付 林，廖 俊

（華中藥業(yè)股份有限公司，湖北 襄陽441021）

奧沙西泮（Oxazepam）屬于苯二氮類鎮(zhèn)靜催眠藥，具有顯著的鎮(zhèn)靜、抗焦慮作用，同時具有較好的松馳肌肉和抗抽搐作用，能緩解神經(jīng)官能癥患者的焦慮不安、精神緊張及煩惱失眠等癥狀，用于神經(jīng)官能癥、失眠及癲癇的輔助治療，適用于老年人或腎功能不全者。在同類苯二氮卓類鎮(zhèn)靜催眠藥中，奧沙西泮的代謝過程簡單，受年齡及肝功能影響較??；半衰期較短，不易在體內(nèi)蓄積；成癮性較小，可廣泛應(yīng)用于成癮行為的基礎(chǔ)研究[1]。進(jìn)行奧沙西泮雜質(zhì)的質(zhì)量研究，對于原料藥研究和制劑研究有著重要而深遠(yuǎn)的意義。

有關(guān)物質(zhì)是藥品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一，也是仿制藥一致性評價的重要內(nèi)容，涉及到藥品的安全性及其質(zhì)量的可控性[2]。隨著仿制藥市場的逐步擴(kuò)張及國內(nèi)仿制藥一致性評價的進(jìn)行，制藥企業(yè)對雜質(zhì)對照品的需求迅猛增長。中國藥典2015版中，對奧沙西泮原料及其片劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測項(xiàng)規(guī)定了2種已知雜質(zhì)，分別為(3RS)-7-氯-2-氧代-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮雜-3-乙酸酯(雜質(zhì)Ⅰ)和6-氯-4-苯基喹啉-2-甲醛(雜質(zhì)Ⅱ)[3]。其中雜質(zhì)Ⅰ為奧沙西泮制備過程的中間體，雜質(zhì)Ⅱ?yàn)閵W沙西泮的主要降解產(chǎn)物，也是有關(guān)物質(zhì)檢測項(xiàng)中較大的單項(xiàng)雜質(zhì)[4]。奧沙西泮在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、光照、氧化及熱環(huán)境下均不穩(wěn)定，都會產(chǎn)生雜質(zhì)Ⅱ[5]。盡管在上述條件下均會生成雜質(zhì)Ⅱ，但是一方面，奧沙西泮不能完全降解生成雜質(zhì)Ⅱ，體系中總有含量可觀的奧沙西泮存在，另一方面，奧沙西泮在降解產(chǎn)生雜質(zhì)Ⅱ的同時，會伴隨產(chǎn)生成分復(fù)雜、比例較大的其它多種雜質(zhì)。上述情況為制備純度較高的雜質(zhì)Ⅱ帶來極大的困難。采用薄層色譜技術(shù)（PTLC）或液相制備柱技術(shù)進(jìn)行分離純化[5]，制備得到的雜質(zhì)Ⅱ數(shù)量很少，制備周期長，制備成本高，不能滿足對奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ進(jìn)行定性和定量分析的需要。

圖1 奧沙西泮及其雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)

奧沙西泮中的雜質(zhì)Ⅱ是奧沙西泮的主要降解產(chǎn)物，控制奧沙西泮中雜質(zhì)Ⅱ的含量，對提升奧沙西泮的質(zhì)量具有重大意義。制備奧沙西泮中的雜質(zhì)Ⅱ，可用于奧沙西泮生產(chǎn)中雜質(zhì)的定性和定量分析，從而提高奧沙西泮的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為安全用藥提供重要的指導(dǎo)意義。目前尚沒有6-氯-4-苯基喹啉-2-甲醛（雜質(zhì)Ⅱ，中國藥典2015版）制備方法的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，為此，我們設(shè)計(jì)了奧沙西泮中雜質(zhì)Ⅱ的合成路線（圖 2）。

圖2 奧沙西泮中雜質(zhì)Ⅱ的合成路線

本研究的制備以奧沙西泮為原料，反應(yīng)及后處理工藝簡單，不需要使用薄層色譜技術(shù)（PTLC）或液相制備柱技術(shù)進(jìn)行分離純化，可大幅縮短制備周期，降低制備成本，大幅提高雜質(zhì)Ⅱ的制備效率。該制備工藝具有原料易得、工藝過程簡單、制備得到的奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ純度較高等優(yōu)點(diǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

含量測定采用1200安捷倫液相色譜儀。

奧沙西泮（實(shí)驗(yàn)室自制, 純度99.7%），其他試劑均為國產(chǎn)工業(yè)品，未進(jìn)一步處理直接使用。

1.2 合成部分

向反應(yīng)瓶內(nèi)加入350mL甲苯、10g奧沙西泮、0.8g對甲苯磺酸、0.5mL三乙胺，攪拌升溫，于 65～70℃保溫反應(yīng) 5h。降溫至 20～25℃，用400mL×3飽和鹽水洗至中性，無水硫酸鈉干燥，濾出硫酸鈉，濾液減壓濃縮，再用甲醇10mL×2置換后，加入10mL石油醚，冷凍、過濾、烘干，得到5.8g奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ，HPLC純度99.79%。

