趙紅霞

摘 要：蔬菜農藥殘留快速檢測法因操作簡單、成本較低快速方便等優(yōu)點，被企業(yè)、批發(fā)市場、農產品檢測部門廣泛使用。闡述蔬菜農藥殘留快速檢測的原理、優(yōu)缺點、抑制率異常情況的原因分析和應對辦法，對檢測過程中比較容易出現(xiàn)的各項問題進行分析，針對出現(xiàn)的這些問題找出相應的解決辦法。

關鍵詞：蔬菜農藥殘留；快速檢測技術；問題與對策

農藥的使用可以有效防治害蟲對蔬菜的傷害，從而實現(xiàn)高產量以及機械化生產。由于農藥在蔬菜上的使用具有獨特的性質并且具有一定的時期性，蔬菜表面會殘留一些農藥，殘留量的多少是不能用肉眼觀察到的，因此用需要一定的方法進行檢測，確定是否會對人體造成傷害。假若蔬菜銷售時還在藥性之內，將會給人們的身體健康造成極大的傷害，在這種情況下，藥物還會殘留在蔬菜表面，假若這些農藥殘留超過標準殘留量，就會對人的身體健康造成威脅，長期在人的體內堆積，會造成中毒的現(xiàn)象，甚至會威脅到人們的生命安全。蔬菜表面的農藥殘留問題與人們的日常生活息息相關，解決蔬菜表面的農藥殘留刻不容緩，而蔬菜農藥殘留快速檢測技術是監(jiān)管蔬菜農藥殘留的一個重要手段。蔬菜表面農藥殘留量的快速檢測技術顯得尤為重要，其根據(jù)一些化學反應現(xiàn)象來判斷農藥殘留量是否較高，主要是根據(jù)酶對底物的影響，通過顏色變化來確定實驗結果。這個實驗具有很多的優(yōu)點，如消耗成本低、檢測思路明確等。半定量測定和現(xiàn)場定性都非常適用，如大面積的蔬菜種植基地、蔬菜交易的市場的現(xiàn)場檢測。除此之外，當政府對這些售賣蔬菜的安全問題進行檢測時，也可以使用相同的方法。通過這種方式可以對有機磷和氨基甲酸酯進行科學篩查，有效測出蔬菜表面的農藥殘留量，確保蔬菜的安全，確保進入到百姓飯桌上的蔬菜都是100%的健康蔬菜。

1 蔬菜農藥殘留快速檢測技術所應用的原理

現(xiàn)階段，蔬菜表面主要的農藥殘留有兩種：有機磷和氨基甲酸酯。這兩種農藥會對人的身體健康產生不利的影響，會影響體內酶的分泌過程，眾所周知，酶具有促進化學反應的功能，假若酶的分泌受到限制，那么體內的一些物質就沒有辦法被分解掉，長年累月的在體內堆積，食物中毒事故也會因此而發(fā)生。農藥的快速檢測法也是根據(jù)若蔬菜的提取液中含有農藥就會抑制酶的作用，可根據(jù)化學反應的顏色判斷農藥在蔬菜中的殘留量。具體的操作步驟是在乙酰膽堿酯酶或者乙酰膽堿的共存體系中加入人們所要食用的植物提取液。根據(jù)實驗現(xiàn)象，如果蔬菜表面不含對人身體不利的有毒物質，在檢測過程中酶會與溶劑中的其他物質進行反應，溶劑中的乙酰膽堿將會被分解掉，并且水解后的產物會和加入的顯色試劑發(fā)生顯色變化；假如在食用蔬菜的提取液中中含有有機磷或氨基甲酸酯類等其他一些農藥物質，酶的活性將會受到影響，底物不容易被分解掉，因此也不會有很明顯的實驗效果，顏色變化不會特別明顯，可根據(jù)這種實驗現(xiàn)象判斷蔬菜表面的農藥殘留量。同樣用吸光度值的測定方法也可以測量農藥殘留量是否會影響人們的身心健康，測出吸光度值的抑制率，根據(jù)抑制率的大小做出判斷，所測定的抑制率低于70%的時候這種蔬菜是可供食用的，農藥殘留相對較小，反之，則不能食用。

2 實驗中所遇到的困難與麻煩

2.1 空白值時間控制不準確

在實驗過程中必須保證儀器的穩(wěn)定性，在實驗過程中一定要控制物品取出的時間。底物加入后要即刻進行實驗，避免長時間停留，操作的時間要盡量短，時間過長會空白值將變小。

2.2 所選取的樣品吸光值偏高

即使在酶活性較低的情況下，選取的樣品的顏色較深或者化學或者物理反應的干擾都會造成誤差。在燈光照射反應體系時，會發(fā)生反射和折射等過程，透光率會產生一系列變化，吸光度在數(shù)值上有變化，有增大的表現(xiàn)。

