韋海球，羅晟昇，唐利球，江清梅

（廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所/農(nóng)業(yè)部龍州熱帶作物科學(xué)觀測綜合實(shí)驗(yàn)站，廣西 崇左 532415）

選育和推廣甘蔗新品種是提高我國甘蔗產(chǎn)量、降低蔗糖生產(chǎn)成本的重要手段［1-2］。目前，我國甘蔗旱坡地栽種面積已占植蔗面積的80%以上。迫切需要推廣種植強(qiáng)宿根抗旱甘蔗新品種，以提高我國甘蔗單產(chǎn)，保證蔗糖產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定可持續(xù)發(fā)展。甘蔗新品種桂柳05136由桂柳縣甘蔗研究中心選育，品種來源是以CP81-1254為母本，新臺糖22號為父本的雜交后代，2014年4月通過國家作物品種審定委員會（甘蔗）鑒定。2014年6月通過廣西區(qū)農(nóng)作物品種審定會的審定，經(jīng)試驗(yàn)和生產(chǎn)表證示范該品種具有強(qiáng)生長勢、早熟、高產(chǎn)、高糖、宿根好、適應(yīng)性強(qiáng)的優(yōu)良農(nóng)藝性狀［3］。

1 材料和方法

1.1 材料

以廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所種植的甘蔗品種桂柳05136為試驗(yàn)材料，取甘蔗莖頂部長約60 cm，帶回實(shí)驗(yàn)室后剝?nèi)ゲ糠掷先~梢，即獲得外植體。

1.2 外植體的處理和愈傷誘導(dǎo)

取甘蔗外植體，用75%酒精輕輕擦拭表面，放入超凈工作臺中。剝?nèi)ネ馊~梢至甘蔗幼嫩葉片，置于已滅菌消毒的盤子內(nèi)切成1 mm薄片，接種于瓶內(nèi)，每瓶接種10片，放置于28℃的恒溫培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行暗培養(yǎng)。培養(yǎng)基配方為改良MS+（0.5、1、1.5、2、2.5 mg/L）2,4-D+30 g/L糖+8 g/L卡拉膠。觀察記錄愈傷組織的情況。

1．3 分化誘導(dǎo)與增殖培養(yǎng)

將生長良好的愈傷組織隨機(jī)接種于分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，分化培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即改良MS+（0.25、0.5、1、2、3 mg/L）6-BA+30 g/L糖+8 g/L卡拉膠，每個(gè)處理接種15瓶，每瓶接種10個(gè)。光照培養(yǎng)20～25 d，光照14 h，光照度為1500～2000 lx，溫度為28℃，觀察并記錄芽分化的情況。將分化培養(yǎng)獲得的小苗轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即改良MS+（0.5、1、2、3、4 mg/L）6-BA+30 g/L糖。將分化出來的甘蔗苗切小至后5～6株一叢，每個(gè)組合接種15瓶。光照培養(yǎng)20～25 d后換1次培養(yǎng)基，增殖培養(yǎng)5次，光照14 h。光照度為1500～2000 lx，溫度為28℃，觀察并記錄組培苗增殖的情況。

1．4 生根培養(yǎng)

增殖獲得的甘蔗小苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基以改良MS為基本培養(yǎng)基，設(shè)置5個(gè)處理，即MS+（3、4、5、6、7 mg/L）NAA+70 g/L糖，將比較大叢的甘蔗組培苗自然分離成較小的叢苗，每個(gè)組合中接種14瓶，每瓶接種10株。光照培養(yǎng)20～25 d，光照14 h，光照度為1500～2000 lx，溫度為28 ℃，觀察并記錄生根情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 2,4-D濃度對愈傷的影響

2,4-D濃度對甘蔗愈傷的生長影響很大，當(dāng)濃度較低時(shí)，愈傷的生長較慢，質(zhì)地也比較硬；當(dāng)濃度較高時(shí)，愈傷的長勢好，但是愈傷的質(zhì)量較差，活性不好，難以分化，分化后容易出現(xiàn)變異。由表1可以看出當(dāng)2,4-D濃度為2 mg/L時(shí)愈傷組織長勢好，呈淡黃色，而且質(zhì)量最好。因此，最適宜桂柳05136愈傷生長的培養(yǎng)基為MS+2 mg/L 2,4-D。