2 結(jié)果與討論

以奧沙西泮為原料制備奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的實(shí)驗(yàn)過程中，考察了不同溶劑、不同的反應(yīng)條件對目標(biāo)產(chǎn)物奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ純度的影響，最終制備得到純度99%以上的雜質(zhì)Ⅱ。

2.1 奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ制備過程中反應(yīng)溶劑的選擇

在奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的制備過程中，固定以鹽酸作為反應(yīng)條件，考察不同反應(yīng)溶劑對底物原料奧沙西泮的反應(yīng)比例（TLC）、能否形成奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ粗品固體、其它雜質(zhì)斑點(diǎn)的數(shù)目與比例（TLC）、最終反應(yīng)體系中目標(biāo)產(chǎn)物奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的比例（TLC）等因素的影響（表1）。

表1 反應(yīng)溶劑對反應(yīng)體系中目標(biāo)產(chǎn)物奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ純度的影響

采用甲醇與乙醇等質(zhì)子溶劑為反應(yīng)溶劑進(jìn)行反應(yīng)時，反應(yīng)時間較快，但是數(shù)量可觀的奧沙西泮原料在反應(yīng)尚未完全的情況下，就已經(jīng)產(chǎn)生成分多樣、比例較大的其它雜質(zhì)，最終反應(yīng)體系中目標(biāo)產(chǎn)物的比例約60%，無法形成奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ粗品固體。采用非質(zhì)子溶劑甲苯或乙酸乙酯進(jìn)行反應(yīng)時，反應(yīng)的選擇性有大幅提高，最終反應(yīng)體系中目標(biāo)產(chǎn)物的比例達(dá)85%以上，并且可以得到奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ粗品固體。對幾種溶劑進(jìn)行比較及篩選，確定了以甲苯或乙酸乙酯作為反應(yīng)溶劑較為合適，并優(yōu)選甲苯作為反應(yīng)溶劑。

2.2 奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ制備過程中反應(yīng)條件的選擇

確定反應(yīng)溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為65～70℃，考察酸性、堿性等多種制備條件對奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的收率和純度的影響，結(jié)果見表2。

表2 不同反應(yīng)條件對奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ收率和純度的影響

不同的反應(yīng)條件對奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ收率和純度的影響很大。酸性條件下，在硫酸中反應(yīng)1.5h，反應(yīng)基本完全，但生成物的成分復(fù)雜，奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的純度不到90%；在鹽酸中的反應(yīng)較快，但是奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的收率和純度均不理想，雜質(zhì)Ⅱ的純度為91%；在對甲苯磺酸與鹽酸中的反應(yīng)情況基本相當(dāng)。堿性條件下，在氫氧化鈉中反應(yīng)較快，5h基本能反應(yīng)完全，反應(yīng)體系的成分復(fù)雜，奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的純度不到80%；碳酸鉀中的反應(yīng)較慢，體系中奧沙西泮原料的殘余較多，除奧沙西泮原料外，生成物中的其它成分復(fù)雜，延長反應(yīng)時間后，其它雜質(zhì)的比例越來越大，無法形成奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ粗品固體；三乙胺中的反應(yīng)很慢，有產(chǎn)物生成，但同時有50%以上的奧沙西泮原料不能反應(yīng)，無法形成奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ粗品固體。我們在進(jìn)一步篩選反應(yīng)條件時偶然發(fā)現(xiàn)，選用對甲苯磺酸進(jìn)行反應(yīng)時，加入吡啶或三乙胺，能大幅提高反應(yīng)的選擇性，減少副反應(yīng)的產(chǎn)生，奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的收率能達(dá)到58%，純度達(dá)到99%，為此確定將對甲苯磺酸與三乙胺共存的情況作為最終反應(yīng)條件。

最終確定了制備的反應(yīng)條件：以奧沙西泮為原料，在非質(zhì)子溶劑甲苯中，加入催化劑對甲苯磺酸和緩沖試劑三乙胺，保溫反應(yīng)，反應(yīng)完畢后經(jīng)處理得到奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ。雜質(zhì)Ⅱ純度達(dá)到99%以上，總產(chǎn)率達(dá)到58%。

該制備方法的優(yōu)點(diǎn)：1)反應(yīng)及后處理工藝簡單，總收率較高；2)在非質(zhì)子溶劑中加入催化劑及緩沖試劑，有利于降低反應(yīng)活性，減少副反應(yīng)，從而提高奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的純度；3)純化過程簡潔，只需在溶劑中重結(jié)晶和打漿，不需要使用薄層色譜技術(shù)（PTLC）或液相制備柱技術(shù)進(jìn)行分離純化，適合奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ較大規(guī)模的定向合成制備。

3 結(jié)論

本文提供了一種奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ定向合成的制備方法。以奧沙西泮為原料制備奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ，無需使用薄層色譜技術(shù)（PTLC）或液相制備柱技術(shù)進(jìn)行分離純化。制備得到的奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ的純度可以達(dá)到 99% 以上，適合于奧沙西泮雜質(zhì)Ⅱ較大規(guī)模的定向合成制備。合成的雜質(zhì)Ⅱ可以用于雜質(zhì)的定性及定量分析，從而提高奧沙西泮的用藥安全性。