徐 放 鐘乃盛 廖煥琴 劉信凱 楊會(huì)肖 楊曉慧 潘 文 朱報(bào)著

（1.廣東省森林培育與保護(hù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省林業(yè)科學(xué)研究院，廣東 廣州 510520；2.棕櫚生態(tài)城鎮(zhèn)發(fā)展股份有限公司， 廣東 廣州510627）

嫁接繁殖是植物無(wú)性繁殖的重要方法之一，是木本植物育種資源收集保存、鑒評(píng)、以無(wú)性系種子園營(yíng)建的主要手段，通過(guò)嫁接繁殖培育植株，既能保持植株優(yōu)良遺傳特性，又能使植株擴(kuò)大栽培區(qū)域，矮化或喬化樹體，實(shí)現(xiàn)提早開花和結(jié)果，達(dá)到提高植株產(chǎn)量和品質(zhì)，縮短培育周期的目的[1-10]。杜鵑紅山茶（Camellia azalea）又名四季茶花、張氏紅山茶，是茶科(Theaceae)山茶屬（Camellia）常綠灌木，廣東省重點(diǎn)保護(hù)野生植物[11]，極小種群植物[12]，珍稀瀕危植物[13]，一年有二次盛花期，南方地區(qū)優(yōu)良的觀賞花卉[14-15]；因其自然結(jié)實(shí)率低，種子少，發(fā)芽率低，實(shí)生苗年生長(zhǎng)量小，樹冠成型緩慢，供觀賞或雜交制種的培育周期長(zhǎng)，制約了實(shí)生苗推廣應(yīng)用；當(dāng)前，杜鵑紅山茶成型且進(jìn)入盛花期苗木相對(duì)緊缺，供不應(yīng)求，通過(guò)嫁接可較大程度提高苗木產(chǎn)量，滿足市場(chǎng)所需。在杜鵑紅山茶小規(guī)格嫁接苗木培育方面，倪穗等[6]用油茶(C. oleifera)幼嫩芽苗和2～3 a 生木質(zhì)化常規(guī)苗，幼嫩芽苗砧和芽苗根砧進(jìn)行嫁接試驗(yàn)，結(jié)果為油茶幼嫩芽苗砧木比常規(guī)苗砧木嫁接成活率提高32.41%，而芽苗砧和芽苗根砧嫁接成活率差異很小。盧國(guó)志等[7]用茶樹（C. sinensis）、油茶、茶梅（C. sasanqua）的2 a 生或多年生實(shí)生苗做砧木，腹接方法嫁接，研究結(jié)果為嫁接成活率和嫁接愈合率2a 生砧木優(yōu)于多年生砧木，茶樹和油茶砧木優(yōu)于茶梅砧木。吳曉靜等[8]用大頭茶（Gordonia axillaries）、浙江紅山茶（C. chekiangoleosa）和油茶，黎運(yùn)樞等[9]用油茶、茶樹、木荷(Schima superba)，均選擇1～2 a 生實(shí)生苗作砧木，切接方法嫁接，研究認(rèn)為油茶砧木成活率最高，生長(zhǎng)最好。但上述研究主要集中在一株苗木嫁接一根接穗，且試驗(yàn)環(huán)境較為單一的基礎(chǔ)上進(jìn)行，種質(zhì)資源消耗較大。本研究以山茶屬樹種幼嫩芽苗砧、半木質(zhì)化芽苗砧和2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗為砧木，進(jìn)行砧木種類、存儲(chǔ)時(shí)間、嫁接時(shí)間、種植環(huán)境（溫室大棚和大田陰棚，單一基質(zhì)和混合基質(zhì)）的嫁接擴(kuò)繁試驗(yàn)，運(yùn)用多重比較研究嫁接成活率，篩選出優(yōu)良的砧木和嫁接繁育技術(shù)，以期解決砧木培育周期長(zhǎng)、種質(zhì)消耗量大、繁殖系數(shù)較小、嫁接成活率低，從而提高苗木產(chǎn)量，降低培育成本，為實(shí)現(xiàn)苗木培育批量化提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在廣東省林業(yè)科學(xué)研究院苗圃，位居113°22′E，23°11′N，海拔33 m，年平均溫度23℃，1月氣溫最低，平均溫度13℃，8 月氣溫最高，平均溫度28.7℃；年平均降雨量1 638 mm，4-9 月的降雨量占全年的80%，年平均濕度79%。試驗(yàn)分別在溫室大棚（透光度50%）、大田陰棚（透光度50%）和大田苗床進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)材料

