【摘要】目的? 相容性輸血。? 方法? 不規(guī)則抗體的篩選、鑒定與交叉配血。? 結(jié)果? 檢出抗-JKb抗體，抗-Ec抗體及自身抗體，與多份ABO、RH同型的血液交叉配血，挑選凝集強(qiáng)度最弱的應(yīng)急輸血。結(jié)論? 對(duì)于直抗陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)一步做抗體鑒定，挑選避開(kāi)該抗體的血液進(jìn)行配血，存在自身抗體干擾交叉配血時(shí)挑選凝集強(qiáng)度最弱的應(yīng)急輸血。

【關(guān)鍵詞】 交叉配血? 抗-JKb抗體? 抗-Ec抗體

現(xiàn)將在上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)期間所遇到的疑難配血一例報(bào)告如下：

一般資料

患者：陳×× ，男，61歲，來(lái)自上海市第六人民醫(yī)院，臨床診斷：骨髓增生異常綜合征;輸血史：3次，末次輸血：2014年9月;要求：特配三洗紅細(xì)胞。

血清學(xué)檢查

1.試劑和儀器：抗-A、抗-B血清（批號(hào)：20130509）、IgM抗D（批號(hào)：20130322）、反定型ABO紅細(xì)胞（批號(hào)：20145320））、IgM抗E（批號(hào)：20133201）、IgM抗C（批號(hào)：20143001）、IgM抗c（批號(hào)：20133102）、IgM抗e（批號(hào)：20133302）、多特異性抗人球蛋白試劑（批號(hào)：20130904）、單抗IgG（批號(hào)：20140108）、抗C3（批號(hào)：20130807）、國(guó)譜（批號(hào)：20145706）均來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限公司，進(jìn)口譜細(xì)胞（批號(hào)：8000211388）、IgM抗JKa（批號(hào)：8000184076）、IgM抗JKb（批號(hào)：8000197772）來(lái)自Sanquin公司，抗人球蛋白卡（批號(hào)：50531.89.14）來(lái)自DiaMed，所有試劑均在有效期內(nèi)， 久保田離心機(jī)、37度水浴箱等。

2.實(shí)驗(yàn)方法：嚴(yán)格按照上海市血液中心血型參比研究室《血型和血液免疫學(xué)常規(guī)檢查操作細(xì)則》進(jìn)行操作。全部實(shí)驗(yàn)均在上海市血液中心血型參比研究室完成。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

3.1鹽水介質(zhì)試管法直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)

3.2國(guó)譜細(xì)胞鑒定抗體特異性實(shí)驗(yàn)（卡氏法）

從表中可以看出3號(hào)和7號(hào)反應(yīng)比較弱，首先懷疑JKb抗體的存在，但不能排除抗-Ec抗體！

3.3進(jìn)口譜細(xì)胞進(jìn)一步鑒定抗體特異性實(shí)驗(yàn)（卡氏法）

3.4鹽水介質(zhì)試管法ABO及Rh分型、Kidd系統(tǒng)分型

注：進(jìn)1#、 進(jìn)2# 、國(guó)2#均為CCDee表型， JKb陽(yáng)性細(xì)胞;篩2#、 國(guó)3#、 獻(xiàn)13#均為CCDee表型，JKb陰性細(xì)胞;進(jìn)6#、 進(jìn)15#分別為ccdEE和ccDEE表型，且JKb皆為陰性細(xì)胞;進(jìn)8# 、進(jìn)9#均為ccdee表型， JKb陰性細(xì)胞。以上細(xì)胞跟患者血清反應(yīng)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可證實(shí)該患者血清中確實(shí)存在抗-c抗-JKb抗體，但還不能證實(shí)是否還含有抗-E抗體！自身和直抗所用的細(xì)胞均為溫鹽水6洗后的患者細(xì)胞，以排除自身抗體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響！

3.6患者吸收液和放散液進(jìn)一步鑒定抗體特異性實(shí)驗(yàn)（卡氏法）

注：用Ec陰性，JKb陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行吸收，結(jié)果提示放散液中放散下來(lái)的抗體為JKb抗體，但吸收液中仍舊不能證實(shí)為抗Ec抗體！造成這以原因可能是抗JKb抗體和自身抗體還沒(méi)有吸收干凈！接下來(lái)我們?cè)俅螌?duì)患者血清進(jìn)行兩次吸收，結(jié)果如下：

