宋 吉，戴偉鋒，向 誠(chéng)，張 敉，角仕云

(昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650500)

番荔枝科(Annonaceae)瓜馥木屬(FissistigmaGriff.)中多種植物具有藥用價(jià)值，民間常用于治療關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、風(fēng)濕骨痛、手足麻木以及骨折水腫等[1]。瓜馥木屬植物含有生物活性較高的生物堿類、黃酮類及有機(jī)酸類等化合物[2]。瓜馥木屬植物小萼瓜馥木〔F.minuticalyx(McGr.et W.W.Sm.)Chatterjee〕為攀援灌木，主要分布于云南南部和西南部及貴州東南部的山地密林中。小萼瓜馥木是否具有同屬其他植物類似的化學(xué)成分或生物活性成分，迄今尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。為此，作者對(duì)小萼瓜馥木枝葉乙醇提取物石油醚部位進(jìn)行了初步的化學(xué)成分研究，以期為該種植物的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用提供基礎(chǔ)資料。

1 材料和方法

1.1 材料

供試小萼瓜馥木枝葉于2017年4月采自云南省普洱市瀾滄縣發(fā)展河鄉(xiāng)勐宋路邊，經(jīng)昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院向誠(chéng)副教授鑒定。

主要儀器：Bruker Avance Ⅲ HD核磁共振儀(600 MHz)(瑞士Bruker BioSpin公司)，Agilent 1200 Series液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)，Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)(美國(guó)Agilent公司)，LC3000型半制備液相色譜儀(北京創(chuàng)新通恒科技有限公司)，YMC-Pack ODS-A色譜柱(10 mm×250 mm，5 μm)(日本YMC公司)。

主要試劑：正向硅膠(100～200目，200～300目)和GF254薄層層析硅膠板(青島海洋化工有限公司)，ODS-C18硅膠(40～63 μm)(美國(guó)Pharmacia公司)，硫酸(分析純)(深圳市龍?zhí)┗び邢薰?，無(wú)水乙醇(分析純)(南京南試化學(xué)試劑有限公司)，MCI GEL CHP 20P柱填料(75～150 μm)(日本Mitsubishi Chemical公司)，Sephadex LH-20柱填料(20～100 μm)(美國(guó)GE公司)。

1.2 方法

取10 kg小萼瓜馥木枝葉，自然風(fēng)干后粉碎，用體積分?jǐn)?shù)95%乙醇加熱回流提取6次，每次6 h，合并提取液，減壓濃縮后得到總浸膏920 g；用蒸餾水將總浸膏混懸，依次用等體積石油醚和乙酸乙酯萃取3次，萃取液合并后經(jīng)減壓濃縮，分別得到石油醚部分96.3 g和乙酸乙酯部分196.6 g。石油醚部分經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯溶液(體積比1∶0、5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5、0∶1)梯度洗脫得到Fr.1至Fr.8共8個(gè)部分，其中，F(xiàn)r.5(5.3 g)經(jīng)正相硅膠(石油醚-乙酸乙酯溶液，體積比1∶1至0∶1)、MCI(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)10%～100%)、Sephadex LH-20(甲醇)和半制備液相色譜(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)50%)分離得到化合物6(8.2 mg，保留時(shí)間12.4 min)、化合物7(2.7 mg，保留時(shí)間13.4 min)和化合物8(2.8 mg，保留時(shí)間18.2 min)，F(xiàn)r.6(4.2 g)經(jīng)MCI(甲醇)和半制備液相色譜(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)45%)分離得到化合物1(2.2 mg，保留時(shí)間18.6 min)、化合物2(2.3 mg，保留時(shí)間19.4 min)和化合物9(4.3 mg，保留時(shí)間21.6 min)，F(xiàn)r.7(3.1 g)經(jīng)ODS-C18(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)10%～100%)和半制備液相色譜(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)42%)分離得到化合物3(4.2 mg，保留時(shí)間15.5 min)和化合物4(2.1 mg，保留時(shí)間16.8 min)，F(xiàn)r.8(2.4 g)經(jīng)ODS-C18(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)10%～100%)和半制備液相色譜(甲醇-水溶液，體積分?jǐn)?shù)35%)分離得到化合物5(2.6 mg，保留時(shí)間16.4 min)。以上化合物經(jīng)1D NMR核磁分析及與相關(guān)參考文獻(xiàn)比對(duì)核磁數(shù)據(jù)后確定各化合物結(jié)構(gòu)。

