吳曉艷，趙鐵民

青海紅十字醫(yī)院(西寧 810000)

輸血醫(yī)學(xué)屬于臨床治療中的二級(jí)學(xué)科，在對(duì)患者進(jìn)行搶救與治療的過程中發(fā)揮著極為重要的作用。輸血安全的管理關(guān)乎每個(gè)患者的生命安全，也是臨床醫(yī)療工作人員廣泛關(guān)注的重要問題。血型鑒定與交叉配血是整個(gè)輸血過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，該環(huán)節(jié)的質(zhì)量好壞對(duì)輸血安全有重大影響，減少和避免同種免疫造成的非溶血性輸血反應(yīng)及溶血性輸血反應(yīng)是確保輸血安全的關(guān)鍵[1]。低離子凝聚胺技術(shù)近年來在臨床上被廣泛使用，因此本研究選擇本院受血者130例為研究對(duì)象，在臨床輸血檢驗(yàn)中應(yīng)用低離子凝聚胺技術(shù)，將其與鹽水法檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行比較，探討其臨床應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 選擇受血者130例，按照不同檢驗(yàn)方案分為觀察組(65例)與對(duì)照組(65例)。觀察組男性35例，女性30例；年齡12～70歲，平均(41.74±10.87)歲。對(duì)照組男性32例，女性33例；年齡13～75歲，平均(42.95±12.39)歲。對(duì)比觀察組與對(duì)照組一般資料，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性對(duì)照(由氯化鈉和磷酸鹽等制備而成，不含任何人紅細(xì)胞血型抗體)、自身對(duì)照和陽性對(duì)照(由氯化鈉、磷酸鹽和不完全抗-D等制備而成)。所有患者參與本次研究均為自愿，且排除嚴(yán)重血液系統(tǒng)疾病。

2 研究方法

2.1 觀察組：采用低離子凝聚胺技術(shù)。試劑選用：凝聚胺試劑盒(合肥天一生物技術(shù)研究所有限責(zé)任公司；批號(hào)：20190926)，包括低離子介質(zhì)溶液、凝聚胺溶液和重懸液；標(biāo)準(zhǔn)血清(上海血液公司；批號(hào)：20190814)；抗-D單克隆抗體(上海博力醫(yī)學(xué)生物科貿(mào)有限公司；批號(hào)：BMA1902B)。具體方法：取試管2支，在試管上標(biāo)記受血者及供血者的編碼，并標(biāo)注主側(cè)管與次側(cè)管。主側(cè)加入2滴受血者血清，再加2%～5%供血者紅細(xì)胞懸液1滴。次側(cè)加入供血者血清2滴，再加2%～5%受血者紅細(xì)胞懸液1滴。主側(cè)和次側(cè)分別加入0.6 ml低離子溶液，將其混勻后放置于室溫環(huán)境下30 s，后加入凝聚胺溶液2滴，均勻混合以后靜置15 s。使用離心機(jī)以3400 r/min離心15 s，倒出上清液，輕搖試管以觀察紅細(xì)胞凝集狀態(tài)。目測有明顯凝集現(xiàn)象出現(xiàn)后，分別取2滴重懸液加入主側(cè)管與次側(cè)管，再次輕搖試管后觀察結(jié)果。凝集于1 min內(nèi)消失，表示非特異性凝集，呈陰性，配血結(jié)果相合。凝集不消失則表示抗原抗體結(jié)合引起特異性凝集，呈陽性，配血結(jié)果不合。

2.2 對(duì)照組：采用鹽水介質(zhì)法。取清潔干燥試管，加入供血者及受血者血液各2 ml。分離血清，滴入鹽水制成2%～5%的紅細(xì)胞懸液。再取2支試管，標(biāo)注主側(cè)管與次側(cè)管。主側(cè)中加入供血者紅細(xì)胞懸液1滴與受血者血清2滴，次側(cè)中加入受血者紅細(xì)胞懸液1滴與受血者血清2滴，輕搖混勻，低速沉淀2 min，觀察結(jié)果[2]。