3.7進(jìn)口譜細(xì)胞鑒定三次吸收后抗體特異性實(shí)驗(yàn)（卡氏法）

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合計(jì)量效應(yīng)，確定為抗-Ec的聯(lián)合抗體！由此可證實(shí)該患者血清中亦存在抗-E抗體！

3.8三次吸收后的患者血清再分別與獻(xiàn)13#和篩2#細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果：

由此可說(shuō)明3.5的表中的獻(xiàn)13#和篩2#細(xì)胞呈弱陽(yáng)性實(shí)為自身抗體的干擾。

3.9.交叉配血實(shí)驗(yàn)：選獻(xiàn)13# 獻(xiàn)血樣本（CCDee， JKb陰性），與患者進(jìn)行主側(cè)配血，結(jié)果凝聚胺法為陰性，抗人球蛋白法弱陽(yáng)性，兩者自身對(duì)照均為弱陽(yáng)性。

4.結(jié)論：該患者血型為B型，Rh陽(yáng)性，CCDee，JK（a+b-），血清中檢出不規(guī)則抗體，為抗JKb抗體和抗-Ec抗體！該患者血樣與獻(xiàn)13# 獻(xiàn)血者血樣（CCDee， JKb陰性）進(jìn)行主側(cè)配血，在鹽水和聚凝胺介質(zhì)中均無(wú)凝集無(wú)溶血現(xiàn)象，在抗人球介質(zhì)中有凝集無(wú)溶血現(xiàn)象，上述獻(xiàn)血者洗滌紅細(xì)胞2單位可供患者輸注，輸注時(shí)應(yīng)放慢速度，密切觀察！

5.討論

5.1.Kidd血型系統(tǒng)中的抗-JKa和抗-JKb抗體是易于結(jié)合補(bǔ)體的IgG抗體，多抗體存在，有劑量效應(yīng)！而Rh系統(tǒng)的抗體除抗D外，其他抗體也會(huì)引起輸血反應(yīng)。其中抗-E抗體最常見(jiàn)，其次為抗-c抗體，這些抗體可為天然發(fā)生，但大多為免疫產(chǎn)生，且抗-E和抗-c常常同時(shí)出現(xiàn)，為聯(lián)合抗體，可造成嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。

5.2.本案例中自身抗體和多種抗體同時(shí)存在，自身抗體往往容易掩蓋同種抗體，給抗體鑒定帶來(lái)很大的困難，因此，我們?cè)谧隹贵w鑒定碰到復(fù)雜或不明朗的格局時(shí)可以增加一些附加實(shí)驗(yàn)，如進(jìn)行抗體驗(yàn)證試驗(yàn)、吸收放散實(shí)驗(yàn)、溫水洗滌紅細(xì)胞以排除自身抗體對(duì)同種抗體檢測(cè)的干擾實(shí)驗(yàn)等，并運(yùn)用一些分析技巧，如看有無(wú)劑量效應(yīng)，疊加加分等，紅細(xì)胞相應(yīng)抗原的檢測(cè)也是檢測(cè)抗體的必要補(bǔ)充！本次實(shí)驗(yàn)是名男性，有過(guò)三次輸血史，抗體可能是由于曾經(jīng)輸過(guò)不配合的血液產(chǎn)生的，要善于將國(guó)譜和進(jìn)口譜細(xì)胞結(jié)合起來(lái)分析，做免疫學(xué)檢查時(shí)要認(rèn)真細(xì)致，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和真實(shí)性，配合臨床的治療，以達(dá)到輸血安全的目的！

參考文獻(xiàn)：

1.上海市血液中心血型和血液免疫學(xué)常規(guī)操作細(xì)則。

2.上海市血液中心免疫學(xué)講義。

3.劉知蘭， 王學(xué)惠， 趙月凱. 不規(guī)則抗體篩查與輸血安全分析[J]. 中國(guó)誤診學(xué)雜志， 2007， 7（17）.

作者簡(jiǎn)介：杜新鳳（1985-1），性別：女，民族：壯族，籍貫：廣西南寧，職稱：中級(jí)職稱，學(xué)歷：本科，單位：玉林市中心血站，研究方向：酶免、輸血，單位

玉林市中心血站 廣西玉林 537000