文/范忠厚 李 輝 馮顯鈐 王英群 李芳芳 洪紹鋒 李 銘＊

（1 廣西灌陽縣畜牧技術(shù)推廣站；2 中國農(nóng)業(yè)科學院廣西水牛研究所；3 廣西來賓市畜牧站；4 廣西畜禽品種改良站）

廣西于2014年從國外引進地中海水牛，隨著近幾年的發(fā)展，其存欄量和飼養(yǎng)規(guī)模在不斷增加。采用同期發(fā)情定時輸精的方法，可以讓母牛同期發(fā)情、同時配種、同時受胎及產(chǎn)犢，進而在生產(chǎn)上實現(xiàn)集中飼養(yǎng)、集中配種、集中接產(chǎn)、集中護理和喂養(yǎng)牛犢、集中擠奶，避開濕熱季節(jié)，降低生產(chǎn)成本，提高奶業(yè)經(jīng)濟效益的目的。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗?zāi)概?/p>

在廣西某地區(qū)地中海水牛養(yǎng)殖基地選擇42 頭地中海母水牛，其中經(jīng)產(chǎn)牛22 頭，青年牛20 頭。經(jīng)產(chǎn)牛約5 歲，產(chǎn)后60 天以上，空懷；青年牛26 月齡以上，有正常的發(fā)情。試驗時間為2019年7—10月。

1.1.2 凍精

試驗凍精均為廣西畜禽品種改良站種公牛站生產(chǎn)的地中海種公牛凍精。1號凍精活力約0.32，2號凍精活力約為0.40。

1.1.3 藥品

孕酮栓（CIDR），由美國進口；孕馬血清（PMSG），由軍需醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，規(guī)格1 000 IU/支；前列腺素（PG），由寧波市第二激素廠生產(chǎn)，規(guī)格0.3 mg/支；促黃體素釋放激素A3（LHRH-A3），規(guī)格25 μg/支；促性腺激素釋放激素（GnRH），規(guī)格100 μg/支。

1.1.4 器械

輸精槍及輸精槍硬外套由廣西蔣氏動物用品公司生產(chǎn)。

表1 不同同期發(fā)情方法及定時輸精試驗效果表

1.2 試驗方法

1.2.1 同期發(fā)情方法

方法A：采用孕酮栓（C I D R）+孕馬血清（PMSG）+前列腺素（PG）+促黃體素釋放激素A3（LHRH-A3）方法的程序：選擇母牛生理周期的任意一天，把它定義為第0天，在母牛生殖道內(nèi)放入CIDR；在第9天上午于試驗?zāi)概５耐尾恳粋?cè)行深部肌內(nèi)注射PMSG，注射量視試驗牛的體重而定，為1 300～1 500 IU/頭；在第10天上午給試驗?zāi)概Ｍ尾苛硪粋?cè)行深部肌內(nèi)注射PG，2 支/頭，在第12天上午從其生殖道內(nèi)撤出CIDR。母牛發(fā)情配種后1 h內(nèi)，在其臀部任意一側(cè)行深部肌內(nèi)注射LHRH-A3，50～75 μg/頭。

方法B：采用CIDR+ PG+促性腺激素釋放激素（GnRH）+ LHRH-A3方法的程序：生殖道內(nèi)放入CIDR與方法及時間與方法A相同，在第10天上午于試驗?zāi)概Ｓ谕尾績蓚?cè)各深部肌內(nèi)注射GnRH，100 μg /頭和PG，2 支/頭，在第12天上午從生殖道內(nèi)撤出CIDR。注射LHRH-A3的方法及時間與方法A相同。

1.2.2 同期發(fā)情判定方法

在第12天上午從母牛生殖道內(nèi)撤出CIDR后，密切觀察母牛發(fā)情情況。如果母牛爬跨或接受爬跨、陰部流出黏液、尾根及臀部有黏液附著、尾椎有脫毛脫皮的新鮮痕跡中的任意一項，即可判定母牛發(fā)情，并做好發(fā)情記錄。所有母牛在48 h之內(nèi)出現(xiàn)發(fā)情判定為同期發(fā)情。

