王彩霞

【摘?要】?目的：觀察枸杞多糖對D-半乳糖致小鼠衰老的影響。方法：將50只1月齡昆明種雌性小鼠隨機分為空白對照組、模型組、枸杞多糖低、中、高劑量組，每組10只。除空白組外其余各組均每日注射D-半乳糖造成亞急性衰老模型，給藥組同時給予不同劑量的枸杞多糖。6周后檢測小鼠皮膚組織中總抗氧化能力（T-AOC）活性和脂褐質(zhì)（LF）含量。結果：枸杞多糖可增強衰老模型小鼠皮膚組織T-AOC活性（P<0.05），降低LF含量（P<0.05）。結論：枸杞多糖可通過提高衰老皮膚抗氧化物酶活性，降低氧化產(chǎn)物含量，從而達到延緩衰老的作用。

【關鍵詞】?枸杞多糖;皮膚衰老;小鼠;總抗氧化能力;脂褐質(zhì)

【中圖分類號】R229?【文獻標志碼】 A?【文章編號】1007-8517（2020）6-0007-03

Abstract：Objective To observe the effect of Lycium barbarum polysaccharide on D-galactose induced aging in mice.Methods 50 health Kunming and female mice were randomly divided into 5 groups-blank group，model group， low dose group，middle dose group and high dose group.In addition to the blank group， daily giving subcutaneous injection of D-galactose into the neck at other groups to establish subacute senile model. At the same time，each experimental group were coated for different dose Lycium barbarum polysaccharide. After 6 weeks the activities of total ant-ioxidation capability （T-AOC） and the content of lipofuscin （LF） in the skin in all groups were tested.Results Lycium barbarum polysaccharide could remarkably enhance the activities of T-AOC（P<0.05） and decrease the content of LF in the Skin tissue of senile mice（P<0.05）.Conclusion Lycium barbarum polysaccharide can protect against aging skin through increasing antioxidant enzyme activity and decreasing oxidative product content.

Key?words：Lycium barbarum polysaccharide; Skin aging; Mouse; Total ant-ioxidation capability; lipofuscin

枸杞屬茄科落葉灌木，是我國傳統(tǒng)的“藥食同源”中藥材，含有多種營養(yǎng)成分和微量元素[1] ?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》曾記載：“枸杞久服，堅筋骨，輕身不老[2]”。枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharde，LBP）是從枸杞中提取出來的一種多糖，是枸杞發(fā)揮藥效的主要成分之一[1]，因其具有多種生物活性越來越受到人們的關注。研究表明，枸杞多糖具有降血脂、降血糖、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抑制細胞凋亡及延緩衰老等廣泛的藥理學作用[3]。本研究觀察衰老模型小鼠皮膚組織中T-AOC活性和LF含量，從而探究枸杞多糖對D-半乳糖致亞急性衰老小鼠皮膚衰老程度的影響。

1?儀器與材料

1.1?動物?KM 小鼠50只，雌性，體重（20±2）g，級別：SPF。實驗動物均購自寧夏醫(yī)科大學實驗動物中心，分籠飼養(yǎng)，自由飲食，規(guī)律光照，無不良影響因素，適應性飼養(yǎng)1周后開始實驗。

1.2?材料?D-半乳糖（銀川祺寶生物有限公司），枸杞多糖（銀川市農(nóng)科院提供），總抗氧化能力（T-AOC）、脂褐質(zhì)（LF）試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.3?儀器?ELx808全自動酶標儀（美國佰騰），DY89-Ⅱ電動玻璃勻漿機（上海將來實驗設備有限公司），TDL-5-A型離心機（上海安亭科學儀器廠），測定儀器為722分光光度計（上海第三分析儀器廠），DK-420S型三用恒溫水箱（上海精宏實驗設備有限公司），BLG10電子秤（上海精科天美科學儀器有限公司）。

2?方法

2.1?動物分組、造模及給藥?50只小鼠隨機分為5組：空白對照組、模型組、枸杞多糖低、中、高劑量組，每組10只。模型組及給藥組每日頸背部皮下注射D-半乳糖（1000mg/kg），建立亞急性衰老模型。空白對照組頸背部皮下注射等量生理鹽水。低、中、高劑量組在注射 D-半乳糖的同時灌服枸杞多糖5mg/kg/d、10mg/kg/d、20mg/kg/d，給藥容積20mL/kg。模型組、正常組灌服等量生理鹽水。以上操作1次/d，連續(xù)42d。