供試砧木為高州油茶（C. gauchowensis），根徑約7 mm 的半木質(zhì)化芽苗，油茶和攸縣油茶（C. yuhsienensis）根徑約5 mm 的幼嫩芽苗；高州油茶和廣寧紅山茶（C. semiserrata ）2 a 生，根徑約10 mm的營(yíng)養(yǎng)袋苗；高州油茶半木質(zhì)化芽苗，采用嫁接前2 a 冬季收集種子，在苗床培育1.5～2 a，保持半木質(zhì)化程度；油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗，采用嫁接前1 a 冬季收集種子，在苗床培育；高州油茶和廣寧紅山茶營(yíng)養(yǎng)袋苗，采用幼嫩芽苗種植在高14 cm，直徑8 cm 的營(yíng)養(yǎng)袋，露天培育2 年。杜鵑紅山茶接穗采自廣東省林業(yè)科學(xué)研究院種質(zhì)資源圃同一無(wú)性系植株。種植基質(zhì)為砂壤土或混合基質(zhì)（體積比為50%砂壤土+50%泥炭土）。所有嫁接試驗(yàn)除特殊說(shuō)明外，均于2019 年5 月進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 不同樹種砧木試驗(yàn) 不同樹種芽苗砧木試驗(yàn)：用高州油茶半木質(zhì)化芽苗、油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗砧木嫁接，嫁接當(dāng)天選取砧木，每株芽苗只取1 段嫁接，種植在溫室大棚砂壤土中。

不同樹種砧木年齡試驗(yàn)：9 月，用高州油茶半木質(zhì)化芽苗（分為芽苗砧和芽苗根砧），高州油茶和廣寧紅山茶2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗嫁接，高州油茶半木質(zhì)化芽苗嫁接，種植在溫室大棚砂壤土中，2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗嫁接后在原露天苗床培育。

不同樹種芽苗砧木嫁接位置試驗(yàn)：用高州油茶半木質(zhì)化芽苗、油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗，每株芽苗分成兩段，即芽苗砧和芽苗根砧，嫁接后種植在溫室大棚砂壤土中。

1.3.2 砧木存儲(chǔ)時(shí)間試驗(yàn) 以油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗，相隔6 d 進(jìn)行嫁接，種植在溫室大棚砂壤土中。第一批砧木隨采隨用，第二批砧木存儲(chǔ)在廣東省林業(yè)科學(xué)研究院苗圃黃心土的新苗床中。

1.3.3 種植環(huán)境試驗(yàn) 栽培設(shè)施試驗(yàn)：5 月和9 月，用高州油茶半木質(zhì)化芽苗，分為芽苗砧和芽苗根砧，分別種植于溫室大棚和田間陰棚中，栽培基質(zhì)均為砂壤土。

種植基質(zhì)試驗(yàn)：以高州油茶半木質(zhì)化芽苗、油茶幼嫩芽苗作砧木嫁接，種植在溫室大棚的砂壤土和混合基質(zhì)。

1.3.4 不同嫁接時(shí)間試驗(yàn) 5 月和9 月，分別用高州油茶半木質(zhì)化芽苗作砧木嫁接，種植在溫室大棚砂壤土基質(zhì)中。以上試驗(yàn)除2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗嫁接后在原露天苗床培育，其它均采用36 株小區(qū)3 次重復(fù)，完全隨機(jī)設(shè)計(jì)。