表1 2,4-D濃度對桂柳05136甘蔗愈傷誘導(dǎo)的影響

2.2 6-BA濃度對愈傷組織分化的影響

從表2可以看出，隨著6-BA濃度不斷提高，分化出苗率也隨之提高，當(dāng)其濃度達(dá)到2 mg/L時(shí)，出苗率最高，達(dá)到75%，隨后出苗率降低；當(dāng)6-BA濃度為3 mg/L時(shí)，出苗率為58.3%，苗的長勢一般。隨著6-BA濃度不斷增加，長勢也越好，芽亦粗壯，當(dāng)6-BA濃度為2 mg/L時(shí)，苗長勢最好，葉片濃綠，芽粗壯。由此可以看出，最適宜桂柳05136甘蔗愈傷組織分化出苗的培養(yǎng)基為改良MS+2 mg/L 6-BA。

表2 6-BA濃度對愈傷組織分化的影響

2.3 6-BA濃度對甘蔗增殖系數(shù)的影響

從表3可以看出，隨著6-BA濃度升高，甘蔗增值率不斷升高，葉色逐漸變深，在6-BA低濃度時(shí)，還有根長出。當(dāng)6-BA濃度為3 mg/L時(shí)，增殖系數(shù)為3.5，苗最粗壯，葉色深綠。由此可以看出：最適宜桂柳05136增殖的培養(yǎng)基為改良MS+3 mg/L 6-BA，在該培養(yǎng)基中增殖獲得的甘蔗小苗長勢好，葉濃綠，增殖率最高。

表3 6-BA濃度對甘蔗增殖率的影響

2.4 NAA濃度對甘蔗組培苗生根的影響

從表4可以看出，NAA是影響生根的重要因素。處理中都可以生根，NAA的濃度對根的生長速度影響較大，隨著NAA濃度的升高，根的長度會隨之變化，當(dāng)NAA的濃度在5 mg/L時(shí)根的誘導(dǎo)最快、根長最長，也最為粗壯，植株生長健壯。由此可以看出，最適宜桂柳05136的生根培養(yǎng)基為改良MS+5 mg/L NAA。

表4 NAA濃度對甘蔗組培苗生根的影響

3 結(jié)論

甘蔗的組織培養(yǎng)有一定的特性，不同品種之間存在一定的差異，特別是在愈傷誘導(dǎo)方面。有些品種需要較高的2,4-D濃度，而有些品種愈傷在較低濃度時(shí)生長良好。2,4-D低濃度時(shí)愈傷生長慢，長勢不好，質(zhì)量不好；而濃度高時(shí)，愈傷的生長過快，活性不好，容易變異。因此，愈傷誘導(dǎo)時(shí)2,4-D的濃度一定要控制好。試驗(yàn)結(jié)果表明：桂柳05136在2,4-D濃度為2 mg/L時(shí)，最適宜愈傷組織誘導(dǎo)。6-BA濃度會影響愈傷組織分化，濃度太高或太低都會抑制分化出苗，只有在適宜的濃度下，才會比較好的分化出苗，最適宜桂柳05136分化的培養(yǎng)基為改良MS+2 mg/L 6-BA。6-BA的濃度也影響著甘蔗增殖率，濃度太低，增殖率不理想，過高容易出現(xiàn)變異，最適宜桂柳05136的培養(yǎng)基為改良MS+3 mg/L 6-BA，在該培養(yǎng)基中增殖獲得的甘蔗小苗長勢好，葉濃綠，增殖率最高。NAA是影響甘蔗組培苗生根的重要因素，當(dāng)NAA的濃度在5 mg/L時(shí)根的誘導(dǎo)最快、根長最長，也最為粗壯，植株生長健壯。