好的重現(xiàn)性[22]。Zhang等在用dc-ELISA檢測DMP的研究中,還將DMP多克隆抗體和FITC偶聯(lián)制備熒光標(biāo)記抗體,建立了DMP直接競爭FIA(dc-FIA),線性范圍為0.05~30 ng/mL,檢測限為0.02 ng/mL,在使用同種抗原和抗體的情況下,靈敏度較dc-ELISA提高了4倍以上,并被應(yīng)用于水樣的檢測[23]。Zeng等在制備特異性DBP單克隆抗體的基礎(chǔ)上,建立FIA分析方法對DBP在小鼠體內(nèi)的分布進(jìn)行了檢測,并建立了ic-ELISA檢測小鼠不同臟器內(nèi)DBP的累積情況,將免疫分析技術(shù)很好地應(yīng)用到生物活體檢測方面[37]。Cui等制備獲得DIBP多克隆抗體和羊抗兔-FITC,建立間接競爭FIA方法用于食用油樣品中DIBP的檢測,方法檢測限達(dá)到5.82 ng/mL,IC50為61.2 ng/mL,檢測范圍為10.47~357.06 ng/mL,方法具有很高的特異性(CR<1.5%)[25]。
2.1.3?均相免疫分析檢測?免疫分析檢測從非均相模式轉(zhuǎn)變?yōu)榫嗄J綄⑹狗治鰴z測步驟更加簡便,檢測時(shí)間明顯縮短,偏振檢測技術(shù)、磁分離技術(shù)的應(yīng)用可以實(shí)現(xiàn)均相模式的檢測,進(jìn)而簡化檢測程序和提高檢測效率。Tian等用FITC標(biāo)記DEP抗體,開發(fā)了DEP的熒光偏振免疫分析方法(FPIA),檢測限為6.0 ng/mL,IC50為40.4 ng/mL,線性范圍為10~200 ng/mL,瓶裝水樣品的檢測限為1.46 ng/mL,果汁樣品的檢測限為340 ng/mL,藥物膠囊樣品的檢測限為50 000 ng/g,3種樣品的回收率為85.9%~114.9%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.3%~17.0%[38]。筆者所在研究室的Zhu等將DEP多克隆抗體通過羊抗兔二抗定向負(fù)載在磁珠表面,包被抗原與銪離子螯合劑偶聯(lián)作為標(biāo)記物,建立了1種磁珠均相直接競爭時(shí)間分辨熒光免疫分析方法(TRFIA),方法的檢測限達(dá)到5.92 pg/mL,并且被應(yīng)用于鎮(zhèn)江市水環(huán)境中的DEP分布檢測,實(shí)際檢測到的DEP濃度為2.98~306.19 ng/mL[39]。這2種PAEs免疫分析技術(shù)將均相模式、磁分離的高效性和熒光信號的高靈敏度結(jié)合,使檢測能力顯著提升,可為其他物質(zhì)高靈敏、均相、高效痕量檢測提供參考。
2.2?超靈敏PCR免疫分析檢測
隨著人類對環(huán)境和食品安全意識的提高,對有毒有害物質(zhì)的檢測也提出了更高要求。在此情形下,能夠準(zhǔn)確靈敏地檢測樣品中超低含量有毒有害物質(zhì)的檢測技術(shù)被極大地需求和歡迎。Sun等報(bào)道了基于金納米顆粒的實(shí)時(shí)定量-免疫PCR分析技術(shù)用于DEP的超高靈敏度檢測,檢測范圍為4 fg/mL~40 pg/mL,檢測限為1.06 fg/mL,特異性很高(CR<5%),進(jìn)而被用于食品中DEP的痕量檢測[27]。該報(bào)道將免疫分析和超靈敏PCR技術(shù)結(jié)合,使得DEP的檢測靈敏度得到極大提高(理論提高3個(gè)數(shù)量級以上),是當(dāng)前靈敏度最高的標(biāo)記檢測策略,對于其他有毒有害物質(zhì)的超痕量檢測發(fā)展具有重要指導(dǎo)價(jià)值。
2.3?多組分免疫分析檢測
隨著PAEs塑化劑在環(huán)境中長期暴露,環(huán)境樣品中同時(shí)存在多種PAEs的可能性大大增強(qiáng),當(dāng)前主要是針對單一組分的檢測方法難以滿足多組分同時(shí)檢測的需求。為了擴(kuò)大免疫分析的檢測范圍,研究人員將研究目標(biāo)投向多種分析物分析,也叫作寬譜特異性分析、多組分分析或?qū)掃x擇性分析[40]。區(qū)別于單組分分析的是,多組分分析可以對多種分析物進(jìn)行總量的檢測或分別進(jìn)行定量檢測,在初篩或初檢中是一種很好的方法[41]。Ius等將多克隆抗體生物素化,將鏈霉親和素與鑭系絡(luò)合物的雙向螯合劑(BCPDA)偶聯(lián)作為標(biāo)記物,建立了廣譜PAEs的TRFIA,與DMP、DEP、DBP、BBP、DNOP的交叉率分別為100%、110%、106%、104%、97%,與其他類似物的交叉率低于3.5%,可用于這5種PAEs塑化劑的同時(shí)分析檢測,且交叉率相近,檢測范圍為0.5 pmol/mL~2 nmol/mL[19]。Tang等通過合成PAEs通用半抗原,免疫制備獲得多克隆抗體,能夠識別多種PAEs(包括DMP、DEP、DBP、DNOP、BBP、DEHP、DCHP),交叉反應(yīng)率在63.9%~103.6%之間,IC50在17.12~102.57 ng/mL之間,最低檢測限在0.012~0.042 ng/mL之間,檢測到溫室土壤樣品中的PAEs濃度為1 260~3 580 ng/g,且使用10年的溫室土壤比使用5年的能夠檢測出更高PAEs濃度[21]。PAEs多組分免疫分析檢測技術(shù)的開發(fā),為樣品中多種PAEs同時(shí)存在提供了便捷的篩選手段,對于簡化初篩程序、提高檢測效率具有重要價(jià)值。
