崔蓉　鐘興明　苗竹林　韓璐　劉曉陽　王永霞

【摘要】 目的 通過分析抗核抗體（ANA）和抗核抗體譜（ANAs）在不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（URSA）患者血清中的表達(dá)情況， 探討ANA及ANAs與不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生是否具有相關(guān)性。方法 選取流產(chǎn)門診就診的不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者267例作為觀察組， 另選取同期有正常妊娠分娩史的女性90例作為對照組。采用化學(xué)發(fā)光法檢測并比較兩組血清中ANA和ANAs的陽性情況。結(jié)果 觀察組血清樣本ANA陽性57例， 陽性率為21.35%;對照組血清樣本ANA陽性2例， 陽性率為2.22%。兩組ANA陽性率比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組抗干燥綜合征抗原A抗體（SSA）、抗干燥綜合征抗原B抗體（SSB）、抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）陽性率分別為6.37%（17/267）、0.75%（2/267）、3.00%（8/267）， 抗史密斯抗體（Sm）、抗硬皮病70抗體（Scl-70）、抗組氨酰tRNA合成酶抗體（Jo-1）陽性率均為0。對照組SSA陽性率為2.22%（2/90）， Sm、SSB、Scl-70、Jo-1、dsDNA陽性率均為0。兩組Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、dsDNA陽性率比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 自身抗體ANA和不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生發(fā)展有一定的相關(guān)性， 臨床上可能是反復(fù)流產(chǎn)的原因之一， 但具體的機(jī)制機(jī)理尚需進(jìn)一步明確。

【關(guān)鍵詞】 抗核抗體;抗核抗體譜;不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.13.001

Preliminary study on the correlation between antinuclear antibody and unexplained recurrent spontaneous abortion? ?CUI Rong， ZHONG Xing-ming， MIAO Zhu-lin， et al. Guangdong Family Planning Research Institute， Guangzhou 510600， China

【Abstract】 Objective? ?Objective? To discuss the correlation between antinuclear antibody （ANA） and antinuclear antibody spectrum （ANAs） and unexplained recurrent abortion by analyzing the expression of ANA and ANAs in the serum of patients with unexplained recurrent spontaneous abortion （URSA）. Methods? ?There were 267 patients with unexplained recurrent spontaneous abortion selected as the observation group and

90 women with normal pregnancy and delivery history as the control group. The chemiluminescence method was used to detect and compare the positive status of ANA and ANAs in the two groups of serum. Results? ?The observation group had 57 ANA positive cases， with positive rate as 21.35%. The control group had 2 ANA positive cases， with positive rate as 2.22%. There was statistically significant difference in ANA positive rate between the two groups （P<0.05）. The positive rates of anti Sjogrens syndrome antigen A antibody （SSA）， anti Sjogrens syndrome antigen B antibody （SSB）， anti dsDNA antibody （dsDNA） were 6.37% （17/267）， 0.75% （2/267）， 3.00% （8/267）， and the positive rates of anti Smiths antibody （Sm）， anti scleroderma 70 antibody （Scl-70） and anti histidine tRNA synthetase antibody （Jo-1） were 0. The control group had SSA positive rate as 2.22%（2/90）， Sm， SSB， Scl-70， Jo-1 and dsDNA positive rate as 0. There was no statistically significant difference in Sm， SSA， SSB， Scl-70， Jo-1， dsDNA postive rate between the two groups （P>0.05）. Conclusion? ?There is a certain correlation between ANA and the occurrence and development of unexplained recurrent spontaneous abortion. It may be one of the causes of recurrent abortion in clinic， but the specific mechanism needs to be further clarified.

【Key words】 Antinuclear antibody; Antinuclear antibody spectrum; Unexplained recurrent spontaneous abortion

