徐 露,李寶瑞,吳偉偉,趙立香
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院 生物與制藥工程學(xué)院,吉林 吉林 132101)
遍地金主產(chǎn)于廣西、四川、貴州、云南等西南地區(qū),來源于藤黃科、金絲桃屬的一年生植物,其化學(xué)成分主要有黃酮類、萘駢二蒽酮類、間苯三酚類、異戊烯基苯甲酮類及揮發(fā)性化學(xué)成分等?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,該藥具有清熱解毒、止瀉、抗抑郁、抗菌、抗腫瘤等藥理活性。主要針對遍地金花期、果期的藥理作用進(jìn)行比較研究,為臨床用藥和藥物開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
1.1.1 藥物
遍地金花期和果期的干燥全草是在2019年7月和10月于天貓神州傳說旗艦店購買,產(chǎn)地云南。
地塞米松、番瀉葉20 g、阿司匹林、二甲苯、1%角叉菜膠、蒙脫石散均由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院藥理實驗室提供。
1.1.2 動物
健康昆明種小鼠150只,體重20±2 g;SD 大鼠50只,體質(zhì)量 180~220 g,均購于長春市土門嶺誠信動物養(yǎng)殖廠。
1.2.1 遍地金的提取
將花期、果期的遍地金干燥全草各500 g粉碎,用6倍遍地金體積的水進(jìn)行煎煮2 h×3次,過濾,并用少量蒸餾水洗滌藥渣,合并3次濾液和洗液,進(jìn)行常壓濃縮,使遍地金各時期水溶液濃縮至3 g·ml-1備用。
1.2.2 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響
1.2.2.1 實驗動物的分組和給藥
取小鼠25只,雄性,按體重隨機(jī)分為5組,分別為空白對照組、模型組、陽性對照組(阿司匹林組)、遍地金果期組、遍地金花期組。每組動物按0.2 ml·10 g-1灌胃藥物。對照組、模型組灌胃等量生理鹽水,陽性對照組阿司匹林 0.25 g·kg-1、遍地金果期組0.3 g·ml-1、遍地金花期組0.3 g·ml-1,每天1次,連續(xù)5 d。
1.2.2.2 實驗方法
最后1次灌胃后45 min,各組小鼠的右耳外、內(nèi)側(cè)分別涂二甲苯20μl致炎,左側(cè)耳作對照。45 min后頸椎脫臼致死,沿著耳廓基線均勻剪下兩側(cè)耳,在右、左耳廓相同位置用8 mm打孔器分別打下一塊耳片,并各自稱量,按如下公式計算腫脹度及腫脹抑制率。
腫脹度(mg)=對照組耳片重量-給藥組耳片重量
腫脹抑制率(%)=(對照組耳腫脹度-給藥組耳腫脹度)/對照組耳腫脹度×100%
1.2.3 對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響
1.2.3.1 實驗動物的分組和給藥
取25只大鼠,根據(jù)重量隨機(jī)分成5組,分別為對照組、模型對照組、陽性對照組(地塞米松組)、遍地金果期組、遍地金花期組。各組動物分別按1 ml·100 g-1灌胃相應(yīng)藥物。對照組、模型對照組給予等量生理鹽水,陽性對照組地塞米松0.005 g·kg-1、遍地金果期組0.3 g·ml-1、遍地金花期組0.3 g·ml-1,每天1 次,連續(xù)5 d。
1.2.3.2 實驗方法
末次給藥30 min后,除對照組外,其他組大鼠于右后足趾腱膜下分別注射新配的0.1ml角叉菜膠(1%)致炎,分別于致炎的前、后0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h,各自對大鼠的右后足進(jìn)行周長測量,腫脹度用致炎前、后不同時間點(diǎn)的腫脹差來表示,并進(jìn)行抑制率計算。
1.2.4 藥物對小鼠番瀉葉所致泄下的影響
1.2.4.1 實驗動物的分組和給藥