1.2.3 定時輸精方法

觀察到母牛發(fā)情后，于發(fā)情第1天上午9時前，即在第一次輸精前對發(fā)情母牛做直腸檢查，檢查卵泡發(fā)育情況，并做好記錄。于10～12時直接給發(fā)情母牛進行人工輸精，每頭牛使用1 劑凍精，輸精1 h內(nèi)注射LHRH-A3。在第2天上午9點前，對前1 天所有進行輸精的母牛做直腸檢查，檢查卵泡發(fā)育及排卵情況，并做好記錄。對未排卵的母牛進行第2次輸精，每頭牛使用1 劑凍精，輸精1 h內(nèi)再次注射LHRH-A3。同樣操作至第3天，對在第4天檢查到的不排卵母牛，不再進行輸精。

2 效果與分析

從不同同期發(fā)情方法及定時輸精試驗效果（表1）可以看出，使用2 種同期方法后42 頭試驗?zāi)概＞霈F(xiàn)發(fā)情現(xiàn)象，同期發(fā)情率達100.00%，說明2 種發(fā)情方法均具有很好地促進母牛發(fā)情的效果。采用方法B的母牛發(fā)情排卵率66.67%～70.00%，高于方法A的50.00%。同時，在受胎率的效果上，方法A的最高受胎率30.00%，而方法B最低受胎率為33.33%，方法B比方法A的效果好。此外，在2 種同期發(fā)情方法中，青年牛的受胎率均高于經(jīng)產(chǎn)牛；2號凍精總受胎率高于1號凍精總受胎率。在方法B中，均使用2號凍精，青年牛的受胎率比經(jīng)產(chǎn)牛要高，說明使用人工授精，青年牛的效果好于經(jīng)產(chǎn)牛。雖然2號凍精總受胎率高于1號凍精總受胎率，但在方法A中使用2號凍精輸精經(jīng)產(chǎn)牛的受胎率比用1號凍精輸精的青年牛要低10 個百分點，說明使用人工輸精效果還取決于牛本身的因素，并且影響因素較大。

3 討論

3.1 本次試驗選取的青年牛與經(jīng)產(chǎn)牛數(shù)量相當，結(jié)果為青年牛比經(jīng)產(chǎn)牛試驗效果好。分析原因，青年母牛沒有生產(chǎn)過，其生殖系統(tǒng)內(nèi)沒有受到來自外界的接觸及污染，生殖系統(tǒng)健康，而經(jīng)產(chǎn)母牛生產(chǎn)過，其子宮內(nèi)污穢物質(zhì)的凈化及吸收對子宮有一定地影響，導致受胎率有差異。

3.2 CIDR具有抑制發(fā)情和反饋抑制下丘腦和垂體前葉卵泡刺激素（FSH）分泌的作用，能顯著提高受體母牛的同期發(fā)情率和濾泡排卵同期化，試驗中2 種同期方法均使用了CIDR，并且均得到了100.00%的同期發(fā)情率，為定時輸精起到良好的促進作用。

3.3 方法B中，GnRH是來源于下丘腦的神經(jīng)內(nèi)分泌細胞，其主要生理作用是可促進促黃體生成素（LH）和FSH的合成和釋放。LH在FSH的協(xié)同作用之下，可以使卵泡充分發(fā)育成熟并及時排卵，所以方法B獲得較好的受胎率。

3.4 地中海水牛2號凍精質(zhì)檢活力約為0.40，1號凍精活力約為0.32，所以凍精活力越好，受胎率越高。

3.5 試驗?zāi)概H有42 頭，分組后每組僅有10 頭左右，真實的試驗效果未充分表現(xiàn)出來，有待進一步試驗研究。C