流產(chǎn)的發(fā)生很常見， 人群發(fā)病率約為15%～25%。一次流產(chǎn)的發(fā)生常常不會(huì)引起重視， 然而反復(fù)流產(chǎn)對女性及其家庭的傷害卻是不可忽略的。國內(nèi)對不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的定義是3次或者3次以上的妊娠28周以前的胎兒丟失， 并且同時(shí)排除遺傳、解剖、內(nèi)分泌、感染、血栓前狀態(tài)等原因存在的反復(fù)流產(chǎn)稱之為不明原因的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（unexplained recurrent spontaneous abortion， URSA）。對于能找到原因的流產(chǎn)， 臨床上有相應(yīng)的診療措施， 通過積極治療后結(jié)局是樂觀的。而對于不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的治療， 臨床上則顯得棘手。近年來， 隨著生殖免疫學(xué)在此問題上的深入研究， 發(fā)現(xiàn)免疫性疾病與反復(fù)出現(xiàn)的妊娠丟失是有相關(guān)性的。目前較為明確的會(huì)導(dǎo)致流產(chǎn)反復(fù)發(fā)生的免疫性疾病有磷脂綜合征， 而臨床工作中更常見的情況是患者僅有一些自身免疫性抗體的升高， 如抗核抗體（antinuclear antibody， ANA）及其抗核抗體譜（antinuclear antibody spectrum， ANAs）， 抗甲狀腺抗體， 抗血管炎抗體， 類風(fēng)濕抗體等， 對于這些免疫性抗體的升高是否會(huì)影響妊娠的結(jié)局， 國內(nèi)外已有少量文獻(xiàn)報(bào)道， 但是結(jié)論不一。本研究旨在通過分析ANA及ANAs在不明原因反復(fù)流產(chǎn)患者血清中的表達(dá)情況， 尋找與流產(chǎn)有關(guān)的線索， 為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因查找提供新的思路。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 因?yàn)樽园l(fā)流產(chǎn)2次的患者其再次發(fā)生流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)與3次流產(chǎn)史的患者再發(fā)流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)相近， 故作者選取的研究對象是自發(fā)流產(chǎn)≥2次者， 均可入組。選取2017年6月～2018年12月在本院流產(chǎn)門診就診的不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者267例為觀察組， 年齡24～38歲， 所有患者均建立個(gè)人流產(chǎn)檔案， 并且入選本次研究要求滿足：①自然流產(chǎn)≥2次;②無甲狀腺疾病， 無糖尿病史， 無婦科內(nèi)分泌異常;③無解剖結(jié)構(gòu)異常， 無宮腔粘連;④無全身及生殖道感染;⑤無免疫性疾病;⑥夫妻雙方染色體正常。并選取同期有正常妊娠分娩史的女性90例作為對照組。兩組研究對象的年齡、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、雌二醇（E2）水平等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。見表1。

1. 2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備及試劑 檢測儀器為亞飛龍iFlash 3000-H化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（中國）， 相應(yīng)試劑有： ANA 免疫球蛋白G（IgG）測定試劑盒， 抗史密斯抗體（Sm）IgG測定試劑盒， 抗干燥綜合征抗原A抗體（SSA）IgG測定試劑盒， 抗干燥綜合征抗原B抗體（SSB）IgG測定試劑盒， 抗硬皮病70抗體（Scl-70）IgG測定試劑盒， 組氨酰tRNA合成酶抗體（Jo-1）IgG測定試劑盒， 抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）IgG測定試劑盒。所有操作步驟以及結(jié)果判定均嚴(yán)格按儀器及試劑說明書進(jìn)行。

1. 3 觀察指標(biāo) 所有對象在首診后第2天上午9點(diǎn)采血， 所獲血樣本靜置30 min， 離心后原管上機(jī)。采用化學(xué)發(fā)光法檢測并比較兩組血清中ANA和ANAs的陽性情況。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組血清樣本ANA陽性57例， 陽性率為21.35%;對照組血清樣本ANA陽性2例， 陽性率為2.22%。兩組ANA陽性率比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組SSA、SSB、dsDNA陽性率分別為6.37%（17/267）、0.75%（2/267）、3.00%（8/267）， Sm、Scl-70、Jo-1陽性率均為0。對照組SSA陽性率為2.22%（2/90）， Sm、SSB、Scl-70、Jo-1、dsDNA陽性率均為0。兩組Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、dsDNA陽性率比較， 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

3 討論

近年來， 隨著人們對生殖免疫學(xué)的關(guān)注， 免疫性疾病在生殖障礙中的作用也越發(fā)受到重視。目前已經(jīng)明確自身免疫性疾病磷脂綜合征會(huì)引起反復(fù)流產(chǎn)的發(fā)生， 臨床工作中常常會(huì)遇到自身免疫性抗體升高， 但還未能診斷為相關(guān)免疫性疾病的情況， 也提示了機(jī)體自身免疫狀態(tài)的異常， 這種異常的狀態(tài)也可能影響到了女性的生殖健康?；蛟S其可以解釋復(fù)發(fā)性流產(chǎn)至今尚有近一半的比例無法找到的原因。ANA又稱抗核酸抗原抗體， 是一組對細(xì)胞核內(nèi)的DNA、RNA、蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物產(chǎn)生的自身抗體。而ANAs則是按其核內(nèi)各個(gè)分子的性能不同可將各ANA區(qū)分開來。ANA及ANAs是最常用的風(fēng)濕免疫疾病抗體， 與多種風(fēng)濕免疫性疾病相關(guān)。但在正常人群中， 也有一定的陽性率。它們與不孕癥、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等生殖障礙的相關(guān)性， 目前尚無一致的看法[1-4]。

