杜丹超 蒲占湑 胡秀榮 呂 佳 劉順民 張利平 黃振東

（浙江省柑橘研究所 臺州 318026）

柑橘栽種過程中，樹體及柑橘果實(shí)在生長發(fā)育和采后貯存期易遭受多種病害的侵染，其中真菌性病害最為嚴(yán)重。主要的真菌性病害有生產(chǎn)期的柑橘黑點(diǎn)病、柑橘褐斑病、柑橘炭疽病等，儲藏期真菌性病害有柑橘蒂腐病、柑橘青綠霉病、柑橘黑斑病等。真菌性病害不僅影響樹勢生長，對柑橘品質(zhì)、外觀也有較大影響，對柑橘產(chǎn)業(yè)造成巨大的損害。

目前，化學(xué)防治仍是柑橘真菌性病害最經(jīng)濟(jì)、有效的防治手段。代森錳鋅、咪鮮胺等常規(guī)化學(xué)藥劑的大量使用，在多個柑橘種植區(qū)已出現(xiàn)防效降低的現(xiàn)象，這可能與病原真菌抗藥性增強(qiáng)有關(guān)[1，2]。因此篩選無交互抗性的新型高效藥劑勢在必行。氟啶胺是較為安全的保護(hù)型殺菌劑，屬2，6-二硝基苯胺類化合物，是一種氧化磷酸化作用的解偶聯(lián)劑，殺菌機(jī)制獨(dú)特、殺菌譜廣[3]，對草莓灰霉病、梨輪紋病、小麥赤霉病等真菌病害防治效果顯著[4～6]。目前國內(nèi)還未有氟啶胺防治柑橘真菌性病害的報道，本研究測定氟啶胺、咪鮮胺對柑橘炭疽病菌、柑橘黑點(diǎn)病菌、柑橘黑腐病菌等多種病原真菌的毒力作用，以期為柑橘真菌性病害低毒高效無抗性防治藥劑的選擇提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試藥劑和菌株

500g/L氟啶胺懸浮劑（先正達(dá)集團(tuán)提供）；450g/L咪鮮胺（安道麥馬克西姆有限公司提供）；柑橘炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、柑橘褐斑病菌（Alternaria alternate）、柑橘綠霉病菌（Penicillium digitatum）、柑橘褐色蒂腐病菌（phomopsis cytosporella）等 7種病原真菌，為2015～2019年分離并保存于浙江省柑橘研究所。

1.2 培養(yǎng)基

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，無菌水1000ml。

1.3 帶藥培養(yǎng)基制備

將氟啶胺和咪鮮胺溶于無菌水，配成母液。采用倍半稀釋法制備含藥培養(yǎng)基平板，氟啶胺含藥培養(yǎng)基平板中的最終質(zhì)量濃度為0.0031， 0.0062， 0.0125， 0.025， 0.05mg/L。咪鮮胺的最終質(zhì)量濃度為 0.0125， 0.025，0.05， 0.1， 0.2mg/L。以加無菌水制成的PDA平板作空白對照。

1.4 殺菌劑對柑橘病原真菌抑制率測定

采用菌絲生長速率法，將柑橘蒂腐病菌、柑橘青霉病菌等 7株病原真菌接種于PDA培養(yǎng)基上，培養(yǎng) 5 d后，于菌落邊緣打取 5mm直徑的菌餅，分別接種于帶藥PDA培養(yǎng)基平板上，以不含殺菌劑處理為對照，每個處理重復(fù)三次。

將接菌后的平板于28℃培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng)，當(dāng)對照菌落直徑長至培養(yǎng)皿 2/ 3時，采用十字交叉法測量菌落直徑，根據(jù)公式計算殺菌劑對柑橘病原真菌的菌絲生長抑制率[7]。菌絲生長抑制率=[1-（處理菌落直徑-菌餅直徑）/（對照菌落直徑-菌餅直徑）]×100%。以抑制率概率值為縱坐標(biāo)繪制毒力回歸曲線，根據(jù)毒力回歸方程求出殺菌劑的有效抑制中濃度EC50。

2 結(jié)果與分析

由表 1、表 2可知，在測試范圍濃度內(nèi)，氟啶胺、咪鮮胺對 7種柑橘病原真菌的菌絲生長均有較好的抑制作用。氟啶胺對柑橘黑腐病原菌、柑橘褐斑病原菌、柑橘蒂腐病原菌和柑橘黑點(diǎn)病原菌的抑制效果要高于咪鮮胺，其中對柑橘黑點(diǎn)病原菌、柑橘蒂腐病原菌的抑制效果最好，EC50分別為 0.004mg/L和 0.008mg/L，其次為柑橘黑腐病原菌和柑橘褐斑病菌。而咪鮮胺對柑橘黑斑病原菌和柑橘綠霉病原菌的菌絲生長抑制效果要高于氟啶胺。

表1 氟啶胺對多種柑橘病原真菌菌絲生長的毒力作用

表2 咪鮮胺對多種柑橘病真原菌菌絲生長的毒力作用

3 討論

抑制植物組織內(nèi)的菌絲生長是病害防治的一種重要方法，本文測定的 2種殺菌劑氟啶胺和咪鮮胺對 7種柑橘病原真菌菌絲生長抑制效果明顯。從毒力數(shù)據(jù)來看，相較于咪鮮胺，氟啶胺對柑橘黑點(diǎn)病菌(Diaporthe citri)（采后柑橘褐色蒂腐病菌)室內(nèi)毒力效果最為顯著，對柑橘褐斑病菌(Alternaria alternate)(采后柑橘黑腐病菌)抑制效果較好。多年研究數(shù)據(jù)表明二硫代氨基甲酸鹽酯類和銅制劑類保護(hù)性殺菌劑對柑橘黑點(diǎn)病菌室內(nèi)菌絲生長抑制效果低于咪鮮胺、嘧菌酯等內(nèi)吸性殺菌劑，但田間防效確卻高于咪鮮胺等內(nèi)吸性殺菌劑[8～-10]。氟啶胺是一種吡啶胺類保護(hù)性殺菌劑，作為線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，通過作用于ATP合成酶，在呼吸鏈的尾端解除氧化與磷酸化的關(guān)聯(lián)，能最大程度消耗電子傳遞積累的電化學(xué)勢能，較低濃度就能達(dá)到理想見效[11]，已有研究表明其具有持效期長、耐雨水沖刷、低抗藥性風(fēng)險、低環(huán)境風(fēng)險且與多類殺菌劑無交互抗性等特性[12～14]?；蚩煽紤]將氟啶胺作為柑橘真菌性病害防治殺菌劑的候選藥劑，特別是用于柑橘黑點(diǎn)病和柑橘褐斑病的防治，因此下一步可有選擇的開展田間實(shí)際防效實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行防治效果、藥劑使用劑量、間隔期、農(nóng)藥殘留等研究。