2.3 檢測過程中實驗的實驗結果表現(xiàn)為負值

檢測結果誤差在-10%以下，是符合科學依據(jù)的。這種結果之所以會出現(xiàn)是由于檢測人員在實驗過程中操作不當。在底物分解之后，分解物會很快與顯色試劑結合，發(fā)生顏色變化。因此，在實驗過程中，檢測員稍微的時間偏差或者操作不熟練不熟悉，到會導致這種情況的發(fā)生。

2.4 不規(guī)范的實驗過程，陰陽結果不準確

酶是整個實驗的關鍵因素，酶失活或者活性降低都會就會導致酶不與底物反應，這時候水解現(xiàn)象就不會特別明顯，進而無法與顯色試劑結合發(fā)生顏色變化，呈現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象。另一種情況是，蔬菜試劑中農藥殘留對酶的抑制性較低甚至不會發(fā)生作用，進而呈現(xiàn)出沒有農藥殘留的假象。除此之外，實驗過程中的一些物理反應或者化學反應的出現(xiàn)也會造成假陰性或者假陽性的現(xiàn)象，致使判斷的結果不準確，得到錯誤的結論[1]。

2.5 溫度對于實驗結果的影響

檢測室的溫度需要控制在一個合理的范圍之內，通常狀況下保證在20～30 ℃。根據(jù)實際操作可以發(fā)現(xiàn)，這個時候酶并不需要放在37～38 ℃的地方進行培養(yǎng)，室溫就可以滿足培養(yǎng)的各種條件，20 ℃要培養(yǎng)20 min，25℃以上要培養(yǎng)15 min以上，但是在室溫低于20 ℃時，就需要在37～38 ℃的溫箱中進行培養(yǎng)。

3 操作規(guī)范

3.1 試劑配制

實驗材料主要是蔬菜提取液、酶、底物以及顯色試劑。提取液是其他試劑的稀釋液，提取液是非常關鍵的。磷酸鹽緩沖液為提取液，需要將提取液倒入到試劑瓶中，再加入蒸餾水或者純凈水進行溶解，但是一定要保證使用的水不含有礦物質，否則會影響實驗過程，在這一系列步驟之后，放好備用，在室溫下進行保存，酸堿度控制在0.8，在配置環(huán)節(jié)中需要配置對比酸堿度。酶液主要有兩種，一種是實驗室配置好的，還有一種是一種粉狀酶，假若使用粉劑就需要加入一些提取液，將粉劑融化，在緩慢搖勻后放置好備用；底物要選擇使用一定量的蒸餾水進行配置；顯色劑在使用過程中同樣也需要加入提取液進行配置。試劑的具體用量要根據(jù)實際情況而確定，不同的產品需要不同的試劑量。

3.2 保存條件

在實驗過程中，所使用到的實驗物品容易變質，失去其作用，像酶、底物、顯色試劑這些化學藥品很容易失去原有的活性，特別是在一些極端天氣，如冬天、夏天極冷極熱的天氣。所以，配置溶液時要采用分裝制，用一個打開一個，這樣可以有效避免浪費，減少試驗品變質。酶是整個實驗過程中最關鍵的物質，是整個實驗的核心。因此在實驗過程中，所使用的酶的種類以及酶的活性或者純度，實驗室里的儲存方式等內容，還有酶的濃度，都會對實驗結果造成很大的影響，制約著實驗的成功與否。因此，在實驗過程中，要特別注意對這些環(huán)節(jié)的控制，實驗的精確度、靈敏度都與之息息相關，試劑保存的溫度為4 ℃。

4 蔬菜農藥殘留快速檢測過程具有的優(yōu)點與缺點

4.1 優(yōu)點

農殘速測儀體積小、易攜帶，并且原理較為簡單容易讓人們理解，并且操作過程簡單，實驗過程容易操作，實驗過程應用的實驗材料明確，并且檢測時間短，整個實驗過程3 min就可以完成。相對于傳統(tǒng)的檢測方法，這樣的檢測方法更方便快捷，并且簡單地操作過程可以應用到各個方面，不管是蔬菜基地還是蔬菜零售處，都可以應用這種有效的檢測方法，能夠有效避免有毒蔬菜登上百姓餐桌。

4.2 缺點

利用這種方式檢測農藥殘留，比較容易受到限制，只能對一種或者幾種農藥進行定向檢測，像氨基甲酸酯和有機磷這兩種農藥，但是相對于其他農藥并沒有十分顯著的效果。酶保存過程比較困難，其活性不容易控制，因此所得到的實驗結果會有誤差，有可能產生錯誤的實驗現(xiàn)象，得到錯誤的結果。除此之外，還比較考驗技術人員，對技術人員的要求比較高，并且重復性也不是很好；在檢測過程中，存在著很多的檢測盲區(qū)，像蔥、蒜、香草以及一些菌類的檢測容易產生誤差，可能會出現(xiàn)假的陰陽性結果。

