侯志斌 劉春艷 郭新建

【摘 要】 目的：研究磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1（PDK-1）表達(dá)水平與胃癌相關(guān)病理學(xué)參數(shù)的關(guān)聯(lián)性。方法：選取我院2018年6月～2019年6月胃癌患者88例為胃癌組，并按照2：1的配比選擇同期健康體檢者44名為健康組。兩組均測(cè)定PDK-1水平，并分析其與胃癌病理學(xué)參數(shù)的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果：胃癌組PDK-1水平高于健康組，PDK-1陽(yáng)性表達(dá)率86.36%高于健康組4.55%（P<0.05）;PDK-1表達(dá)陽(yáng)性在胃癌患者管狀腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸潤(rùn)、淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移等病理學(xué)參數(shù)中占比高于表達(dá)陰性（P<0.05）。結(jié)論：胃癌患者中PDK-1表達(dá)水平高于正常胃黏膜組織，且與病理學(xué)參數(shù)具有相關(guān)性，可作為胃癌生物標(biāo)志物，指導(dǎo)臨床診斷與治療。

【關(guān)鍵詞】 磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1;胃癌;病理學(xué)參數(shù);關(guān)聯(lián)性

胃癌是臨床常見(jiàn)胃腸道惡性腫瘤，發(fā)生率、死亡率均較高，且大多數(shù)患者確診時(shí)已為晚期，且易發(fā)生轉(zhuǎn)移[1]。臨床需依據(jù)胃癌發(fā)生、發(fā)展規(guī)律，尋找新的胃癌生物標(biāo)志物，對(duì)胃癌早期進(jìn)行診斷、治療具有重要意義。磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1（PDK-1）屬于單體多肽酶，與多種癌癥發(fā)生、發(fā)展密切有關(guān)，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、加快血管生成速度。本研究選取我院胃癌患者88例，旨在探討PDK-1與病理學(xué)參數(shù)的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取我院2018年6月～2019年6月胃癌患者88例為胃癌組，并按照2：1的比例選擇同期健康體檢者44名為健康組。健康組男22例，女22例;年齡55～82歲，平均（63.57±4.10）歲。胃癌組男46例，女42例;年齡56～83歲，平均（64.38±4.26）歲;病程3～8年，平均（5.98±0.89）年。兩組基線資料（性別、年齡）均衡可比（P>0.05）。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理組織學(xué)、胃鏡等檢查確診為胃癌;預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月;均簽署知情同意書(shū)。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：肝腎功能不全;神經(jīng)系統(tǒng)病變、精神障礙;膽汁瘀積;其他惡性腫瘤;嚴(yán)重高血壓;血液系統(tǒng)疾病。

1.3 方法 （1）PDK-1水平測(cè)定：取胃癌組胃癌組織、健康組胃黏膜組織0.1g，加入液氮（少量），于研缽中迅速碾碎至粉末狀，轉(zhuǎn)移至Eppendorf管中（2ml），加入pH為7.4的磷酸緩沖液（PBS）1.2ml，充分震蕩后混勻，于4℃下12000r/min的速度離心20min后收集上清液;獲取胃組織勻漿后，采用上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒以Elisa法測(cè)定PDK-1表達(dá)水平。（2）PDK-1陰、陽(yáng)性表達(dá)：采用免疫組化法，制作常規(guī)5μm胃癌組織、正常胃黏膜石蠟切片，以常溫3% H2O2阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化氫酶活性，微波進(jìn)行抗原修復(fù)，以PBS沖洗;采用英國(guó)Albcam公司生產(chǎn)的1% PDK-1抗體工作液，在4℃下過(guò)夜，加入二抗（IgG），于室溫下防止30min，加入鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物，以PBS沖洗，二氨基聯(lián)苯胺（DAB）進(jìn)行顯色，復(fù)染采用蘇木素，脫水采用梯度酒精，透明采用二甲苯，封片。結(jié)果統(tǒng)計(jì)：隨機(jī)選擇5個(gè)（×400）高倍視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，棕褐色為3分，棕黃色為2分，淡黃色為1分，無(wú)色為0分;棕黃色及以上細(xì)胞計(jì)數(shù)≤5%為（-），6%～25%為（+），26%～50%為（++），>50%為（+++），其中（-）、（+）為陰性，（++）、（+++）為陽(yáng)性。

1.4 觀察指標(biāo) （1）兩組PDK-1水平及表達(dá)。（2）PDK-1表達(dá)與病理學(xué)參數(shù)關(guān)聯(lián)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（x±s）表示，行t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PDK-1水平及表達(dá) 胃癌組PDK-1水平高于健康組，PDK-1陽(yáng)性表達(dá)率86.36%高于健康組4.55%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 PDK-1表達(dá)與病理學(xué)參數(shù)關(guān)聯(lián)性 PDK-1表達(dá)陽(yáng)性在胃癌患者管狀腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸潤(rùn)、淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移等病理學(xué)參數(shù)中占比高于表達(dá)陰性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

近年來(lái)胃癌發(fā)病率逐漸升高，且早期癌變癥狀不明顯，早期預(yù)防、診斷、治療具有重要意義。

本研究對(duì)PDK-1水平進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示胃癌組PDK-1水平高于健康組，PDK-1陽(yáng)性表達(dá)率86.36%高于健康組4.55%（P<0.05）。PDK-1能活化PI3K/PKB信號(hào)傳導(dǎo)通路，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲，因此在胃癌組織與正常胃黏膜組織中表達(dá)存在較大差異。本研究結(jié)果還顯示，PDK-1表達(dá)陽(yáng)性在胃癌患者管狀腺癌、高分化、Ⅲ～Ⅳ期、有浸潤(rùn)、淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移等病理學(xué)參數(shù)中占比高于表達(dá)陰性（P<0.05），與張穎等[2]學(xué)者研究一致。PDK-1過(guò)量表達(dá)時(shí)，導(dǎo)致游離蛋白積聚于細(xì)胞內(nèi)并進(jìn)入細(xì)胞核，激活WNT信號(hào)通路，導(dǎo)致靶基因異常轉(zhuǎn)錄，過(guò)度表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞大量繁殖并分化，最終發(fā)生癌變。且病理學(xué)分級(jí)、TNM分級(jí)越高，浸潤(rùn)深度越深，淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移，PDK-1陽(yáng)性表達(dá)率越高，二者具有相關(guān)性，可作為診斷胃癌的生物標(biāo)志物。

綜上所述，胃癌患者中PDK-1表達(dá)水平高于正常胃黏膜組織，且與病理學(xué)參數(shù)具有相關(guān)性，可作為胃癌生物標(biāo)志物，指導(dǎo)臨床診斷與治療。

參考文獻(xiàn)

[1] 丁雪蓮.β-細(xì)辛醚通過(guò)調(diào)控胃癌PDKs表達(dá)增加化療敏感性研究[D].南京中醫(yī)藥大學(xué)，2017.

[2] 張穎，孫志鵬，余春開(kāi)，等.胃癌患者癌組織中PDK-1蛋白表達(dá)水平及其臨床意義[J].中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2018，21（03）：298-303.