3 觀察指標(biāo) 對(duì)比觀察組和對(duì)照組中5種抗體的檢驗(yàn)結(jié)果，凝集強(qiáng)度由弱到最強(qiáng)依次以“+”～“”表示，無凝集用“-”表示。統(tǒng)計(jì)兩組凝集細(xì)胞例數(shù)，同時(shí)對(duì)觀察組中紅細(xì)胞凝集消失情況進(jìn)行觀察[3-5]。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以例(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組抗體檢驗(yàn)結(jié)果 見表1。觀察組抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D陽性對(duì)照凝集強(qiáng)度較對(duì)照組顯著增高(P<0.05)。

表1 兩組抗體檢驗(yàn)結(jié)果

2 兩組凝集細(xì)胞例數(shù)比較 觀察組共檢出13例凝集細(xì)胞，檢出率20.00%。對(duì)照組共檢出2例凝集細(xì)胞，檢出率3.08%。觀察組凝集細(xì)胞例數(shù)檢出率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 觀察組紅細(xì)胞凝集消失情況 見表2。觀察組特異性凝集在3 min內(nèi)均未消失，而非特異性凝聚在10 s內(nèi)消失的有35例(53.85%)，在11～20 s內(nèi)消失的有30例(46.15%)。

表2 觀察組紅細(xì)胞凝集消失情況[例(%)]

討 論

隨著輸血醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展以及對(duì)《臨床用血技術(shù)規(guī)范》的執(zhí)行力和監(jiān)督力的加強(qiáng)，臨床用血規(guī)范化程度也在不斷加強(qiáng)，輸血安全的觀念深入人心，臨床醫(yī)療工作者對(duì)此的重視程度空前提高[6-8]。臨床實(shí)踐表明，對(duì)患者的血型進(jìn)行正確的鑒定，才能減少和避免發(fā)生急性或遲發(fā)性輸血反應(yīng)，以確保患者的輸血安全與生命安全[9]。臨床目前主要采用鹽水介質(zhì)法以及低離子凝聚胺技術(shù)進(jìn)行血液交叉配合檢驗(yàn)。鹽水法是臨床常用的交叉配血法，其主要優(yōu)點(diǎn)是試驗(yàn)方法簡單，操作快捷[10-12]。該法的主要原理是：在受血者及供血者的交叉配血反應(yīng)中，若血清中存在針對(duì)ABO以及其他血型抗原的IgM抗體，在離心作用以及鹽水介質(zhì)的直接作用下，可見抗原抗體結(jié)合，并用肉眼可觀察到凝集，本試驗(yàn)主要包括主、次側(cè)，主側(cè)主要是檢查受血者血清中有無破壞供血者紅細(xì)胞的抗體以及補(bǔ)體依賴性的意外抗體，而次側(cè)則是檢查供血者的血清中有無破壞受血者紅細(xì)胞的抗體與其他抗體[13]。但由于其只能檢出不配合的完全抗體，而無法檢查不配合的不完全抗體，可能出現(xiàn)由不完全抗體造成的輸血反應(yīng)，臨床安全性較低[14]。

相較鹽水介質(zhì)法而言，低離子凝聚胺技術(shù)安全性更高，其原理是：凝聚胺是一種高價(jià)陽離子季銨鹽，溶解產(chǎn)生的正電荷能中和紅細(xì)胞膜表面帶有的負(fù)電荷，減弱紅細(xì)胞間的靜電斥力，促使紅細(xì)胞凝集或聚集，而低離子溶液對(duì)紅細(xì)胞中的Zeta電位有顯著的降低作用，可使得抗原與抗體之間的吸引力進(jìn)一步增強(qiáng)。若血清中存在IgG或IgM類血型抗體時(shí)，可與紅細(xì)胞發(fā)生緊密結(jié)合，此時(shí)將重懸液加入其中，能夠?qū)⒕勰返恼姾上沟眉t細(xì)胞與IgG或IgM類血型抗體產(chǎn)生的凝集不散開，而對(duì)于非特異性凝集，加入重懸液可使非特異性凝集消失[15]，因此該方法能夠快速、準(zhǔn)確地檢出IgG和IgM抗體。此外，該方法除了檢測出完全I(xiàn)gG抗體外，對(duì)于特殊的IgG抗體以及不完全I(xiàn)gG抗體均具備比較高的靈敏性，這一點(diǎn)彌補(bǔ)了鹽水介質(zhì)法的不足。