1.4 嫁接和管理方法

1.4.1 嫁接方法 采用切接方法進(jìn)行嫁接。芽苗作砧木嫁接時(shí)，在芽苗砧或芽苗根砧上部縱切一刀，深度約為1～1.2 cm，將削好的接穗插入到砧木中，用電工膠或薄鋁片將接穗和砧木捆綁。嫁接高州油茶和廣寧紅花油茶2 a 生的營(yíng)養(yǎng)袋苗作砧木嫁接時(shí)，保留砧木高度約7 cm，在芽苗砧或芽苗根砧上部縱切一刀，深度約為1～1.2 cm，將削好的接穗插入砧木中，用薄膜進(jìn)行捆綁。

1.4.2 種植 種植苗床高20～25 cm，底部墊2～4 cm 的陶?；蚝由?，種植前7 d，用約1‰的高錳酸鉀進(jìn)行消毒，蓋上薄膜待用。種植時(shí)先用小木棍插一個(gè)孔，插入嫁接苗后壓實(shí)四周土壤，株距7～10 cm，行距8～12 cm，種植后用3‰多菌靈溶液淋透基質(zhì)。

1.4.3 種植后管理 種植后苗床上蓋高約0.5 m 拱棚，用薄膜和遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋，薄膜四周用泥土壓緊，保持拱棚內(nèi)濕度。種植后保持棚內(nèi)的溫度和濕度，大田陰棚需及時(shí)清溝排水。溫度過(guò)高則將薄膜的兩頭稍微掀起通風(fēng)降溫；及時(shí)除去砧木萌芽和苗床雜草，以促進(jìn)接穗愈合和生長(zhǎng)，并清除霉?fàn)€植株；種植40 d 后可揭開遮陽(yáng)網(wǎng)，適度透光，促進(jìn)苗木生長(zhǎng)。

1.5 調(diào)查和統(tǒng)計(jì)方法

種植約35 d 后接穗開始萌芽，種植120 d 調(diào)查嫁接成活率，并利用R 程序中“agricolae”程序包進(jìn)行嫁接成活率的方差分析和多重比較[16-17]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同樹種砧木對(duì)嫁接成活率的影響

2.1.1 不同樹種芽苗砧木對(duì)嫁接成活率的影響 高州油茶半木質(zhì)化芽苗，油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗砧木嫁接杜鵑紅山茶，其嫁接成活率存在顯著差異（表1）。以油茶幼嫩芽苗砧木嫁接成活率最高，為95%，其次是高州油茶半木質(zhì)化芽苗砧木嫁接成活率80%，與油茶幼嫩芽苗砧木嫁接成活率沒(méi)有顯著差異；而攸縣油茶幼嫩芽苗砧木嫁接成活率65%，顯著低于油茶幼嫩芽苗砧木嫁接成活率（P＜0.05）。

表1 不同芽苗砧木嫁接杜鵑紅山茶成活率 %Table1 Grafting survival rates of different rootstocks

2.1.2 不同樹種砧木年齡對(duì)嫁接成活率的影響 用芽苗和營(yíng)養(yǎng)袋苗砧木嫁接杜鵑紅山茶，高州油茶半木質(zhì)化芽苗砧嫁接成活率最高（89.1%，表2），其次為半木質(zhì)化芽苗根砧嫁接成活率（82.3%），高州油茶2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗嫁接成活率為80.8%，廣寧紅山茶2 a 生營(yíng)養(yǎng)袋苗嫁接成活率最低，為35.8%；廣寧紅山茶嫁接成活率顯著低于前三種砧木（P＜0.05）。如果以樹種統(tǒng)計(jì)，高州油茶平均嫁接成活率為83.9%，嫁接成活率比廣寧紅山茶提高48.1 個(gè)百分點(diǎn)。

表2 不同樹種砧木年齡嫁接成活率 %Table 2 Grafting survival rates of different maturity rootstocks