5 檢測結果不準確的原因及解決方法

這個實驗的實驗原理是根據(jù)酶的抑制情況來判斷蔬菜中所含農藥的情況。抑制率有一個大致的范圍為-10%～100%，對照的蔬菜吸光值在3 min前后的差值范圍為0.4～0.8。

5.1 實驗過程中酶抑制率偏小

儲存過程中不科學，因為不合理的儲存方式，在使用的時候酶就已經失去了原有的活性。酶本身作為一種催化劑，很容易失去活性，非常的脆弱。只有在合適的溫度、合適的酸堿度等合適的環(huán)境下才可以發(fā)揮酶本身的作用。37.5～37.8 ℃是酶發(fā)揮活性的最適合的溫度，酸堿度要控制在8.0左右。粉狀的酶應該存儲在冷凍室中，大致溫度應該為-18 ℃，在使用粉狀酶的過程中需要將酶溶解到提取液中，溶解后的酶液需要分裝在不同的試劑瓶中，短暫的時間內不需要將這些試劑放在冷藏室內，并且在使用過程中需要解凍；使用剩下的酶液需要放在冷藏室內，大致溫度控制在-15～0 ℃，并且要盡快使用完，盡量避免超過一周。酶不能夠反復溶解，最多不能超過兩次，否則酶的活性會被降低，影響實驗結果，在實驗過程中，為了給酶提供適宜的溫度，可以放置在一些較冷的位置，如可以準備一個冰盒。

5.2 酶的抑制率偏大的原因

抑制率偏大的主要原因是，檢測人員在實驗過程中操作不當，在操作的時候酶提前參與反應。所以應該盡快完成實驗過程，與比色卡的比較盡力在1 min內完成。

6 具體的解決辦法

在實際實驗過程中，會受到各種因素的影響，同一批蔬菜可能得到的實驗結果也是不一樣的，為了盡量減少這樣的情況，應該采取一些有效的措施。

（1）在使用移液槍的過程中，需要盡量避免溶液轉移過程中受到空氣的影響或者推液室仍然有一些殘留的液體。嚴格按照科學的步驟進行實驗，盡量避免試劑污染現(xiàn)象的發(fā)生。

（2）在配備藥品時，一定要嚴格遵從藥品配置說明書，不同的藥品有不同的特性，所以不可以一概而論，對于磷酸鹽緩沖液不可以使用一些自來水應付，這樣會造成很大的實驗誤差，必須使用蒸餾水、純凈水或，者去離子水也是可以的，礦物質水是不可以應用在實驗過程中的，因為礦物質水對水的干擾比較大，影響實驗結果的準確性。

（3）溫度會對酶產生非常大的影響是不言而喻的，它會影響酶的活性，所以必須保證實驗過程中的溫度控制。

（4）乙酰膽堿酯酶對實驗結果的影響。在實驗之前首先需要對實驗過程中所使用的藥品進行試驗，保證藥品沒有被污染，并且質量完好，需要特別注意酶試劑和底物的保存，要注意溫度的變化，一定確保酶的活性。

（5）反應階段將樣品放在分光光測儀器。在待測樣品加入底物之后，需要迅速搖勻，放到測定儀中，盡量減少這個過程中的時間，太長的時間會影響實驗結果的準確性。

（6）樣品的選擇過程。對于一些葉菜像白菜、娃娃菜等，應該去掉枯葉、爛葉和新生的葉子；豆類的選擇也要選擇從果皮到果肉的1～2 cm處，盡量避免都是果肉的情況；包含色素較多的，選取后不應該立即使用，因為很容易被氧化，這種蔬菜的提取液顏色深，并且會產生絮狀物。

（7）在使用比色皿的時候，需要注意各種事項，在拿取比色皿的時候不能夠用手直接觸摸，在拿的時候要接觸毛面，并且需要對準光路的方向，進而測定出實驗結果。比色皿的使用是非常重要的一個環(huán)節(jié)，正確的使用可以有效避免誤差。

（8）判斷陰陽性正確與否.可以選擇對比實驗，尖椒切塊索取試劑和整個植株索取試劑所得到的實驗結果一致，由此可見，尖椒在切塊浸提過程中，沒有假陽性的現(xiàn)象，關于這點，有待進一步考證[2]。

7 結語

利用這種實驗方法，簡單方便，并且檢測的速度非?？欤瑢嶒灛F(xiàn)象也非常明顯，非常利于觀察，并且整個實驗的操作步驟都非常簡單，并且不會受到外界因素的影響，可以在多個場合利用，但整個實驗過程也需要遵守科學原理，保證其正確性。

參考文獻

[1]趙亞玲.蔬菜農藥殘留快速檢測的影響因素及解決措施[J].現(xiàn)代農業(yè)科技，2010（12）：329.

[2]楊慧，王富華.我國蔬菜農藥殘留速測技術的應用與發(fā)展[J].農業(yè)環(huán)境與發(fā)展，2008（5）：67-72.