2 結(jié) 果

化合物1：黃色無(wú)定形粉末；C15H10O6；薄層層析(TLC)經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：6.54(1H，s，H-3)，6.21(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，7.38-7.40(2H，m，H-2′，6′)，6.90(1H，d，J=8.3 Hz，H-5′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：166.1(C-2)，103.9(C-3)，183.9(C-4)，163.2(C-5)，100.2(C-6)，166.4(C-7)，95.0(C-8)，159.4(C-9)，105.3(C-10)，120.3(C-1′)，114.2(C-2′)，147.1(C-3′)，151.0(C-4′)，116.8(C-5′)，123.7(C-6′)。結(jié)合文獻(xiàn)[3]，鑒定該化合物為木犀草素(luteolin)。

化合物2：黃色無(wú)定形粉末；C15H10O5；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：6.60(1H，s，H-3)，6.21(1H，d，J=1.6 Hz，H-6)，6.46(1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，7.86(2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，6.93(2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，5′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：166.3(C-2)，103.8(C-3)，183.9(C-4)，159.5(C-5)，100.2(C-6)，166.3(C-7)，95.1(C-8)，163.3(C-9)，105.3(C-10)，123.3(C-1′)，129.5(C-2′)，117.1(C-3′)，162.8(C-4′)，117.1(C-5′)，129.5(C-6′)。結(jié)合文獻(xiàn)[4]，鑒定該化合物為芹菜素(apigenin)。

化合物3：黃色油狀物；C14H18O3；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黑色斑點(diǎn)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：1.82(3H，dd，J=6.9，1.7 Hz，H-1)，6.35(1H，dq，J=15.8，6.9 Hz，H-2)，5.52(1H，brd，J=15.8 Hz，H-3)，4.29(1H，d，J=6.5 Hz，H-8)，4.12(1H，t，J=6.5 Hz，H-9)，5.56(1H，ddt，J=15.4，6.9，1.4 Hz，H-10)，5.87(1H，m，H-11)，2.18(2H，q，J=7.2 Hz，H-12)，1.68(2H，m，H-13)，3.67(2H，t，J=6.5 Hz，H-14)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：18.9(C-1)，144.6(C-2)，109.4(C-3)，79.2(C-4)，78.0(C-5)，71.4(C-6)，71.2(C-7)，66.7(C-8)，75.4(C-9)，127.5(C-10)，135.1(C-11)，28.8(C-12)，31.6(C-13)，62.2(C-14)。結(jié)合文獻(xiàn)[5]，鑒定該化合物為黨參炔醇(lobetyol)。

化合物4：黃色油狀物；C14H18O3；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黑色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：1.89(3H，dd，J=6.9，1.7 Hz，H-1)，6.21(1H，dq，J=10.9，6.9 Hz，H-2)，5.55(1H，brd，J=10.9 Hz，H-3)，4.25(1H，d，J=6.7 Hz，H-8)，4.00(1H，dd，J=6.9，6.7 Hz，H-9)，5.58(1H，ddt，J=15.4，6.9，1.4 Hz，H-10)，5.82(1H，dtd，J=15.4，6.9，0.9 Hz，H-11)，2.16(2H，q，J=7.3 Hz，H-12)，1.65(2H，m，H-13)，3.58(2H，t，J=6.5 Hz，H-14)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：16.5(C-1)，144.1(C-2)，109.7(C-3)，75.8(C-4)，78.5(C-5)，70.9(C-6)，83.0(C-7)，67.8(C-8)，76.6(C-9)，129.6(C-10)，135.2(C-11)，29.8(C-12)，33.1(C-13)，62.3(C-14)。結(jié)合文獻(xiàn)[6]，鑒定該化合物為異黨參炔醇(isolobetyol)。

化合物5：棕黃色油狀物；C20H28O8；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黑色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：3.58(2H，t，J=6.5 Hz，H-1)，1.66(2H，m，H-2)，2.18(2H，q，J=7.2 Hz，H-3)，5.91(1H，dt，J=15.4，6.9 Hz，H-4)，5.46(1H，ddt，J=15.4，8.3，1.2 Hz，H-5)，4.27(1H，brdd，J=8.0，6.2 Hz，H-6)，4.43(1H，brd，J=6.2 Hz，H-7)，5.58(1H，dqd，J=15.8，1.8，0.6 Hz，H-12)，6.33(1H，dq，J=15.8，6.9 Hz，H-13)，1.81(3H，dd，J=6.9，1.8 Hz，H-14)，4.31(1H，d，J=7.7 Hz，H-1′)，3.26(1H，dd，J=9.0，7.7 Hz，H-2′)，3.32(1H，dd，J=9.0，8.8 Hz，H-3′)，3.28(1H，dd，J=9.4，8.8 Hz，H-4′)，3.18(1H，ddd，J=9.4，6.0，2.2 Hz，H-5′)，3.85(1H，dd，J=12.0，6.0 Hz，H-6a′)，3.65(1H，dd，J=12.0，2.2 Hz，H-6b′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：62.3(C-1)，33.0(C-2)，29.8(C-3)，138.9(C-4)，126.6(C-5)，81.2(C-6)，66.6(C-7)，81.8(C-8)，71.2(C-9)，72.5(C-10)，78.1(C-11)，110.5(C-12)，145.4(C-13)，18.9(C-14)，100.7(C-1′)，74.9(C-2′)，78.0(C-3′)，71.7(C-4′)，78.0(C-5′)，62.7(C-6′)。結(jié)合文獻(xiàn)[7]，鑒定該化合物為黨參炔苷(lobetyolin)。