高原地區(qū)特殊的地理人文環(huán)境使得其臨床輸血情況與內(nèi)陸地區(qū)有一定差異，因此在臨床輸血過程中，因地制宜地開展輸血工作成為臨床輸血工作的重中之重。由于人們受到宗教觀念與傳統(tǒng)文化觀念的影響較深，加之過去血源較為緊張，因此在高原地區(qū)開展輸血工作的難度較大。近年來全國各地包括高原牧區(qū)在內(nèi)均成立了中心血站，加上無償獻(xiàn)血宣傳工作到位，使得血源不足等問題得到有效解決。高原地區(qū)持刀械斗的情況較為常見，加上交通不便，經(jīng)常發(fā)生車禍，由于創(chuàng)傷導(dǎo)致大量出血的情況較平原地區(qū)比例更高，輸血是挽救患者生命的重要措施，盡早進(jìn)行輸血能夠有效減輕損傷部位及周圍部分的水腫情況，有利于改善患者預(yù)后，盡早糾正其外科創(chuàng)傷或休克狀態(tài)。

本研究結(jié)果表明，鹽水法只能檢測出完全抗體，對(duì)于ABO血型以外的抗體均不能檢出，而低離子凝聚胺技術(shù)則能夠促進(jìn)紅細(xì)胞與血清中的不規(guī)則抗體(多為IgG)相結(jié)合。IgG抗體主要是經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，在鹽水介質(zhì)中無法進(jìn)行凝集，本研究結(jié)果提示：觀察組抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D陽性對(duì)照凝集強(qiáng)度較對(duì)照組更高(P<0.05)；觀察組中13例凝集細(xì)胞被檢出，檢出率20.00%，對(duì)照組中2例凝集細(xì)胞被檢出，檢出率3.08%，觀察組高于對(duì)照組(P<0.05)。此外，觀察組中，特異性凝集在3 min內(nèi)均未消失，而非特異凝聚在10 s內(nèi)消失的有35例(53.85%)，在11～20 s內(nèi)消失的有30例(46.15%)。從該結(jié)果中能夠看出，相較于鹽水介質(zhì)法，低離子凝聚胺法具有更高的靈敏度，凝集細(xì)胞被檢出率也更高，而且是肉眼可見的細(xì)胞凝集，而鹽水介質(zhì)法檢出率就相對(duì)更低，只能在顯微鏡下有2例紅細(xì)胞凝集。在臨床實(shí)際工作中，在對(duì)輸血安全進(jìn)行保障的同時(shí)，盡可能減少配血時(shí)間，提升輸血效率，能夠在較大程度上為患者救治工作爭取時(shí)間，降低死亡率[16]。此外，低離子凝聚胺技術(shù)用到了假凝集清除液，其能消除非特異性凝集，減少假陽性配血的發(fā)生率。據(jù)文獻(xiàn)[17]報(bào)道，低離子凝聚胺技術(shù)不僅能夠?qū)t細(xì)胞表面相應(yīng)抗體進(jìn)行快速檢測，還能規(guī)避非特異性凝集的發(fā)生，本研究中所有紅細(xì)胞的非特異性凝集均在3 min內(nèi)完全消失，與其報(bào)道具有一致性。

綜上所述，低離子凝聚胺技術(shù)在交叉配血、血型鑒定以及不規(guī)則抗體中的應(yīng)用價(jià)值非常顯著，可快速檢出IgG、IgM抗體，并促進(jìn)不規(guī)則抗體與紅細(xì)胞反應(yīng)，促進(jìn)特異性凝集，且凝集現(xiàn)象非常明顯，而非特異性凝集消散時(shí)間快。該方法具有操作簡單、效率高、耗時(shí)短、準(zhǔn)確性高等優(yōu)勢，應(yīng)用于臨床配血，可有效降低溶血反應(yīng)發(fā)生率，從而有效保障輸血安全，減少輸血不良事件，值得臨床應(yīng)用。