在Mumusoglu等[5]的臨床觀察中， 自身抗體陽性組流產(chǎn)的發(fā)生率明顯高于對照組， 認(rèn)為即便沒有免疫性疾病， 自身抗體的存在， 本身也可能直接增加復(fù)發(fā)性流產(chǎn)和產(chǎn)科并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。Sakthiswary等[6]在研究中發(fā)現(xiàn)， 流產(chǎn)組的ANA陽性率高達(dá)35.3%， 認(rèn)為ANA陽性提示患者妊娠的結(jié)局較差。也有文獻(xiàn)認(rèn)為孕前ANA陽性狀態(tài)對妊娠結(jié)局沒有影響， 而在妊娠后， 早孕期間ANA轉(zhuǎn)陰對連續(xù)妊娠具有良好的預(yù)后價(jià)值， 認(rèn)為ANA對流產(chǎn)的發(fā)生起到了一定的作用[7]。

還有報(bào)道稱， 在體外受精-胚胎移植（IVF-ET）中， ANA+/dsDNA+組中檢索到的卵母細(xì)胞、可用胚胎和高質(zhì)量胚胎的數(shù)量低于對照組中的數(shù)量， 植入率和臨床妊娠率最低， 早期流產(chǎn)率最高[8， 9]。而使用阿司匹林和潑尼松預(yù)處理的ANA陽性的IVF-ET患者， 其受精率、妊娠率、著床率明顯高于對照組， 流產(chǎn)率則明顯低于對照組[10， 11]。在作者的研究中， 觀察組267例不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者， 有57例檢測到ANA抗體的存在， ANA陽性率為21.35%（57/247）， 對照組90例， 檢測到ANA陽性2例， 陽性率為2.22%， 兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05）， 這與以上文獻(xiàn)觀察結(jié)果是一致的。單項(xiàng)抗體陽性率在兩組間比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 可能和作者的樣本量小、抗體種類有限有關(guān)。這些研究結(jié)果都提示了ANA可能在妊娠發(fā)生及早期妊娠階段不良事件中發(fā)揮了作用。最近國內(nèi)一篇ANA與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)關(guān)系的META分析發(fā)現(xiàn)：病例組ANA陽性率高于對照組;ANA滴度<1∶100或滴度>1∶100時(shí)， 病例組ANA 抗體滴度較對照組高（P<0.05）， 但在總體上兩組的 ANA 抗體滴度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 最后得出結(jié)論， ANA陽性可能與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有關(guān)， 但是ANA滴度高低與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性仍不明確[12]。

文獻(xiàn)也發(fā)現(xiàn)伴低補(bǔ)體血癥的系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）或原發(fā)性抗磷脂抗體綜合征（APS）合并妊娠者發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)最高[13， 14]。因此， 作者分析， 雖然沒有發(fā)生免疫性疾病， 但是機(jī)體內(nèi)的ANA抗體， 可能也激活了母體的補(bǔ)體系統(tǒng)， 補(bǔ)體異常激活， 活化的補(bǔ)體成分趨化招募炎性細(xì)胞， 炎性細(xì)胞再經(jīng)多種途徑致胎盤血管形成不足、胚胎氧化性損傷， 最后導(dǎo)致流產(chǎn)等妊娠并發(fā)癥的發(fā)生[15-18]。ANA抗體在體內(nèi)活躍， 引起的炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的若干炎性因子也對母胎界面的淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和活性起到了一定的促進(jìn)作用， 母體對胚胎的免疫耐受向免疫排斥方向發(fā)生擺動(dòng)， 誘發(fā)妊娠物的丟失， 發(fā)生流產(chǎn)[19， 20]。

綜上所述， ANA與不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生可能有一定的相關(guān)性， 但是具體機(jī)理機(jī)制尚需進(jìn)一步研究探討， 也期望能有更多的大樣本的、循證級別更高的臨床資料來明確ANA在不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因?qū)W中的意義。

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[收稿日期：2019-10-22]