化合物6：黃色油狀物；C20H24O7；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為紫色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：7.01(1H，d，J=1.8 Hz，H-2)，6.72(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.82(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6)，4.82(1H，d，J=5.7 Hz，H-7)，4.35(1H，td，J=5.7，3.7 Hz，H-8)，3.83(1H，dd，J=12.0，5.7 Hz，H-9a)，3.76(1H，dd，J=12.0，3.7 Hz，H-9b)，6.99(1H，brs，H-2′)，6.86(2H，brs，H-5，H-6′)，6.50(1H，dt，J=15.9，1.4 Hz，H-7′)，6.23(1H，dt，J=15.9，5.8 Hz，H-8′)，4.19(2H，dd，J=5.8，1.4 Hz，H-9′)，3.79(3H，s，OCH3)，3.80(3H，s，OCH3)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：134.1(C-1)，111.8(C-2)，148.7(C-3)，147.0(C-4)，115.6(C-5)，121.0(C-6)，74.1(C-7)，86.2(C-8)，62.2(C-9)，133.0(C-1′)，111.3(C-2′)，151.9(C-3′)，148.9(C-4′)，118.8(C-5′)，120.6(C-6′)，128.5(C-7′)，131.5(C-8′)，63.8(C-9′)，56.5(OCH3)，56.3(OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[8-9]，鑒定該化合物為赤式-愈創(chuàng)木基甘油-β-O-4′-松柏醇(erythro-guaiacylglycerol-β-O-4′-coniferyl ether)。

化合物7：白色無(wú)定形粉末；C20H22O6；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：3.10(2H，m，H-1，5)，4.74(2H，d，J=3.9 Hz，H-2，6)，3.87(2H，dd，J=9.2，3.8 Hz，H-4a，8a)，4.24(2H，dd，J=9.2，6.8 Hz，H-4b，8b)，6.89(4H，m，H-2′，5′，2″，5″)，5.59(2H，brs，H-4′，4″)，6.82(2H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6′，6″)，3.91(6H，s，2×OCH3)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：54.1(C-1，5)，85.9(C-2，6)，71.6(C-4，8)，132.9(C-1′，1″)，108.6(C-2′，2″)，146.6(C-3′，3″)，145.2(C-4′，4″)，114.3(C-5′，5″)，118.9(C-6，6″)，55.9(2×OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[10]，鑒定該化合物為松脂醇(pinoresinol)。

化合物8：白色透明油狀；C11H16O3；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為黃色斑點(diǎn)；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：1.99(1H，m，H-2a)，1.53(1H，m，H-2b)，4.22(1H，m，H-3)，2.42(1H，m，H-4a)，1.74(1H，m，H-4b)，5.75(1H，s，H-7)，1.76(3H，s，H-9)，1.47(3H，s，H-10)，1.28(3H，s，H-11)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：37.2(C-1)，46.5(C-2)，67.3(C-3)，48.0(C-4)，89.0(C-5)，174.5(C-6)，113.4(C-7)，185.7(C-8)，31.1(C-9)，27.0(C-10)，27.5(C-11)。結(jié)合文獻(xiàn)[11]，鑒定該化合物為黑麥草內(nèi)酯(loliolide)。

化合物9：白色無(wú)定形粉末；C11H10O4；TLC經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%硫酸-乙醇溶液噴霧顯色為藍(lán)色斑點(diǎn)；1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ：6.30(1H，d，J=9.4 Hz，H-3)，7.96(1H，d，J=9.4 Hz，H-4)，7.26(1H，s，H-5)，7.08(1H，s，H-8)，3.86(OCH3)，3.80(OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ：161.0(C-2)，109.3(C-3)，144.8(C-4)，113.1(C-5)，146.3(C-6)，149.9(C-7)，100.5(C-8)，153.0(C-9)，111.6(C-10)，56.6(OCH3)，56.3(OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[12]，鑒定該化合物為濱蒿內(nèi)酯(scoparone)。

本研究從小萼瓜馥木枝葉乙醇提取物的石油醚部分中分離并鑒定出2個(gè)黃酮類化合物(化合物1和2)、3個(gè)炔類化合物(化合物3、4和5)、2個(gè)木脂素類化合物(化合物6和7)、1個(gè)萜類化合物(化合物8)和1個(gè)香豆素類化合物(化合物9)，這9個(gè)化合物均首次從小萼瓜馥木中分離獲得。