劉士棟,張川
(國(guó)家海洋標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量中心,天津 300112)
霉菌屬于真菌,其種類繁多[1],包括真菌門(mén)中的子囊菌綱、藻狀菌綱、不完全菌綱等。霉菌的傳播主要是孢子,其大小肉眼難以觀察。霉菌孢子從孢囊中散發(fā)出來(lái)會(huì)隨空氣四處漂浮,因此在日常的環(huán)境中一般存在有霉菌孢子。霉菌孢子具有良好耐受外界環(huán)境的機(jī)制,在遇到合適的生長(zhǎng)環(huán)境時(shí)便會(huì)生長(zhǎng)繁殖。霉菌的生長(zhǎng)必須要有合適的溫度、濕度和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。一般認(rèn)為在溫度20~35 ℃, 相對(duì)濕度75~95 %的環(huán)境下,霉菌可出現(xiàn)大量的繁殖現(xiàn)象。霉菌在生長(zhǎng)中需要碳、氮、鉀、磷、硫、鎂等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在橡膠、皮革、纖維材料等中大量存在,這也是霉菌易造成材料破壞的原因所在[2]。霉菌的腐蝕是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,涉及生物化學(xué)、界面化學(xué)等多學(xué)科領(lǐng)域,主要包括霉菌對(duì)材料的蝕食、代謝產(chǎn)物對(duì)界面的腐蝕以及由此引發(fā)的連續(xù)腐蝕過(guò)程。霉菌對(duì)儀器造成的失效模式主要包括菌絲在表面的生長(zhǎng)會(huì)造成回路常數(shù)改變、絕緣電阻降低;表面的侵蝕造成材料裂紋、應(yīng)力改變等;霉菌腐蝕還易引起絕緣電阻降低、形成開(kāi)路等;霉菌的生長(zhǎng)也會(huì)使設(shè)備界面吸濕性加強(qiáng),降低性能;此外,霉菌還容易引起人體審美上的不適等。由此可見(jiàn),霉菌能引起材料性能的改變,影響儀器的功能。特別是隨著海洋儀器種類的增多和應(yīng)用范圍的擴(kuò)展,越來(lái)越多的新式制造工藝、設(shè)計(jì)工藝和新材料應(yīng)用到產(chǎn)品的研制及生產(chǎn)當(dāng)中,這就對(duì)產(chǎn)品的防霉性能提出了更高的要求。從統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來(lái)看,霉菌生長(zhǎng)引起的失效是功能性失效最主要的因素之一[3]。霉菌試驗(yàn)是環(huán)境試驗(yàn)的一種,通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室中人為創(chuàng)造出材料易感霉菌環(huán)境來(lái)評(píng)價(jià)材料或儀器設(shè)備在霉菌環(huán)境中的適應(yīng)性和可靠性。
海洋科考船是海洋調(diào)查和海洋科考的重要場(chǎng)所??瓶即嫌写罅康暮Q罂瓶荚O(shè)備,如CTD、海流計(jì)、ADCP等。海洋科考船幾乎全年處于高濕的環(huán)境中,船體中的霉菌大量增殖??瓶即幍暮Q蟓h(huán)境中有大量的鹽霧存在,使得眾多的儀器或材料表面存在一層“鹽膜”,這會(huì)影響霉菌的生長(zhǎng)?!跋蜿?yáng)紅10”船是一條母港為舟山港的海洋科考船,每年有300多天處于高溫高濕的海洋環(huán)境中,該船具有典型的海洋科考船環(huán)境,查明其霉菌環(huán)境具有重要參考意義。本次調(diào)查主要選取“向陽(yáng)紅10”船空氣流通較差場(chǎng)所、儀器設(shè)備使用和貯存場(chǎng)所,主要包括生化實(shí)驗(yàn)室、地球物理實(shí)驗(yàn)室、儀器設(shè)備貯存室、后甲板底艙等。通過(guò)對(duì)“向陽(yáng)紅10”科考船的霉菌進(jìn)行采樣、分析,以查明科考船上的霉菌群落特征,為海洋儀器的防霉設(shè)計(jì)及霉菌試驗(yàn)提供參考。
本次調(diào)查采用的培養(yǎng)基共有3種,分別是察氏培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基[4]。
2.1.1 空氣樣
空氣樣品的采樣:將平板培養(yǎng)皿放置在空氣流通較差或有明顯霉腐味的地方,打開(kāi)上蓋約5~10 min,然后蓋好進(jìn)行密封處理,放入冰箱中冷藏。在實(shí)驗(yàn)室采用劃線分離法進(jìn)行菌種的分離培養(yǎng)和鑒定[4]。
2.1.2 固體樣
選取在明顯霉腐環(huán)境中的線纜、纖維制品、塑料制品等小塊樣固體,然后將樣品放入培養(yǎng)皿或試管中;對(duì)于有明顯霉腐跡象的材料或儀器表面如玻璃表面等,首先用棉簽或涂抹棒在霉腐表面進(jìn)行輕輕擦拭,然后同樣在培養(yǎng)基表面進(jìn)行擦拭或涂抹,最后進(jìn)行密封處理,放入冰箱中冷藏,帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行倒置培養(yǎng)和分離鑒定[4]。
