趙建權(quán)，向林奎，王 鈞，陶興成，左仁軍

(重慶市藥研院制藥有限公司，重慶 400802)

1 前 言

1.1 課題提出背景

銀翹袋泡劑由金銀花、連翹、淡竹葉、荊芥、牛蒡子、桔梗、薄荷、淡豆豉、甘草、蘆根等十味藥材組成，具有辛涼解表，清熱解毒的功能。用于風(fēng)熱感冒，發(fā)熱頭痛，咳嗽，口干，咽喉疼痛等癥，該制劑是重慶市中藥研究院（原四川省中藥研究所）于上世紀(jì)80年代初期根據(jù)銀翹散改劑而來。因?yàn)榇輿_劑[1]具有吸收快，顯效迅速的特點(diǎn)，既能保留幾乎全部揮發(fā)性成分，又能保護(hù)不耐熱成分，并能使植物粉末中的全部成分能在極短時(shí)間內(nèi)溶出，所以將湯劑改為袋泡劑。銀翹散[2]是清代著名中醫(yī)吳鞠通《溫病條辯》中第一名方，主要功效：辛涼透表，清熱解毒。用于風(fēng)熱感冒，發(fā)熱頭痛，口干咳嗽，咽喉疼痛，小便短赤。近代醫(yī)學(xué)廣泛用于多種下呼吸道感染[3]及其他感冒性疾病早期，應(yīng)用范圍廣泛，臨床療效明確，是中醫(yī)極為常用的方劑之一。

1.2 課題提出依據(jù)

本方金銀花清熱解毒，疏散風(fēng)熱，而連翹還具有消癰散結(jié)的功效，二者合用，去邪清熱，避晦解毒共為君藥；薄荷、牛蒡子辛涼，疏淡風(fēng)熱、清利頭目、利咽透疹；荊芥、淡豆豉辛溫，但是溫而不燥，祛風(fēng)解表，助君藥開皮毛而逐邪；四者共為臣藥，疏散表邪；淡竹葉除煩利尿，清上焦之熱；蘆根清熱生津；桔梗宣肺止咳，三者共為佐藥；而甘草調(diào)和諸藥，祛痰止咳，又配合桔梗清利咽喉為佐使藥。銀翹袋泡劑以金銀花和連翹為君藥。其中揮發(fā)油為金銀花的主要成分和有效成分[4]。連翹[5]中所含的連翹苷、連翹脂苷、齊墩果酸、熊果酸、揮發(fā)性成分等有效成分，具有較強(qiáng)的藥理活性。薄荷、荊芥、牛蒡子為臣藥[6]，這幾位藥所共同含有的薄荷酮以及其他揮發(fā)性成分在本方中有明顯的藥理活性。此方的服用方式為加水泡服，故將揮發(fā)油含量以及水浸出物的含量作為考察數(shù)據(jù)的依據(jù)。因?yàn)榉梅绞綖榧铀莘?，最終被人們所利用的為水浸出物中的成分，故將水浸出物的含量作為本次試驗(yàn)的最重要的考察數(shù)據(jù)。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 藥材與儀器

2.1.1 中藥飲片與試劑

金銀花，連翹，桔梗，薄荷，荊芥，淡豆豉，淡竹葉，蘆根，牛蒡子，甘草。石油醚（30～60℃）（分析純廠家 成都市科龍化工試劑廠 批號2016092201）。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

高速多功能粉碎機(jī)（LFP-800T）；

萬分之一分析天平（ME204E）；

電熱鼓風(fēng)干燥箱（DGF-30）；

藥典標(biāo)準(zhǔn)篩，錐形瓶，燒杯，移液管等儀器。

2.2 正交試驗(yàn)[7]設(shè)計(jì)

2.2.1 工藝流程

將金銀花，連翹，桔梗，薄荷，荊芥，淡豆豉，淡竹葉，蘆根，牛蒡子，甘草等十味藥材單獨(dú)粉碎。根據(jù)所需要的粉碎粒度過相應(yīng)目數(shù)的篩網(wǎng)。將粉碎藥材按處方進(jìn)行配料，將配好料的原生藥粉加適量純化水制軟材，軟材達(dá)到“捏之成團(tuán)，觸之即散為止”。將制好的軟材擠壓通過藥典標(biāo)準(zhǔn)篩1號篩制成濕顆粒，將濕顆粒轉(zhuǎn)入烘箱中烘干。檢測水分含量，揮發(fā)油含量，以及浸出物含量。