取25只小鼠,隨機(jī)分成5組,即對照組、模型對照組、陽性組(蒙脫石散組) 、遍地金果期組、遍地金花期組。按0.2 ml·10 g-1灌胃,連續(xù)5 d。模型對照組灌胃同體積蒸餾水,陽性對照組蒙脫石散組6 g·ml-1、遍地金果期組0.3 g·ml-1、遍地金花期組0.3 g·ml-1。
1.2.4.2 實驗方法
最后一次給藥之前的10 h禁食,不禁水,給藥30 min后,除對照組外,其它每組鼠均按0.3 ml·10 g-1予以灌胃,番瀉葉配置成20%的混懸液,將小鼠分別放入鼠盒中(底部鋪濾紙),不間斷觀察5 h,不斷更換底部濾紙,并記錄腹瀉開始時間、稀便數(shù)、干便數(shù)、稀便級,計算相應(yīng)的指標(biāo)。
腹瀉率( % )= 腹瀉動物數(shù)量/本組動物的總數(shù) × 100%
腹瀉指數(shù)=稀便率×稀便級
稀便率( % )=每個小鼠的稀便次數(shù)/大便總次數(shù)
稀便級= 總稀便級數(shù)/稀便次數(shù)
1.2.5 統(tǒng)計學(xué)方法
由表1可知,模型組的小鼠耳腫脹度比較明顯。和模型組相較,陽性對照組對小鼠的耳廓腫脹度顯著性降低(P<0.01),遍地金果期組對小鼠耳腫脹度顯著性降低(P<0.05) 。遍地金花期、果期對二甲苯所致小鼠耳腫脹有不同程度抑制作用,抑制率分別為 45.9% 和 61.9% 。
表1 遍地金花期、果期對二甲苯所致小鼠耳腫脹的作用Tab.1 The effect of Biandijin on the ear swelling caused by xylene in the flowering and fruiting
注:與模型組比較,*P<0.05差異顯著,**P<0.01差異極顯著。與遍地金花期比較,△P<0.05差異顯著。
由表2可知,模型組大鼠角叉菜膠注射0.5 h 后,足的腫脹度逐漸開始提高,2 h時達(dá)到峰值。和模型組相比,花期組、果期組的大鼠足跖腫脹于致炎1~2 h后,開始出現(xiàn)明顯的抑制,且與模型組比較差異極顯著(P<0.01),果期組3~4 h抑制作用與模型組比較差異顯著(P<0.05)。在 2 h時,抑制作用果期組與花期組比較差異顯著(P<0.05)。
表2 遍地金花期、果期對角叉菜膠大鼠足腫脹度的影響Tab.2 Effect of Biandijin flowering stage and fruiting stage on the swelling degree of carrageenan in
注:與模型組比較,*P<0.05顯著性差異,**P<0.01極顯著性差異。與遍地金花期比較,△P<0.05差異顯著。
給予番瀉葉(20%)混懸液灌胃1 h后,每組實驗小鼠均出現(xiàn)了不同程度的變化,如:行動緩慢、精神不振、運(yùn)動量減少、稀便量增加。由表3可見,模型組的小鼠稀便率、稀便數(shù)及腹瀉指數(shù)都有所升高,說明造模成功。與模型組比較,遍地金花期組、果期組均能降低腹瀉小鼠的稀便數(shù)和腹瀉指數(shù),但組間差異不顯著。
表3 遍地金花期、果期對番瀉葉致小鼠腹瀉的影響Tab.3 Effects of Biandijin flowering and fruiting periods on senna-induced diarrhea in
注:與模型組比較,*P<0.05顯著性差異,**P<0.01極顯著性差異。與遍地金花期組比較△P>0.05,差異不顯著。
遍地金花期、果期均有一定的抗炎作用。對小鼠耳腫脹都有一定的抑制作用?;ㄆ?、果期的耳腫脹度分別為2.36±0.87 cm、1.66±1.45 cm;腫脹抑制率分別為45.9%、61.9%。與花期比較,果期差異顯著(P<0.05)。對大鼠足腫脹度也有一定的抑制作用,在致炎1~2 h后開始明顯抑制。果期3~4 h抑制作用與模型組比較差異顯著(P<0.05),在致炎后2 h時,抑制作用與花期比較,果期差異顯著(P<0.05)。
遍地金花期、果期對番瀉葉所致的小鼠腹瀉均有一定的止瀉作用?;ㄆ诤凸谂c模型組比較,在稀便數(shù)、稀便率、稀便級及腹瀉指數(shù)上差異顯著(P<0.05),果期和花期在止瀉作用上無顯著差異(P>0.05)。