劉彥釗 張麗麗

近些年來，由于β-內(nèi)酰胺類抗生素細(xì)菌耐藥性通過食物鏈從動物源性食品向人體的轉(zhuǎn)移，消費(fèi)者越來越擔(dān)心畜牧業(yè)及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的抗生素濫用情況。動物源性食品中β-內(nèi)酰胺類抗生素的低濃度水平和基質(zhì)復(fù)雜性，使得在測定其殘留量時(shí)必須使用高度敏感、高特異性的測定方法。目前，高效液相色譜法（HPLC）聯(lián)合其他檢測儀器已被廣泛用于動物源性食品中β-內(nèi)酰胺類抗生素殘留的檢測分析。

一、高效液相色譜-紫外檢測法

目前，通過使用二極管陣列檢測器（DAD）進(jìn)行UV檢測是與HPLC結(jié)合使用的非常流行的技術(shù)，但在確定β-內(nèi)酰胺方面存在一些局限性，例如，由于缺乏生色團(tuán)而導(dǎo)致靈敏度較低，HPLC-UV甚至在不使用DAD的情況下也不能完全可靠地進(jìn)行β-內(nèi)酰胺確認(rèn)。

二、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

質(zhì)譜法是確定食品中是否存在β-內(nèi)酰胺的首選檢測技術(shù)。盡管此檢測技術(shù)具有很高的選擇性，但仍需要先進(jìn)行色譜分離，以避免共洗脫化合物的離子抑制。β-內(nèi)酰胺首先使用熱噴霧通過HPLC-MS測定，由于β-內(nèi)酰胺電離的簡便性，目前電噴霧電離（ESI）是這兩種技術(shù)之間的首選接口。盡管β-內(nèi)酰胺具有羧基，但是由于靈敏度較高，通常使用正離子化。

三、高效液相色譜-化學(xué)發(fā)光法

由于其固有的靈敏度和選擇性，化學(xué)發(fā)光檢測是抗生素檢測中常用的方法。β-內(nèi)酰胺可以通過兩種方式參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)：增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光發(fā)射；用合適的化學(xué)發(fā)光試劑衍生化。

目前與高效液相色譜聯(lián)用檢測β-內(nèi)酰胺抗生素的化學(xué)發(fā)光體系常見的有KMnO4、Ce（IV）、魯米諾、Ru（bpy）3 2+等。

四、高效液相色譜-熒光分析法

目前已有使用高效液相色譜法聯(lián)合熒光檢測器測定β-內(nèi)酰胺的相關(guān)報(bào)道。由于β-內(nèi)酰胺類化合物中缺少熒光團(tuán)，通常需要衍生化，而衍生化造成處理過程繁瑣，所以效率不佳。一般來講，使用化學(xué)發(fā)光能夠檢測的β-內(nèi)酰胺化合物也可使用熒光分析檢測，但化學(xué)發(fā)光可獲得更好的靈敏度。（基金項(xiàng)目：河南省教育廳項(xiàng)目： 河南省高等學(xué)校青年骨干教師培養(yǎng)計(jì)劃（2016GGJS-266）。）

作者簡介：劉彥釗（1978–），男，副教授，研究方向：分析化學(xué)。