2.4?免疫親和層析分析檢測
免疫親和層析分析技術(shù)是通過層析技術(shù)將免疫分析技術(shù)展示出來,便于更直觀、更便捷地分析待測物質(zhì),可以實(shí)現(xiàn)定性和半定量檢測。關(guān)于PAEs免疫分析主要是前文提到的方法,沒有采用免疫親和層析技術(shù)對其進(jìn)行研究的報(bào)道,但在實(shí)際應(yīng)用中,研究人員采用免疫親和層析技術(shù)開發(fā)PAEs檢測卡,也有多家生化試劑公司生產(chǎn)和銷售PAEs類塑化劑檢測卡。
3?PAEs免疫檢測裝置及應(yīng)用
PAEs免疫檢測裝置主要是免疫檢測試劑盒和檢測卡,這2種裝置分別以ELISA、膠體金免疫親和層析為核心技術(shù),在此基礎(chǔ)上進(jìn)行產(chǎn)品化,形成可用于生產(chǎn)實(shí)際中PAEs污染檢測的產(chǎn)品。當(dāng)前,國內(nèi)外已有多個(gè)生化試劑公司生產(chǎn)和銷售PAEs類試劑盒和檢測卡。如國內(nèi)的北京勤邦生物技術(shù)有限公司可以提供用于白酒樣本中DBP、DIBP檢測的ELISA試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒和檢測卡,其中ELISA試劑盒的靈敏度為10 ng/mL,樣品檢測限為100 ng/mL,檢測回收率穩(wěn)定,變異系數(shù)小于10%。北京普贊生物技術(shù)有限公司的DBP檢測試劑盒的靈敏度達(dá)30 ng/mL,樣品回收率為(95±20)%,變異系數(shù)、交叉率均低于10%,可用于定性、定量檢測飲用水、飲料、酒等樣品中的DBP。美國REAGEN公司的DBP試劑盒檢測靈敏度為50 ng/mL,回收率為70%~130%。美國GTX公司的DEHP試劑盒檢測限達(dá)100 ng/mL,適用于肌肉和肝臟組織、尿樣、血清、飼料中DEHP的檢測。在檢測裝置的應(yīng)用方面,也有相關(guān)報(bào)道,曹必溥等將北京普贊生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的塑化劑ELISA檢測試劑盒應(yīng)用于紅酒中DBP的快速檢測,并用GC-MS法對檢測結(jié)果進(jìn)行比較研究,結(jié)果表明,試劑盒能夠滿足對DBP的初篩要求,且樣品前處理簡單、檢測快速、特異性高[42]。PAEs檢測試劑盒和檢測卡的生產(chǎn)和供應(yīng),可為環(huán)境和食品安全檢測提供便捷快速的保障。
4?PAEs免疫快速檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢
PAEs免疫快速檢測技術(shù)作為一種簡便快速的技術(shù)手段,在前期抗原抗體制備和免疫分析方法開發(fā)的基礎(chǔ)上形成常見PAEs塑化劑檢測的技術(shù)儲備,并且重點(diǎn)部分種類已經(jīng)有檢測試劑盒和檢測卡產(chǎn)品儲備和商品化。這一系列PAEs免疫分析技術(shù)的開發(fā)可以為儀器分析檢測提供替代和補(bǔ)充方法。由于這些免疫分析技術(shù)本身性能的差異和獨(dú)特優(yōu)勢能夠滿足不同檢測場所和檢測需求,消費(fèi)者在實(shí)際應(yīng)用時(shí)可以靈活選擇。然而,目前尚未有關(guān)于多種PAEs免疫快速分析方面的研究報(bào)道,有必要將此不足補(bǔ)充完善作為重要技術(shù)儲備。此外,鑒于環(huán)境和食品中PAEs廣泛存在、暴露風(fēng)險(xiǎn)大、超痕量水平樣品難以準(zhǔn)確檢測,對免疫分析檢測的質(zhì)量要求也更加嚴(yán)格。免疫分析檢測能否獲得更高的靈敏度和特異性,以及更加簡便快捷的操作,作為核心試劑的抗體起著關(guān)鍵作用。然而,用傳統(tǒng)經(jīng)典方法從動(dòng)物體內(nèi)獲得的抗體,其質(zhì)量和性狀難以改變和提高。因此,加強(qiáng)PAEs抗體和免疫分析方法的研究,特別是應(yīng)用新技術(shù)新方法制備高靈敏度、高特異性、多功能的抗體,對于推動(dòng)免疫快速分析技術(shù)更多更廣地應(yīng)用于PAEs分析檢測中具有重要意義。當(dāng)前的免疫快速檢測裝置主要是試劑盒和檢測卡,前期研究中靈敏度更為顯著的熒光免疫分析和PCR免疫分析技術(shù),以及更加便捷高效的均相免疫分析技術(shù)應(yīng)該更好地將其產(chǎn)品化并加以推廣應(yīng)用,以便進(jìn)一步完善免疫快速檢測體系,更好地保護(hù)環(huán)境和食品安全,保障消費(fèi)者健康。
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