2.2.2 檢測方法

（1）水分的檢測：水分按照中華人民共和國按藥典2015版四部通則（0832）項(xiàng)下檢測。

（2）浸出物的檢測：浸出物按照中華人民共和國按藥典2015版四部通則（2201）項(xiàng)下熱浸法檢測。

浸出物的計(jì)算：浸出物%=[（W3-W2）×V]/[W1×V1×（1-W%）]×100%；

W3為干燥后殘?jiān)驼舭l(fā)皿的重量，g；

W2為干燥至恒重的蒸發(fā)皿重量，g；

W1為供試品取樣量，g；

W%為供試品的水分；

V為加入水的體積，ml；

V1為所吸取續(xù)濾液的體積，ml。

（3）揮發(fā)油的檢測：揮發(fā)油按照羅小萍[8]摸索出的用樣量小的揮發(fā)油微量測定方法檢測揮發(fā)油含量。張廣強(qiáng)等應(yīng)用該法測不同產(chǎn)地菊花揮發(fā)油含量，證明其準(zhǔn)確度較高。其裝置同藥典法，但所需的用樣量小，適用于各種相對密度的揮發(fā)油含量檢測。在揮發(fā)油測定器中加入適量的石油醚，使揮發(fā)油溶于石油醚中，蒸餾完后用適量石油醚洗滌冷凝管，分層后收集石油醚于精密稱重的蒸發(fā)皿中，讓石油醚于通風(fēng)處自然揮發(fā)，精密稱定蒸發(fā)皿的重量，換算成百分含量。

2.2.3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)參考文獻(xiàn)選定對浸出率影響的三個(gè)主要因素：粉碎力度（篩網(wǎng)目錄），烘干溫度，烘干時(shí)間作為考察因素。以水溶性浸出率作為考察指標(biāo)，根據(jù)L9（34）正交表設(shè)計(jì)三因素三水平的正交試驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)操作均按照上述工藝流程進(jìn)行操作。

表1 因素水平表

2.2.4 試驗(yàn)結(jié)果

按照工藝流程和上述正交試驗(yàn)進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析如下：

表2 水分檢測結(jié)果

銀翹袋泡劑未經(jīng)干燥的濕顆粒水分分別為：過二號篩65.15%、過四號篩54.40%、過5號篩54.53。

在本試驗(yàn)條件下，經(jīng)過烘干的試驗(yàn)水分均能達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)（不得超過12%）。

表3 浸出物正交試驗(yàn)結(jié)果（直觀分析法）

表4 浸出物正交實(shí)驗(yàn)方差分析

由表3、表4可知，銀翹袋泡劑浸出率的影響因素順序?yàn)椋篈＞C＞B，即影響因素中粉碎粒度＞烘干時(shí)間＞烘干溫度。其中B、C為不顯著因素，對提取的影響較?。籄為顯著影響因素，對浸出率的影響最大。因此銀翹袋泡劑最佳工藝為A3B2C1，即粉碎粒度為過5號標(biāo)準(zhǔn)篩（80目），烘干溫度為65℃，烘干時(shí)間為70分鐘。

銀翹袋泡劑濕顆粒的揮發(fā)油含量分別在0.196%，0.201%，0.203%。

表5 揮發(fā)油正交試驗(yàn)結(jié)果分析（直觀分析法）

表6 揮發(fā)油正交試驗(yàn)方差分析

由表5、表6可知，銀翹袋泡劑中揮發(fā)油的影響因素順序?yàn)椋築＞C＞A，即影響因素中烘干溫度＞烘干時(shí)間＞粉碎粒度。其中B、C對揮發(fā)油的提取影響較大，A對揮發(fā)油的提取影響較小。因此針對揮發(fā)油的而言，銀翹袋泡劑的最佳工藝為B1C1A3。即粉碎粒度為過5號標(biāo)準(zhǔn)篩（80目），烘干溫度為50℃，烘干時(shí)間為70分鐘。

因?yàn)獒槍雎识?，烘干溫度對浸出率的影響因素為不顯著影響因素，所以銀翹袋泡劑的最佳工藝為A3B1C1。

2.2.5 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

按照工藝流程和最佳工藝A3B1C1進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，以驗(yàn)證其正確性。結(jié)果如下：

表7 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由上表分析可知，銀翹袋泡劑在A3B1C1條件下，其浸出物含量和揮發(fā)油含量相對較高，結(jié)果也比較穩(wěn)定，所以銀翹袋泡劑相對最佳的生產(chǎn)工藝為過80目篩網(wǎng)，烘干溫度為50℃，烘干時(shí)間為70 min。

3 小 結(jié)

在這次實(shí)驗(yàn)中，以銀翹袋泡劑浸出物含量和揮發(fā)油含量為考察指標(biāo)，粉碎粒度，烘干溫度和烘干時(shí)間作為影響因素，建立正交試驗(yàn)，最后通過數(shù)據(jù)分析得到相對最優(yōu)的工藝，即過80目篩網(wǎng)，烘干溫度為50℃，烘干時(shí)間為70 min。最終做的3組驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)可知，按最佳工藝銀翹袋泡劑的浸出率和揮發(fā)油含量均在所做實(shí)驗(yàn)的最佳值附近。

4 結(jié) 論

本文通過實(shí)驗(yàn)與查閱炮制文獻(xiàn)對銀翹袋泡劑有藥理活性物質(zhì)的含量進(jìn)行研究，從實(shí)驗(yàn)來看，粉碎粒度對其有效成分在水溶劑下的浸出率有顯著影響，烘干溫度和時(shí)間對銀翹袋泡劑的揮發(fā)性成分有顯著影響，所以根據(jù)目前的工藝增加粉碎粒度和降低烘干溫度減少烘干時(shí)間對銀翹袋泡劑有藥理活性的物質(zhì)能較好地保留與溶出。