2.2?取材及指標檢測?連續(xù)給藥42d后，小鼠斷頸處死，速取小鼠背部兩肩胛部之間脫毛區(qū)域的皮膚，面積為3cm×3cm，并迅速將取下的皮膚冰凍保存，待用。取脫毛后背部皮膚組織塊0.5g左右，量筒量取該組織塊9倍重量的預冷生理鹽水勻漿，漿液以3500r/min的速度離心20min，取其上清液分別按照試劑盒說明書測定小鼠總抗氧化能力（T-AOC）及脂褐質(zhì)（LF）含量。

2.3?統(tǒng)計學處理?實驗數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行處理，各組實驗參數(shù)以表示，組間比較按方差分析進行顯著性檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

3?結果

與空白對照組比較，模型組小鼠皮膚組織T-AOC活性明顯降低（P<0.01），LF含量明顯升高（P<0.01）。相對于模型組，枸杞多糖低、中、高劑量組小鼠皮膚T-AOC活性均顯著升高（P<0.05，P<0.05，P<0.01），LF含量明顯降低（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。表明枸杞多糖低、中、高劑量均能提高衰老模型組小鼠皮膚組織T-AOC活性，降低LF含量。詳見表1。

4?討論

衰老是生命過程中正常而又復雜的生理現(xiàn)象，皮膚作為人體最大的器官，其衰老是人類生命歷程中不可抗拒的規(guī)律[4]。皮膚老化分為時呈老化與光老化，前者是內(nèi)源性因素所致，是衰老的根本，受遺傳、內(nèi)分泌等生理進化因素影響;后者是外源性因素所致，是皮膚衰老的重要影響條件，受紫外線、季節(jié)、生活壓力、生活習慣、疾病等影響。皮膚衰老是內(nèi)源性因素與外源性因素共同作用的結果。其顯著特征是皮膚出現(xiàn)松弛及皺紋，暴露處皮膚粗糙、彈性降低、血管擴張、色素沉著、表皮角化不良等[5]。

現(xiàn)代醫(yī)學對衰老的解釋有不同學說，其中較為公認并得到廣泛認可的是自由基學說，它認為皮膚衰老是自由基產(chǎn)生和消除發(fā)生障礙的結果。機體每天代謝時產(chǎn)生的自由基在正常情況下可被清除，但隨著年齡的增長，氧自由基加速形成。自由基形成后，不斷攻擊細胞膜中的不飽和脂肪酸，形成過氧化脂質(zhì)（Lipide Peroxide，LPO），后者則與膜脂、膜蛋白聚合，交聯(lián)形成脂褐質(zhì)（LF）并沉積于組織中，造成細胞功能障礙，加速細胞衰老[7]。因此，LF含量的高低間接反應了機體細胞受自由基損傷的嚴重程度。健康生物體內(nèi)有抗氧化的酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)，其中酶系統(tǒng)包括超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）等，非酶系統(tǒng)有VitE，生育酚，β胡蘿卜素，谷胱甘肽，白蛋白等，這些物質(zhì)均可及時處理氧自由基。因此，抗氧化力的測定引起人們的廣泛關注。而總抗氧化能力（T-AOC）是一個全面反映皮膚組織抗氧化能力的良好指標，它的活力高低可全面反映皮膚組織中酶與非酶全部的抗氧化物。

研究結果顯示，模型組小鼠皮膚細胞損傷，代謝紊亂，皮膚T-AOC活性明顯降低，LF含量顯著升高。枸杞多糖低、中、高劑量均可明顯提高D-半乳糖致亞急性衰老模型小鼠皮膚組織T-AOC活性，降低皮膚組織LF含量，提示枸杞多糖能從一定程度上提高抗氧化能力，清除體內(nèi)自由基，減輕或抑制脂質(zhì)過氧化損傷，從而起到延緩衰老的作用。

參考文獻

[1]苗婷婷，嚴青，王君潔，等.枸杞多糖抗衰老研究進展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2019，15（6）：178.

[2]鄭棋月，任建武.枸杞多糖延緩衰老的研究進展[J].中國園藝文摘，2014，12：48.

[3]汪建龍.枸杞多糖藥理作用的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥，2005，16（10）：1032.

[4]王明軍，譚敏誼，劉洋，等.養(yǎng)顏駐顏口服液改善皮膚衰老的作用研究[J].中藥材，2017，40（3）：716.

[5]朱華偉，葛亞中，汪曉凌，等.復方美姿力口服液對D-半乳糖聯(lián)合紫外線照射致皮膚衰老裸鼠模型的影響[J].中藥材，2019，42（3）：667.

[6]孫程，王冬東，張輝靠，等.茶樹提取物經(jīng)皮給藥對衰老小鼠皮膚的影響[J].中成藥，2017，39（8）：1693.

[7]敖拉哈.衰老與自由基[J].老年醫(yī)學與保健，1999，5（2）：112.

（收稿日期：2019-12-09?編輯：劉斌）