2.1.3 砧木嫁接位置對(duì)嫁接成活率的影響 高州油茶半木質(zhì)化、油茶和攸縣油茶幼嫩芽苗砧木，不同處理間嫁接成活率存在顯著差異（P＜0.05）見表3，以高州油茶半木質(zhì)化芽苗根砧嫁接成活率最高，達(dá)89.83%，其次是高州油茶半木質(zhì)化芽苗砧嫁接成活率為77.5%，攸縣油茶幼嫩芽苗砧嫁接成活率最低，只有18.75%。3 個(gè)樹種芽苗砧平均嫁接成活率為52.88%；芽苗根砧為56.71%，差異很小。以樹種統(tǒng)計(jì)，高州油茶半木質(zhì)化芽苗嫁接成活率84.85%，油茶幼嫩芽苗為53.15%，攸縣油茶為20%，樹種間存在顯著差異（P＜0.05）。3個(gè)樹種芽苗砧嫁接平均成活率為50.8%，與芽苗根砧平均嫁接成活率（53.6%）無(wú)顯著差異。

表3 不同類型芽苗砧木嫁接成活率 %Table 3 Grafting survival rates of different types of rootstock

2.2 砧木存儲(chǔ)時(shí)間對(duì)嫁接成活率的影響

隨取隨用的油茶幼嫩芽苗砧木的嫁接成活率最高，達(dá)到95.0%，在新苗床存儲(chǔ)6 d，嫁接成活率下降到50.0%；攸縣油茶幼嫩芽苗砧木未經(jīng)存儲(chǔ)嫁接成活率為65.0%，存儲(chǔ)6 d 后，嫁接成活率下降到20.9%（表4），同種砧木儲(chǔ)存6 d，嫁接成活率均與未存儲(chǔ)砧木出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05）。

表4 不同砧木存儲(chǔ)時(shí)間對(duì)杜鵑紅山茶嫁接成活率 Table 4 Survival rates of rootstock by different storage time

2.3 種植環(huán)境對(duì)嫁接成活率的影響

2.3.1 栽培設(shè)施對(duì)嫁接成活率的影響 經(jīng)方差分析和多重比較發(fā)現(xiàn)，大田陰棚和溫室大棚嫁接成活率存在顯著差異（P＜0.05），5 月嫁接成活率室外大田陰棚為47.7%，室內(nèi)溫室大棚為85.9%；9 月嫁接成活率室外大田陰棚為31.5%，室內(nèi)溫室大棚為78.5%。室內(nèi)溫室大棚可以顯著提高杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接成活率，減少外界環(huán)境對(duì)嫁接植株的影響。

2.3.2 種植基質(zhì)對(duì)嫁接成活率的影響 4 種類型砧木在不同基質(zhì)中嫁接成活率存在顯著差異（表5），通過(guò)基質(zhì)類型和砧木類雙因素方差分析（表5）可知，不同種植基質(zhì)和不同類型砧木間均存在顯著差異（P＜0.05），其中砂壤土基質(zhì)中平均成活率（78.4%）較混合基質(zhì)中成活率（66.6%）提高了11.8 個(gè)百分點(diǎn)，混合基質(zhì)中除了油茶幼嫩芽苗根砧嫁接成活率（81.8%）高于砂壤土外，其余各砧木類型的嫁接苗在砂壤土中成活率均高于混合基質(zhì)。另外，雙因素方差分析結(jié)果顯示（表6），基質(zhì)和砧木類型存在顯著的互作關(guān)系（P=0.021），選擇高州油茶半木質(zhì)化芽苗作為砧木，在砂壤土中培育，可獲得較好的效果，成活率可達(dá)90.1%以上。

表5 不同種植基質(zhì)杜鵑紅山茶嫁接成活率 %Table5 Survival rates in different substrate types

表6 不同種植基質(zhì)及砧木類型雙因素方差分析Table 6 Two-Way ANOVA of substrate and rootstocks

2.4 不同嫁接時(shí)間對(duì)嫁接成活率的影響

5 月和9 月高州油茶半木質(zhì)化芽苗嫁接后種植在室內(nèi)大棚砂壤土基質(zhì)，平均嫁接成活率分別為89.85%和85.7%，芽苗砧和芽苗根砧的嫁接成活率差異很小（表7）。