2.2.1 霉菌的培養(yǎng)方法
2.2.1.1 固體樣品上霉菌的分離及培養(yǎng)方法
將固體樣品放入無(wú)菌水或加入少量潤(rùn)濕劑(如十二烷基硫酸鈉)的無(wú)菌水中,將固體上的附著霉菌或孢子分散開(kāi)。如果霉菌或孢子的懸浮液比較清澈可以考慮不用稀釋;如果樣品大且懸浮液比較渾濁可將懸浮液進(jìn)行稀釋。用吸管吸取霉菌孢子懸浮液滴到培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上,涂抹均勻后將培養(yǎng)皿放置于溫度為25~30 ℃,相對(duì)濕度為90~98 %的霉菌培養(yǎng)箱中,倒置培養(yǎng)1~3周。
2.2.1.2 空氣樣品中霉菌的分離及培養(yǎng)方法
將采集到的空氣樣用接種環(huán)粘取待分離的霉菌菌落,在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線或者扇形劃線,然后將培養(yǎng)皿放置于溫度為25~30 ℃,相對(duì)濕度為90~98 %的霉菌培養(yǎng)箱中,倒置培養(yǎng)1~3周。
2.2.2 鑒定與優(yōu)勢(shì)種群的確定
首先進(jìn)行菌落整體形態(tài)觀察,然后挑取少量菌絲體進(jìn)行直接觀察,或者將菌絲體放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察。最后結(jié)合霉菌的整體菌落形態(tài)、菌絲體、孢子體等的顯微形態(tài)確定霉菌的種屬。優(yōu)勢(shì)種群一般是指在相同的生態(tài)環(huán)境中,數(shù)量明顯多于其他種屬的類群。
圖1為采集的天線體、紡織品、線纜和橡膠管形態(tài)圖。
本次調(diào)查共采集線纜等固體樣品及空氣樣105個(gè),其中固體樣品45個(gè),空氣樣品60個(gè)。將霉菌培養(yǎng)條件設(shè)置為溫度為25~30 ℃,相對(duì)濕度為90~98 %,一般在1~3周內(nèi)長(zhǎng)成較為明顯且形態(tài)良好的菌落。霉菌的鑒定一般結(jié)合菌落形態(tài)、菌株的顯微形態(tài)和孢子形態(tài)等[5],各類樣品及培養(yǎng)基的菌屬鑒定統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1、表2和表3。
圖1 采集到的樣品圖
表1 不同培養(yǎng)基菌屬類別和數(shù)量
表2 固體樣中菌屬名稱及數(shù)量
表3 空氣樣中菌屬名稱及數(shù)量
本次調(diào)查,“向陽(yáng)紅10”船上取得的樣品共鑒定出菌落數(shù)479個(gè),分屬12個(gè)屬。固體樣品上共采集菌落數(shù)344個(gè),分屬12個(gè)屬,其中曲霉屬(161個(gè))、青霉屬(126個(gè))為顯著的優(yōu)勢(shì)種屬。本次固體材料采集包括織物、纖維纜繩、金屬碎片、塑料制品、橡膠纜線、橡膠管、橡膠天線等,在固體材料上采集的種屬較多,可能與采集的材料種類繁多有關(guān)系??諝鈽悠飞瞎膊杉鋽?shù)135個(gè),分屬7個(gè)屬,優(yōu)勢(shì)種屬也是曲霉屬和青霉屬,但是鏈格孢屬的比例也較高。曲霉和青霉是常見(jiàn)的霉菌試驗(yàn)腐蝕菌種,可對(duì)紙質(zhì)品、纖維制品、塑料、皮革、橡膠等多種材料造成破壞。鏈格孢霉一般可以在皮革、帆布、木材、紙張等多種材質(zhì)上生長(zhǎng),從而造成這些材質(zhì)的腐蝕。鏈格孢屬在可查到的霉菌試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中較少提及,因此,鏈格孢霉可以考慮作為海洋儀器霉菌試驗(yàn)中的添加菌種。從結(jié)果可以看出科考船上的霉菌群落環(huán)境復(fù)雜、種類繁多,優(yōu)勢(shì)種屬為曲霉屬和青霉屬,這兩種菌屬在陸地環(huán)境中也大量存在,可見(jiàn)這兩種菌屬的適應(yīng)環(huán)境的能力較強(qiáng),并且這兩種菌屬會(huì)造成多種材料的霉腐。
海洋環(huán)境與陸地環(huán)境相比,具有高濕、高鹽的特點(diǎn)。但高鹽環(huán)境并未大量抑制霉菌的生長(zhǎng),尤其船艙中空氣流通較差的區(qū)域,霉腐氣味較重,說(shuō)明霉菌滋生嚴(yán)重。在這些船艙中長(zhǎng)期安裝有大量的儀器、纜線等,如ADCP、測(cè)深儀等。目前在海洋儀器的設(shè)計(jì)中更多的注重濕熱和鹽霧的防護(hù),對(duì)于霉菌的防護(hù)意識(shí)較差。因此,首先應(yīng)當(dāng)在產(chǎn)品的選材、結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)等方面加強(qiáng)防霉菌的考量,在海洋儀器的研制、生產(chǎn)階段應(yīng)當(dāng)重視霉菌試驗(yàn)的篩選作用;其次,船舶環(huán)境是一個(gè)重油污環(huán)境,雖然儀器的材料本身防霉效果良好,但是在船舶環(huán)境中表面易沾染油污,仍然會(huì)造成霉菌的滋生,這也是在儀器的設(shè)計(jì)、試驗(yàn)中應(yīng)當(dāng)考慮的。