表7 不同嫁接時(shí)間對(duì)杜鵑紅山茶嫁接成活率Table 7 Survival rate at different grafting times

3 結(jié)論與討論

嫁接能否成功，主要取決于砧木和接穗之間的親和力、嫁接方法和管理技術(shù)等因素。砧木為嫁接植物體提供水分和養(yǎng)分，合適的砧木可提高嫁接成活率和苗木生長(zhǎng)質(zhì)量，通常選用同屬或同科樹木做砧木，以增強(qiáng)樹種間的親和力，本試驗(yàn)采用的山茶屬油茶和高州油茶比攸縣油茶和廣寧紅山茶的嫁接成活率高，說(shuō)明油茶、高州油茶與杜鵑紅山茶的親和力高，與吳曉靜等[8]、黎運(yùn)樞等[9]的研究結(jié)果相似。

嫁接方法中砧木質(zhì)量也影響嫁接成活率，本研究篩選較優(yōu)的油茶和高州油茶芽苗砧木，分別取一段嫁接時(shí)，嫁接成活率沒(méi)有顯著差異，如果將一根芽苗分為芽苗砧和芽苗根砧兩段砧木，嫁接成活率存在顯著差異；試驗(yàn)中高州油茶芽苗為芽苗砧和芽苗根砧嫁接成活率，與倪穗[6]在浙江省寧波市芽苗砧和芽苗根砧平均嫁接成活率分別為86.41%和81.65%，平均為84.16%相近。高州油茶芽苗為芽苗砧和芽苗根砧嫁接成活率高，與每個(gè)砧木（芽苗砧和芽苗根砧）仍有6 cm 以上長(zhǎng)度，砧木的尖削度小，粗度與杜鵑紅山茶穗條相近，利于砧穗愈合，分段后營(yíng)養(yǎng)充足有關(guān)，種植時(shí)可適度深栽等因素有關(guān)；而油茶芽苗分為芽苗砧和芽苗根砧二段后，砧木長(zhǎng)度短且較細(xì)小，分段后營(yíng)養(yǎng)不足有關(guān)。生產(chǎn)中可充分利用半木質(zhì)化芽苗砧木來(lái)嫁接杜鵑紅山茶，降低砧木成本。

生產(chǎn)中常因砧木生產(chǎn)地與嫁接后種植地相距較遠(yuǎn)，人們喜歡一次性取大量砧木進(jìn)行嫁接，當(dāng)天未用完的砧木用濕毛巾包裹或臨時(shí)儲(chǔ)存在苗床，本試驗(yàn)的結(jié)果證明儲(chǔ)存6 d 后的嫁接成活率明顯降低，可能與砧木儲(chǔ)存期消耗養(yǎng)分較多有關(guān)，建議在生產(chǎn)中盡量少用儲(chǔ)存的芽苗砧木。

在不同的種植環(huán)境試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，溫室大棚嫁接成活率顯著高于簡(jiǎn)易大田陰棚，這與溫室大棚的溫度和苗床地面濕度相對(duì)較為穩(wěn)定有關(guān)，建議生產(chǎn)中盡量在溫室大棚中進(jìn)行。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)砂壤土基質(zhì)中嫁接成活率比混合基質(zhì)提高了11.8 個(gè)百分點(diǎn)，可能與混合基質(zhì)的物理和化學(xué)性狀發(fā)生改變有關(guān)。另外，本試驗(yàn)以嫁接成活率來(lái)評(píng)價(jià)成效，成活后砧穗愈合程度、植株高和冠幅生長(zhǎng)量，植株抗逆性等有關(guān)苗木質(zhì)量指標(biāo)還需進(jìn)一步研究觀察。

不同嫁接處理對(duì)杜鵑紅山茶嫁接成活率試驗(yàn)表明：油茶芽苗和高州油茶嫁接成活率高，是杜鵑紅山茶嫁接繁育的優(yōu)良砧木；高州油茶半木質(zhì)化芽苗分為芽苗砧和芽苗根砧嫁接，種植在室內(nèi)溫室大棚砂壤土基質(zhì)中，嫁接成活率比油茶芽苗高，砧木利用率提高一倍，節(jié)約砧木資源消耗，也節(jié)省了培育營(yíng)養(yǎng)袋苗的時(shí)間，降低生產(chǎn)成本，可在生產(chǎn)中應(yīng)用。